哺乳期磺胺间甲氧嘧啶暴露对仔鼠骨骼

发布时间：2017-04-10 23:37

  本文关键词：哺乳期磺胺间甲氧嘧啶暴露对仔鼠骨骼肌、脑发育及行为学影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:研究哺乳期磺胺间甲氧嘧啶(Sulfamonomethoxine,SMM)暴露对仔鼠内分泌、骨骼肌和脑发育及对仔鼠探索、焦虑、认知等行为的影响,并探讨m TOR信号通路相关信号对其调节作用。方法:ICR小鼠哺乳期以0、10、50、200 mg/kg灌胃SMM染毒,连续21 d,断乳后其仔鼠雌、雄分笼正常喂养至出生后天数第63天(PND63),每周称重1次;哺乳期内测其体长和头围。部分仔鼠断乳后即剖杀,采集血清和主要脏器,称量腓肠肌、肝脏、肾脏和大脑等脏器重量,计算其脏器系数;部分仔鼠PND50开始,按照旷场、黑白巷、高架十字迷宫和Morris水迷宫顺序进行行为学实验,实验结束剖杀,采集血清。放射免疫法测定血清中生长激素(Growth hormone,GH),胰岛素(Insulin,INS),三碘甲腺原氨酸(Triiodothyronine,T3),甲状腺激素(Thyroxine,T4),皮质酮(Corticosterone,COR),促肾上腺皮质激素(Adrenocorticotropic hormone,ACTH)和雌激素(Estradio,E2)浓度;酶联免疫法测定血清中胰岛素样生长因子1(Insulin-like growth factor-1,IGF-1)浓度;高效液相色谱法测定断乳时血清SMM及代谢物乙酰化SMM(ACSMM)浓度;二喹啉甲酸(Bicinchoninic acid,BCA)法测定腓肠肌和脑组织总蛋白含量;氨基酸分析仪测定腓肠肌和脑组织游离氨基酸水平;实时定量-聚合酶链反应(Real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)法测定腓肠肌和脑组织m TOR信号通路的基因表达水平。结果:哺乳期SMM暴露的仔鼠,从PND1至PND63仔鼠体重各剂量组间无统计学差异(P0.05)。与对照组相比,PND7时,各剂量组体长、头围差异均无统计学意义(P0.05);PND14时,体长各剂量组间差异无统计学意义(P0.05),但高剂量组头围显著降低(P0.05);PND21时高剂量组体长和头围均显著降低(P0.05)。PND21时,与对照组相比,骨骼肌、肝脏和大脑等脏器系数各剂量组间差异无统计学意义(P0.05);但低、高剂量组肾脏脏器系数显著降低(P0.05);高剂量组血糖和INS水平显著降低(P0.05);GH,T4,T3和IGF-1水平各剂量组间差异无统计学差异(P0.05)。PND63时,与对照组相比,中、高剂量组T4水平显著下降(P0.05);中、高剂量组COR和ACTH水平显著升高(P0.05);中剂量E2水平显著下降(P0.05),而INS和T3水平各剂量组无统计学差异(P0.05)。行为学实验显示:与对照组雄鼠比较,旷场实验低、中剂量组中央区域时间显著增加(P0.01),中剂量组站立次数显著增加(P0.01)。与对照组雌鼠比较,旷场实验低剂量组中央区域时间显著增加(P0.01),中剂量组跨越格子数增加(P0.05);黑白巷实验高剂量组在黑端时间增加(P0.05)。而高架十字迷宫实验各指标雄性和雌性仔鼠各剂量组间无统计学差异(P0.05)。Morris水迷宫实验,与对照组比较,雄性仔鼠在第4天逃避潜伏期低、中、高剂量组显著下降(P0.05);雌性仔鼠的逃避潜伏期高剂量组在第2,4,5天显著下降(P0.05);游泳距离雌性仔鼠的高剂量组在第5天时显著延长(P0.05);游泳速度雌鼠的低剂量组在第3天时显著下降(P0.05)。PND21时,仔鼠腓肠肌游离氨基酸,与对照组比较,中剂量组的谷氨酸(Glutamic acid,Glu),甘氨酸(Glycine,Gly),丙氨酸(Alanine,Ala),瓜氨酸(Citrullinr,Cit),蛋氨酸(Methionine,Met),组氨酸(Histidine,His),鹅肌肽(Anserine,Ans)含量显著升高(P0.05),高剂量组的Cit和Ans含量也显著升高(P0.05),而低剂量组的Cit含量显著降低(P0.01)。PND21时,仔鼠脑组织游离氨基酸谱,与对照组相比,中剂量组的牛磺酸(Taurine,Tau),Glu和Ans含量显著降低(P0.05),但是低、中剂量组的Car均显著升高,低剂量组的Ans显著降低(P0.05)。PND63时,雄性仔鼠脑组织游离氨基酸谱,与对照组相比,低剂量组组的必须氨基酸含量显著增高(P0.05),中、高剂量组的非必须氨基酸含量显著增高(P0.05),而高剂量组的支链氨基酸显著降低(P0.05);中剂量组的Tau,Glu和γ-氨基正丁酸(Gamma amino butyric acid,g-ABA),显著升高(P0.05),高剂量组的α-氨基正丁酸(Alpha amino butyric acid,a-ABA),胱氨酸(Cysteine,(Cys)2,),异亮氨酸(Isoleucine,Ile)和酪氨酸(Tyrosine,Tyr)显著降低(P0.05),而高剂量组的Glu和g-ABA显著升高的(P0.05)。而雌性仔鼠脑组织高剂量组的His含量显著降低(P0.01),中剂量组的精氨酸(Arginine,Arg)显著升高(P0.01)。哺乳期SMM暴露对断乳时仔鼠腓肠肌mtor,Pi3k3ca,Pi3k3cb,Akt1,Eif4ebp1和Rps6kb1各剂量组间的表达量无统计学差异(P0.05);与对照组比较,脑组织低剂量组Mtor表达量显著下降(P0.05),中、高剂量组Mtor表达量显著升高(P0.05),Pi3k3ca,Pi3k3cb和Rps6kb1表达量中、高剂量组显著升高(P0.05),Akt1表达量低剂量组显著升高(P0.05),Eif4ebp1表达量中剂量组显著升高(P0.05)。结论:哺乳期SMM暴露干扰了仔鼠血清甲状腺激素、胰岛素、促肾上腺皮质激素、皮质酮和雌激素等激素分泌,对骨骼肌、脑组织氨基酸代谢有一定的改变作用,影响了脑发育,改变了仔鼠的探索、焦虑和认知等精神行为。
【关键词】：仔鼠 哺乳期 磺胺间甲氧嘧啶 骨骼肌 脑 行为学 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R174
【目录】：

