LncRNA在纳米镍诱导大鼠生精—支持细胞凋亡中的调控机制研究

发布时间：2021-01-19 19:26

　　随着纳米科技的迅速发展,纳米材料被广泛应用于很多领域。纳米镍是一种具有高水平表面能量、高磁性、低熔点、低燃点和高表面积的新特性产品,因此其在催化剂、传感器和电子应用等现代工业中得到广泛应用。然而,纳米镍对接触者的潜在危害也得到广泛关注。纳米颗粒的尺寸效应使它们能够容易地运送到生物系统中,从而引发了它们对易感系统的影响。因此,纳米镍对环境和人体健康影响的科学研究势在必行。男性生殖健康已经成为目前环境污染引发的重要问题之一,越来越引起人们的重视,也是目前毒理学研究热点之一。长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）是一类长度一般超过200个核苷酸并且不翻译成蛋白质的RNA转录物,一度被认为是转录“噪音”。但越来越多的研究表明lncRNA在许多生物过程中发挥重要作用,包括细胞分化,细胞命运,增殖和凋亡。我们前期研究发现,纳米镍对大鼠和模式生物秀丽隐杆线虫均具有生殖毒性,尤其对雄性大鼠生殖细胞具有明显损害。进一步研究显示纳米镍可通过诱导细胞凋亡产生生殖细胞损害。但迄今为止,纳米粒子引发生殖细胞损伤机制并不明确,在此过程中涉及的关键分子事件尚未得到探索。因此,本课题... 

【文章来源】：东南大学江苏省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：90 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

纳米镍的表征（A:SEM图；B:TEM图；C：5μg/ml纳米镍粒径分布图；D：12.5μg/ml纳米镍粒径分布

支持细胞的胞质变多，折光性较之前下降，并与生精细胞建立连接；48 h 后（图2.1D）细胞间隙变小，支持细胞的胞质逐渐铺展开来，生精细胞贴附于支持细胞上生长；培养 72h 后（图 2.1E），支持细胞完全铺展开，细胞之间相互连接，成单层膜状，圆形的生精细胞大小不同，细胞折光性持续下降。图 2.1 大鼠生精-支持共培养细胞形态（200×）（A：0 h；B：12 h；C:24 h；D：48 h；E：72 h）2.2 Feulgen 染色法鉴定大鼠生精-支持共培养细胞结果结果如图 2.2 所示，支持细胞的胞体较大且形状不规则，胞核呈椭圆形，胞质呈网状，支持细胞核仁区着色较淡，细胞核内可以看到深紫色双极小体；圆形或卵圆形的生精细胞胞核大但胞质少，生精细胞的细胞核占据细胞体积的约 90%。（图中箭头）。

图 2.2 Feulgen 染色法鉴定生精-支持细胞（200×）3 讨论本实验建立的大鼠睾丸生精-支持细胞共培养体系是在参考季佳佳[27]的方法基础上进行改进的，共培养期间，生精细胞不需添加生长因子就能够贴附于支持细胞层上生长，并长期共生。大鼠睾丸生精-支持共培养细胞模型的建立为体外研究生殖毒性提供了良好的细胞模型。据文献[26]介绍的生精细胞和支持细胞的鉴定方法，支持细胞特殊性在可以观察到细胞核内的双极小体。运用 Feulgen 染色法，对生精细胞和支持细胞进行鉴定。结果显示：支持细胞的胞体较大且形状不规则，胞核呈椭圆形，胞质呈网状，支持细胞核仁区着色较淡，细胞核内可以看到深紫色双极小；圆形或卵圆形的生精细胞胞核大但胞质少，生精细胞的细胞核占据细胞体积的约 90%，在共培养体系中，生精细胞主要包括精母和精子细胞，二者体积差异较大，其中大于 15 μm 为精母细胞，而初级精母大多大于 20 μm。

【参考文献】：
期刊论文
[1]细胞凋亡通路研究进展[J]. 赵彦超,顾耘.  现代医学. 2013(04)

硕士论文
[1]纳米银诱导氧化应激及其毒性机制研究[D]. 张帮勇.东南大学 2016
[2]ROS在硫酸镍诱导大鼠睾丸间质细胞内质网应激和线粒体凋亡通路中的作用[D]. 孙铱钒.兰州大学 2016
[3]二硫化碳对共培养大鼠睾丸支持—生精细胞凋亡和凋亡相关蛋白表达的影响[D]. 季佳佳.华中科技大学 2008



本文编号：2987577