牦牛活性蛋白抗辐射损伤作用的基础研究

发布时间：2017-06-04 18:17

  本文关键词：牦牛活性蛋白抗辐射损伤作用的基础研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:电离辐射在农业生产、医疗卫生、科学研究和国防中发挥积极作用的同时,已成为威胁人类健康的重要因素,尤其在外周血细胞、骨髓、免疫器官、抗氧化酶系、生殖系统等方面造成损伤。因此,寻找天然辐射防护药物已成为放射医学领域迫切解决的问题。本研究通过对牦牛活性蛋白中氨基酸含量测定、免疫功能调节、抗缺氧、抗疲劳及降血糖等基础作用研究,进而研究牦牛活性蛋白对辐射损伤小鼠外周血象、骨髓DNA含量、抗氧化酶活性、免疫调节功能和凋亡蛋白表达的影响,探讨牦牛活性蛋白对辐射损伤小鼠的防护作用。方法:分别采用伊文思蓝比色法、四甲基偶氮唑盐比色法、半体内法和Jerne改良玻片法检测牦牛活性蛋白对小鼠二硝基氯苯所致迟发型过敏反应、淋巴细胞增殖反应、巨噬细胞吞噬能力及致敏红细胞所致溶血素抗体生成的影响,评价牦牛活性蛋白的免疫调节作用;通过测定小鼠耐缺氧存活时间、负重游泳时间及血糖值,评价牦牛活性蛋白的抗疲劳、抗缺氧及降血糖作用;辐射实验分为A、B、C三组:A组取SPF级昆明小鼠60只,随机分为6组,即空白对照组、阳性对照组、辐射模型组、牦牛活性蛋白高、中、低剂量组;给药组灌胃给予牦牛活性蛋白,空白对照组与模型组给予等容生理盐水,连续14天,阳性组于辐射前30 min腹腔注射氨磷汀,用X射线全身一次性照射后第3天实验。与A组实验方法相同,B、C两组分别于X射线照射后第7天、第14天实验。分别于X射线照射第3天、第7天、第14天后,测定小鼠外周血象、脏器指数、采用紫外分光光度法测定骨髓DNA含量、SOD、GSH-PX、CAT、T-AOC抗氧化酶活性、MDA,采用Elisa法检测血清IL-2、IL-6含量及Bcl-2、Bax蛋白表达。结果:牦牛活性蛋白具有显著的免疫调节、抗缺氧抗疲劳及降血糖作用;牦牛活性蛋白对辐射小鼠脏器指数有明显的恢复作用;使辐射小鼠血象明显回升,骨髓DNA含量显著升高;能增强SOD、GSH-PX、CAT、T-AOC抗氧化酶活性,能降低MDA含量;使IL-2表达升高,Bcl-2蛋白表达升高,Bax蛋白表达下降。结论:牦牛活性蛋白能有效地抑制辐射引起的细胞损伤,使外周血象逐步恢复,能较好的增强机体的抗氧化酶活性,减少脂质过氧化物在体内的堆积,保护骨髓DNA和免疫器官免遭损伤,提高机体免疫力,能有效调节细胞因子的分泌和表达,抑制细胞凋亡,具有较好的辐射防护作用。
【关键词】：牦牛活性蛋白 辐射损伤 免疫调节 抗氧化酶 凋亡
【学位授予单位】：青海大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R151
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 主要符号对照表11-12
• 前言12-16
• 第一部分 牦牛活性蛋白中条件必需氨基酸含量测定、免疫功能调节、抗缺氧、抗疲劳及降血糖作用研究16-29
• 1.1 实验技术路线16-17
• 1.2 材料17-18
• 1.2.1 药物与试剂17
• 1.2.2 主要仪器17-18
• 1.3 方法18-22
• 1.3.1 牦牛活性蛋白中氨基酸的HPLC法含量测定18
