1,3-二氯-2-丙醇对小鼠脂质代谢的影响及机制研究

发布时间：2017-05-31 20:17

  本文关键词：1,3-二氯-2-丙醇对小鼠脂质代谢的影响及机制研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：氯丙醇是食品加工过程中产生的一类食品污染物。其中1,3-DCP（1,3-二氯-2-丙醇1,3-dichloro-2-propanol）是研究得最多和最常见的食品氯丙醇污染物之一。它是食品中的脂质与氯离子在加工、烹饪和贮藏过程中发生反应而形成的。1,3-DCP具有遗传毒性、致癌性、致畸性、生殖毒性、肝毒性、肾毒性、内分泌毒性、血细胞毒性和皮肤黏膜毒性。国内外对1,3-DCP毒性的研究，多是较高剂量下的毒性作用及机制研究，但是目前还没有研究其对脂质代谢的影响。 近年来，脂质代谢与健康的关系越来越受到人们的重视。脂质代谢紊乱与2型糖尿病、肥胖、心血管疾病、代谢综合征、非酒精性脂肪性肝病和原发性肝细胞癌密切相关，严重威胁人类的健康。除了高脂肪的饮食，一些食品添加剂和食品污染物已被证明能诱导脂质代谢紊乱。因此，研究食品污染物对机体脂质代谢的影响及其机制尤为重要。 本课题旨在未观察到损害作用的剂量（NOAEL）下研究1,3-DCP对小鼠脂质代谢的影响，在细胞水平进行验证并深入研究其机制，为1,3-DCP进一步毒理学评价提供理论依据。课题研究内容分为两部分：1、1,3-DCP对C57BL/6J小鼠脂质代谢的影响及机制研究；2、1,3-DCP对HepG2细胞脂质代谢的影响及机制研究。 首先，考察1,3-DCP对C57BL/6J小鼠脂质代谢的影响及机制。C57BL/6J小鼠以0、0.1、0.5和1mg/Kg bw/day灌胃染毒4周，考察1,3-DCP对C57BL/6J小鼠脂质代谢的影响，观察指标为动物体重、脏器系数、血清甘油三酯（TG）、胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、肝脏组织TG、TC含量及肝脏组织、脂肪组织的病理变化；取肝脏组织裂解，提取总蛋白，采用Western blot考察1,3-DCP对单磷酸腺苷激活蛋白激酶（AMPK）、p-AMPK、乙酰辅酶A羧化酶（ACC）、p-ACC、固醇调节元件结合蛋白1c（SREBP1c）、脂肪酸合酶（FAS）、羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶（HMGCR）、过氧化物酶增殖体激活受体α（PPARα）、脂肪酸转移酶（FAT/CD36）蛋白表达的影响。结果显示，1,3-DCP显著提高C57BL/6J小鼠血清TG、TC和LDL-C含量，降低HDL-C含量，显著提高C57BL/6J小鼠肝脏组织TG、TC含量，肝脏组织切片脂肪滴聚积，脂肪系数增高，脂肪组织切片脂肪细胞体积显著增大；1,3-DCP显著抑制C57BL/6J小鼠AMPK、ACC的磷酸化，并显著提高脂质合成代谢关键蛋白FAT、SREBP1、HMGCR和FAS的表达。 其次，利用HepG2细胞深入探究1,3-DCP对脂质代谢的影响及机制。考察1,3-DCP（0.5-2μg/mL）对HepG2细胞脂质代谢的影响，实验结果表明，1,3-DCP导致HepG2细胞TG、TC含量升高，油红O染色显示细胞内脂肪滴聚积，而棕榈酸钠（PA2μg/mL）对细胞中TG、TC含量无显著影响。进一步的研究考察1,3-DCP对HepG2细胞AMPK、cAMP依赖蛋白激酶（PKA）通路的影响，，结果表明：1,3-DCP显著抑制环磷酸腺苷（cAMP）和肝激酶B1（LKB1）的表达和单磷酸腺苷（AMP）/三磷酸腺苷（ATP）、二磷酸腺苷（ADP）/ATP比值，1,3-DCP显著抑制了HepG2细胞AMPK的活性，1,3-DCP促进CD36、甘油三磷酸转乙酞酶（GPAT）、FAS、HMGCR、低密度脂蛋白受体（LDLR）、固醇辅酶A去饱和酶1（SCD1）、SREBP1c和SREBP2的表达，同时显著抑制激素敏感性脂肪酶（HSL）、ACC、肉碱棕榈酸转移酶I（CPT-1）、肝细胞核因子4α（HNF-4α）、PPARα、过氧化物酶体增殖活化受体γ辅助活化因子1α（PGC-1α）、NAD+依赖性去乙酰化酶（SIRT1）、cAMP应答元件结合蛋白（CREB）的活化；1,3-DCP抑制了PKA的磷酸化，通过PKA抑制CREB、HSL的磷酸化和PGC-1α的表达而控制线粒体的生成及脂质氧化代谢；1,3-DCP对细胞内钙通路无显著影响。 综上所述，本研究发现了1,3-DCP在NOAEL下具有导致小鼠脂质代谢紊乱的作用，该作用是通过抑制AMPK和PKA信号通路实现的。本研究将为1,3-DCP进一步毒理学评价提供理论依据。
【关键词】：1 3-二氯-2-丙醇(1 3-DCP) 脂质代谢 AMPK信号通路 PKA信号通路
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R114
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 第1章 绪论11-27
• 1.1 氯丙醇化合物研究进展12-21
• 1.1.1 氯丙醇化合物的种类及来源12-14
• 1.1.2 氯丙醇化合物研究现状14-15
• 1.1.3 1,3-DCP 毒性研究进展15-21
• 1.2 脂质代谢研究概况21-24
• 1.2.1 脂质代谢紊乱21-22
• 1.2.2 脂质代谢的调节22-24
• 1.3 研究目的意义和主要研究内容24-27
• 第2章 1,3-DCP 对 C57BL/6J 小鼠脂质代谢的影响及机制研究27-51
• 2.1 材料与设备27-34
• 2.2 实验方法34-41
• 2.3 结果41-47
• 2.4 讨论47-50
• 2.5 本章小结50-51
• 第3章 1,3-DCP 对 HepG2 细胞脂质代谢的影响及机制研究51-81
• 3.1 材料与设备51-53
• 3.2 实验方法53-61
• 3.3 结果61-74
• 3.4 讨论74-80
• 3.5 本章小结80-81
• 第4章 结论81-82
• 4.1 全文结论81
• 4.2 创新点81-82
• 参考文献82-97
• 导师简介97-98
• 作者简介98-99
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文99-100
• 致谢100

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 傅武胜,林升清,黄剑锋;氯丙醇的毒理学研究进展[J];现代预防医学;2003年02期

2 秦红梅,金一和,黄飚,周双桥,林岫柏,王旭太;食品中3-氯丙醇的污染状况及其毒性研究进展[J];中国公共卫生;2002年12期

3 张守文;王冠宇;;配制酱油中氯丙醇的风险评估探讨[J];中国调味品;2010年08期

4 ;非酒精性脂肪性肝病诊疗指南[J];中华肝脏病杂志;2006年03期

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 刘英华;中链脂肪酸对肥胖小鼠脂代谢的调节作用及机制研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2012年

  本文关键词：1,3-二氯-2-丙醇对小鼠脂质代谢的影响及机制研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：410547