无机砷对树突状细胞抗原递呈功能的影响及p62依赖性Nrf2活化的可能调控作用

发布时间：2024-05-11 15:13

　　目的:本研究以无机砷为暴露因素,通过观察无机砷暴露对DC抗原递呈功能的影响,以及p62依赖性Nrf2活化在其中可能发挥的调控作用,进一步探索无机砷在介导免疫抑制中的可能机制,进而为砷中毒的远期致癌防治提供线索和理论依据。研究方法:1、小鼠BMDCs诱导培养及小鼠脾单细胞悬液制备。2、检测指标与方法:(1)采用流式细胞术方法检测BMDCs表型受体。(2)采用MTT方法测定混合淋巴细胞反应(MLR)淋巴细胞增殖活力。(3)采用基因沉默方法建立Nrf2/p62沉默BMDCs。(4)采用实时定量PCR与ELISA方法检测T淋巴细胞与DC中相关细胞因子含量。(5)采用Western blot方法检测DC中Nrf2等相关蛋白含量。结果:1、无机砷对DC抗原递呈功能具有抑制作用。经1μM As~Ⅲ处理后,Th1、Th2、Th17型细胞因子、Treg型细胞转录因子、细胞因子的mRNA转录水平均降低,且细胞因子Ifn-γ(1:5)与Il-2(1:10)、Il-13(1:10)与Il-4(1:5)、Il-17(1:10)与Il-22(1:10)、转录因子Foxp3(1:10)、细胞因子Il-10(1:10...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1，BMDCs纯度检测与无机砷暴露后的BMDCs对T淋巴细胞增殖活力的影响

3结果3.1无机砷对DC抗原递呈功能的抑制作用3.1.1无机砷暴露后的BMDCs抑制T淋巴细胞增殖活力如图1（A）所示，收集培养至第6天的BMDCs半悬浮集落细胞，使用CD11c+-FITC特异性标记物进行细胞标记，采用流式细胞术检测细胞的纯度，结果....

图2，无机砷暴露后的BMDCs对Th1型细胞转录因子及细胞因子mRNA表达的影响

中国医科大学硕士学位论文LPS单独处理的T淋巴细胞Th1型细胞转录因子T-bet、细胞因子Ifn-γ与Il-2的转录水平显著升高，且细胞因子Ifn-γ（1:5）与Il-2（1:10）的差异具有统计学意义（P<0.05）。与25ng/mlLPS组....

图3，无机砷暴露后的BMDCs对Th2型细胞转录因子及细胞因子mRNA表达的影响

无机砷暴露后的BMDCs对Th2型细胞转录因子及细胞因子mRNA表达的影响注：1μMAsⅢ处理2h，再与25ng/mlLPS共刺激24h后，收集BMDCs与脾脏淋巴细胞以1:5、1:10共培养48h，检测脾淋巴细胞中Th2转录因子G....

图4，无机砷暴露后的BMDCs对Th17型细胞转录因子及细胞因子mRNA表达的影响

无机砷暴露后的BMDCs对Th17型细胞转录因子及细胞因子mRNA表达的影响注：1μMAsⅢ处理2h，再与25ng/mlLPS共刺激24h后，收集BMDCs与脾脏淋巴细胞以1:5、1:10共培养48h，检测脾淋巴细胞中Th17型转录因....

本文编号：3970056