α-突触核蛋白在锰诱导小鼠神经细胞内质网应激中的作用

发布时间：2021-01-24 05:21

　　目的:锰是人类必需的微量元素之一,在大脑生理功能及自稳态中扮演重要作用,锰可以通过不同的机制被转运并贯穿血-脑屏障到达大脑。长期过度暴露于锰,对大脑产生有害作用,导致锰中毒的状态。锰中毒主要来源是职业暴露,如熔炼、锰矿合金工业的暴露,锰也可能由于应用燃料添加剂（MMT）,其增加了空气中锰水平导致更广泛的非职业性锰暴露。在锰的神经毒作用中,过度表达的α-突触核蛋白起着非常重要的作用。锰可以诱导内质网应激从而引起脑损伤,但是其具体机制尚不清楚。那么,α-Syn蛋白与锰诱导内质网应激之间的关系是怎样的呢?我们采用野生型及α-Syn基因敲除型小鼠进行实验,观察小鼠行为改变、检测纹状体中锰含量、细胞凋亡率以及内质网应激三条信号通路PERK通路、IRE1通路和ATF6通路相关分子表达情况,探讨α-Syn蛋白在锰诱导神经细胞内质网应激中的作用,进一步了解内质网应激发生机制。方法:本研究选取野生型小鼠(α-Syn^+/+)40只和α-Syn基因敲除型(α-Syn^-/-)小鼠40只,各分4组进行实验,α-Syn^+/+对照组（野生型小鼠腹腔注... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：51 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

1锰暴露小鼠脑内纹状体中锰含量检测结果（，n=6）

图 3.3.1 锰暴露小鼠神经细胞凋亡率检测结果（ x s，n=6）: a -Syn+/+对照组；b -Syn-/-对照组；c -Syn+/+低锰组；d -Syn-/-低锰组；e -Syn+/+中锰组；f -Syn-/-中锰组；g -Syn+/+高锰组；h -Syn-/-高锰组露对野生型小鼠神经细胞 -Syn 基因和蛋白表达的影响验采用 qRT-PCR 扩增技术来检测 -Syn 基因表达水平以及blot 技术来检测 -Syn 蛋白表达情况，得到 -Syn 基因表达情况结果 -Syn+/+高锰组的 -Syn 基因表达显著增加，为 -Syn+/+对照组的.01）； -Syn 蛋白表达情况结果显示： -Syn+/+高锰组的 -Syn 蛋加，为 -Syn+/+对照相的 1.87 倍（P<0.01），差异有统计学意义

图 3.4.1 锰暴露小鼠神经细胞 -Syn 基因及蛋白检测结果及免疫印迹图（ x s，n=4）（注: 与 -Syn+/+对照组比较，＊＊P<0. 01；）3.5 锰暴露对小鼠神经细胞内质网应激 PERK-eIF2a 通路相关信号分子基因和蛋白表达影响本实验采用 qRT-PCR 扩增技术来检测 ATF4 基因表达水平以及采用Western-blot 技术来检测 PERK（p）、eIF2a（p）、ATF4 蛋白表达情况结果如下图所示： -Syn+/+中、高锰组 p-PERK 蛋白表达水平均升高，分别为 -Syn+/+对照组的 1.55 倍（P<0.01）和 1.69 倍（P<0.01）； -Syn-/-中、高锰组 p-PERK 蛋白表达水平较比 -Syn-/-对照组降低 34.20％（P<0.01）和 36.93％（P<0.01）；与-Syn+/+中锰组相比， -Syn-/-中锰组的 p-PERK 蛋白表达水平下降 23.96％（P<0.01），与 -Syn+/+高锰组相比， -Syn-/-高锰组的 p-PERK 蛋白表达水平下降 23.70％。 -Syn+/+中、高锰组 PERK 蛋白表达水平均显著升高，分别为 -Syn+/+


本文编号：2996653