• 缩略词表5-7
• 中文摘要7-10
• 英文摘要10-14
• 1 前言14-16
• 2 材料与方法16-25
• 3 结果25-48
• 3.1 哺乳期SMM暴露母鼠及仔鼠血清SMM及ACSMM浓度25
• 3.2 哺乳期SMM暴露对仔鼠生理发育及血糖、激素的影响25-34
• 3.3 哺乳期SMM暴露对仔鼠行为发育及认知功能的影响34-41
• 3.4 哺乳期SMM暴露对仔鼠腓肠肌、脑组织总蛋白及游离氨基酸谱的影响41-45
• 3.5 哺乳期SMM暴露对仔鼠腓肠肌和脑组织mTOR信号通路mRNA表达的影响45-48
• 4 讨论48-51
• 4.1 哺乳期SMM暴露对仔鼠行为学的影响48-49
• 4.2 哺乳期SMM暴露对仔鼠激素的影响49-50
• 4.3 哺乳期SMM暴露对仔鼠骨骼肌及脑组织氨基酸的影响50
• 4.4 哺乳期SMM暴露对仔鼠腓肠肌和脑组织mTOR信号通路mRNA表达的影响50-51
• 5 结论51
• 6 参考文献51-58
• 附录58-60
• 致谢60-61
• 综述61-73
• 参考文献67-73

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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本文编号：297807