低剂量亚砷酸钠致HBE细胞恶性转化过程中Keap1/Nrf2-ARE信号通路的作用

发布时间：2024-04-09 02:38

　　目的探讨低剂量亚砷酸钠致人支气管上皮(human bronchial epithelial,HBE)细胞恶性转化过程中,细胞氧化还原状态变化情况及Keap1/Nrf2-ARE抗氧化信号通路相关基因表达动态变化趋势,为阐明砷致癌作用的分子机制开辟新的研究途径。方法1.HBE细胞恶性转化鉴定用1μmol/L亚砷酸钠连续染毒HBE细胞,同时设立传代对照组。通过形态学观察、细胞计数法检测生长动力学改变、Elisa法检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)以及软琼脂克隆实验鉴定细胞恶性转化情况。2.HBE细胞恶性转化过程中Keap1/Nrf2-ARE信号通路相关指标表达检测将1μmol/L亚砷酸钠染毒组定义为染毒组,将代数匹配对照组定义为传代对照组。建立低剂量亚砷酸钠致HBE细胞恶性转化模型后,分别于暴露1、8、15、22、29、36、43代,以流式细胞仪检测细胞活性氧(ROS)水平,以硫代巴比妥酸(TBA)比色法检测细胞丙二醛(MDA)含量,以WST-1法检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)活力,以Western blot方法检测Keap1/Nrf2-ARE抗氧化通路相关蛋白Nrf2、Keap1及下游...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图143代HBE细胞的形态学变化(x200)

低剂量亚砷酸钠致HBE细胞恶性转化过程中Keap1/Nrf2-ARE信号通路的作用第一部分较时，若方差齐时，采用SNK检验（Student-Newman-Keuls法）；若方差不齐时，采用Games-Howell检验。以p<0.05为差异有统计学意义。2....

图243代HBE细胞在软琼脂中的集落形成情况（×100）

A传代对照B1μmol/L亚砷酸钠图243代HBE细胞在软琼脂中的集落形成情况（×100）讨论长期暴露于低剂量无机砷可以引起人类多组织、脏器肿瘤，如皮肤癌、肺癌、膀胱癌等等，然而，砷化物致癌的动物模型一直没有成功建立，因此，砷致细性转化模型的建立对于研究无机砷....

图1HBE细胞恶性转化过程中ROS.MDA变化情况

低剂量亚砷酸钠致HBE细胞恶性转化过程中Keap1/Nrf2-ARE信号通路的作用第二部分件处理后，采用ImageJ2x软件对免疫印迹条带扫描后进行半定量分析并用同一张膜上相应泳道的GAPDH(全细胞和细胞浆)或者HistoneH3(细胞核)条带的灰度进行校....

图2HBE细胞恶性转化过程中SOD变化情况

图2HBE细胞恶性转化过程中SOD变化情况5表示与对照组HBE细胞（0代）比较，差异具有统胞恶性转化过程中HO-1蛋白表达情况着染砷代数的增加至发生恶性转化这段期间，全细表达均维持在一个较高水平，且细胞核中HO-1蛋白在见图3）。

本文编号：3949184