TGF-β/SMAD信号通路在双酚A诱导细胞凋亡中的作用

发布时间：2021-01-30 17:48

　　目的双酚A（BPA）为一种应用广泛的环境内分泌干扰物,可通过多种途径进入人体,对神经、生殖及免疫系统造成损伤。研究表明BPA可以诱导免疫细胞发生凋亡,进而影响机体正常的免疫功能。睾丸巨噬细胞（TM）为一类存在于睾丸间质中的免疫细胞,对维持整个睾丸内环境起重要作用。本研究以大鼠TM细胞为靶细胞,以脂多糖（LPS）作为激活剂,建立BPA暴露模型,应用基因表达谱芯片技术,探讨BPA对TM细胞基因表达的影响。在此基础上,分别建立BPA暴露体内和体外模型,选择BPA上调最明显的TGF-β/SMAD信号通路,探讨其在BPA诱导大鼠细胞凋亡中的作用,为进一步研究BPA的免疫生殖毒作用机制提供理论依据。方法原代提取大鼠TM细胞,以50μg/ml LPS为激活剂,1 00μmol/L BPA作用于TM细胞24h,应用基因表达谱芯片技术,筛选影响最为明显的基因及信号通路;以50μg/ml LPS为激活剂,100μmol/L BPA作用TM细胞4h和24h,应用流式细胞仪检测作用24h后TM细胞凋亡水平,应用RT-PCR检测作用4h后TM细胞TGF-β2、TGF-β3、SMAD6、SMAD7、BAX和BCL... 

【文章来源】：沈阳医学院辽宁省

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

BPA与激活剂基因表达差异(火山图)

牐穑恚铮欤?蹋牐拢校寥径荆玻矗瑁?τ昧魇较赴?崳?仪检测细胞凋亡水平。结果显示，与激活剂组比较，１〇〇?ｐｍｏｌ／ＬＢＰＡ组细胞早期??凋亡，晚期凋亡和总凋亡率均无明显差异（图３Ａ）。??应用ＲＴ－ＰＣＲ检测ＢＰＡ作用４ｈ对原代ＴＭ细胞和ＳＣＬ－２基因表达的??影响。结果表明，与对照组比较，激活剂组可使办／Ｉ基因表达降低（Ｐ＜〇．〇５）。??与激活剂组比较，１〇〇?ｐｍｏｌ／Ｌ?ＢＰＡ可显著上调及基因表达，同时下调ＳＣＸ－２??基因表达，差异均有统计学意义（图３Ｂ）。??ｔ?ＬＰＳ?ｔ?ＬＰＳ??名姓．．－’?￥?ｊ?￥?ｊｗ？．伊、?回、（１??ｉ；?—?ｉ?——２?——Ｉ?０献?５２３?Ｍ，Ｓ??？?ｉｊｍｉ，?ｊｐ?－?＞＊?ｌＯｄｕｍｏｌｌ?ＨＰＡ??＜：〇－??，?ＢＰＡ?ｔ?ＢＰＡ?，?ＢＰＡ?￥?．??°１???〇１??１?°ｔ??ＩＥ?＇??？ｊ??Ｉ?Ｉ?Ｉ?ｌ?ｌ０＊?＊?ＫｖＭ??＆?■?＆?．?ｎ?？?．?ｖ?二?．ｙ／?＝??ｉ?ｉ?ｉ??丨?ＷＭＬ?＾?１，５－?＿??。?〇?〇＇＃?ｍ?：：：：：：！??斗＿

与激活剂组比较，１００?ｐｍｏｌ／Ｌ?ＢＰＡ作川细胞４ｈ可显著下调ｒＧｆ＾?ｍＲＮＡ表达，??同时上调＊ＳＭ４Ｄ６ｍＲＮＡ表达（户切仍），对爪尸－你、ＳＡ以Ｄ７基因表达无明显??改变（图４）。??１８??

【参考文献】：
期刊论文
[1]转化生长因子β1与心血管疾病的研究进展[J]. 王正辉,张国辉.  临床与病理杂志. 2019(02)
[2]妊娠期和哺乳期双酚A暴露对子代雄性小鼠青春期启动及生精能力的影响[J]. 孟沅,杨洪梅,林任,吴凤娟,贾丽红.  环境与健康杂志. 2018(05)
[3]国内外双酚A的供需现状及发展前景分析[J]. 崔小明.  石油化工技术与经济. 2017(04)
[4]双酚A增加CD1小鼠肝细胞凋亡[J]. 易娟,高茹菲,刘露路,彭川,李丹婷,李启富.  基础医学与临床. 2016(06)
[5]青春期雄性小鼠双酚A暴露对生殖功能及子代性别比的影响[J]. 李玉华,段斐,杨芬,周小羽,潘鸿捷,李扬,李润生.  生殖与避孕. 2015(03)
[6]低剂量双酚A及其与苯并芘联合染毒对人乳腺上皮细胞MDM2基因的影响[J]. 杨淋清,罗凌凤,黄海燕,吴德生,崔栋,周丽,林晓阳,刘建军,张文昌,庄志雄.  毒理学杂志. 2014(03)
[7]邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯对大鼠睾丸巨噬细胞凋亡的影响[J]. 裴秀丛,段志文,马明月,张玉敏,孙飞跃.  环境与健康杂志. 2013(12)
[8]TGF-β1/Smads信号通路与eNOS在内皮细胞稳态及动脉粥样硬化发生中的作用[J]. 赵瑛,罗玉玉,张文成.  武警后勤学院学报(医学版). 2013(06)
[9]出生前后双酚A暴露对子鼠雄性生殖细胞凋亡的影响[J]. 刘晓利,陈晓宇,李云,丁宋军,赵欢,沈彤.  中国临床解剖学杂志. 2012(06)
[10]TGF-β在卵巢癌中作用的研究进展[J]. 高娜,吴涛.  大连医科大学学报. 2012(04)

博士论文
[1]益气补肾中药对2型糖尿病小鼠海马体基因表达的调控及机制研究[D]. 慈莉娅.山东大学 2018

硕士论文
[1]三唑类杀菌剂对雄性秀丽线虫生殖功能的影响及作用机制[D]. 张敏辉.东南大学 2016
[2]TGF β-SMAD信号通路对猪颗粒细胞和繁殖性状的作用研究[D]. 徐梦思.石河子大学 2015
[3]双酚A暴露对雄性性激素及精子质量的影响[D]. 冉茂梅.山西医科大学 2013
[4]环境雌激素双酚A对雄性小鼠生殖系统的表观遗传学效应[D]. 李凯.哈尔滨工业大学 2012
[5]孕期暴露不同剂量外源性雌激素己烯雌酚（DES）对仔小鼠睾丸有关生长因子及其受体的影响[D]. 陶桢.汕头大学 2007
[6]不同月龄大鼠睾丸微血管构筑、eNOS表达及血睾屏障变化的研究[D]. 康友敏.河北师范大学 2003



本文编号：3009321