CD44-RhoA-YAP信号通路调控纤维母细胞活化及其在实验性矽肺中的作用机制研究

发布时间：2024-03-31 16:22

　　目的:矽肺是尘肺病的一种,通常是由于长期暴露于结晶型二氧化硅所致。矽肺的特征性表现为活化的纤维母细胞产生的细胞外基质过度沉积所引起的慢性炎症和不可逆转的肺纤维化。尽管在矽肺的整个病程中维持着显著的炎症反应,但是一旦纤维化形成,仅有的抗炎治疗不能延缓甚至会恶化纤维化进程。最近研究证实,过度的细胞外基质沉积对纤维母细胞增殖活化所介导的持续性纤维化起到积极促进的作用,然而其具体的分子机制还有待进一步探索。本研究从纤维母细胞活化和矽肺纤维化之间的正反馈调节入手,探究细胞外基质合成,基质硬度增加对矽肺纤维化进展的调控机制,以期为延缓矽肺纤维化进程提供新的理论依据和潜在分子靶点。研究方法:本研究通过非暴露气管灌注结晶性二氧化硅悬液构建实验性矽肺小鼠模型。应用Western blot、免疫组化分析,检测矽尘暴露矽肺模型小鼠肺组织中YAP的胞核胞浆表达和定位改变。利用小鼠纤维母细胞系NIH-3T3进行体外实验。通过软硬凝胶培养NIH-3T3,模拟体内正常及纤维化损伤的肺组织基质硬度环境。应用免疫荧光分析,进一步验证基质硬度对YAP表达及定位的影响;通过生物信息学分析预测与基质硬度调控YAP相关的蛋白,...

【文章页数】：126 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图3.1矽尘暴露小鼠肺组织中YAP的表达改变A：Westernblot检测56天生理盐水组（Saline）和矽尘暴露组（Crystallinesilica）肺组织核蛋白提取物中YAP的变化水平

中国医科大学博士学位论文13对力的响应有关。为了探索YAP与矽肺纤维化之间的关系，我们检测了YAP在矽尘暴露小鼠肺组织中的表达情况。Westernblot结果显示，与对照组相比，矽尘暴露模型组小鼠肺组织中YAP的核内表达水平显著升高，差异具有统计学意义（图3.1A,B）。从免疫组....

图3.2矽尘暴露小鼠肺组织中YAP的定位改变A：IHC检测56天生理盐水组（Saline）和矽尘暴露组（Crystallinesilica）肺组织中YAP的分布情况

中国医科大学博士学位论文14**，p<0.01，数据以均数±标准差表示（mean±SD）。图3.2矽尘暴露小鼠肺组织中YAP的定位改变A：IHC检测56天生理盐水组（Saline）和矽尘暴露组（Crystallinesilica）肺组织中YAP的分布情况。箭头所指的为肺组织中矽结....

图3.3STRINGv.10生物信息学分析结果

中国医科大学博士学位论文15白间相互作用的生物信息学分析（STRINGv.10）。如图3.3结果显示，基质蛋白Collagen3a1、Collagen1a1和Collagen1a2可以通过与CD44相互作用来激活胞质信号蛋白网。CD44是具有高度异质性的细胞膜表面糖蛋白，可与多种....

图3.4基质硬度对CD44表达的影响

中国医科大学博士学位论文16图3.4基质硬度对CD44表达的影响A：IF检测培养于软胶（1kappa）或硬胶（60kappa）上的NIH-3T3中CD44的荧光水平(n=3，比例尺=50μm）。B：Realtime-PCR检测培养于软胶（1kappa）或硬胶（60kappa）上的....

本文编号：3944194