• 1.3.1.1 样品水解18
• 1.3.1.2 样品衍生18
• 1.3.1.3 色谱检测条件18
• 1.3.2 牦牛活性蛋白对小鼠免疫功能的调节作用18-20
• 1.3.2.1 实验动物与分组18-19
• 1.3.2.2 动物给药及指标测定19-20
• 1.3.3 牦牛活性蛋白对小鼠抗缺氧、抗疲劳能力的影响20
• 1.3.3.1 实验动物与分组20
• 1.3.3.2 动物给药20
• 1.3.3.3 指标测定20
• 1.3.4 牦牛活性蛋白对正常小鼠血糖的影响20-21
• 1.3.4.1 实验动物与分组20-21
• 1.3.4.2 给药方法21
• 1.3.4.3 血糖测定21
• 1.3.5 牦牛蛋白对四氧嘧啶糖尿病模型小鼠血糖的影响实验21-22
• 1.3.5.1 四氧嘧啶糖尿病小鼠模型的建立21
• 1.3.5.2 动物分组21
• 1.3.5.3 给药方法21
• 1.3.5.4 血糖检测21-22
• 1.4 统计学方法22
• 1.5 结果22-26
• 1.5.1 牦牛活性蛋白中氨基酸含量测定22
• 1.5.2 牦牛活性蛋白对DNCB所致迟发型超敏反应的影响22
• 1.5.3 牦牛活性蛋白对小鼠淋巴细胞增殖反应的影响22
• 1.5.4 牦牛活性蛋白对小鼠巨噬细胞吞噬能力的影响22-24
• 1.5.5 牦牛活性蛋白对致敏红细胞所致小鼠溶血素抗体生成的影响24
• 1.5.6 牦牛活性蛋白对小鼠游泳时间的影响24-25
• 1.5.7 牦牛蛋白对小鼠耐常压缺氧存活时间的影响25
• 1.5.8 牦牛蛋白对正常小鼠血糖的影响25-26
• 1.5.9 牦牛蛋白对四氧嘧啶糖尿病模型小鼠血糖的影响26
• 1.6 讨论26-28
• 1.7 结论28-29
• 第二部分 牦牛活性蛋白对小鼠辐射损伤的防护作用29-64
• 2.1 实验技术路线29-30
• 2.2 材料30-31
• 2.2.1 药物与试剂30
• 2.2.2 主要仪器30-31
• 2.3 方法31-40
• 2.3.1 动物饲养31
• 2.3.2 动物分组及给药31
• 2.3.3 辐射损伤模型建立31-32
• 2.3.4 样品采集与预处理32
• 2.3.4.1 样品采集32
• 2.3.4.2 血清制备32
• 2.3.4.3 肝脏匀浆液制备32
• 2.3.4.4 肠病理标本制作32
• 2.3.5 实验指标及检测方法32-40
• 2.3.5.1 体重测定32-33
• 2.3.5.2 外周血血细胞计数33
• 2.3.5.3 脏器指数测定33
• 2.3.5.4 骨髓DNA含量测定33
• 2.3.5.5 肝脏匀浆TP、SOD、MDA、GSH-PX、CAT、T-AOC指标测定33-37
• 2.3.5.6 相关计算公式37-38
• 2.3.5.7 采用Elisa法测定血清中IL-2、IL-6、Bcl-2、Bax浓度38-39
• 2.3.5.8 HE染色观察小肠病理变化39-40
• 2.4 数据统计分析40
• 2.5 结果40-60
• 2.5.1 体重变化40
• 2.5.2 牦牛活性蛋白对辐射损伤小鼠外周血血象的影响40-43
• 2.5.3 牦牛蛋白对受照射小鼠脏器指数的影响43-44
• 2.5.4 牦牛活性蛋白对辐射损伤小鼠骨髓DNA含量的影响44-46
• 2.5.5 牦牛活性蛋白对辐射损伤小鼠SOD、GSH-PX、CAT、T-AOC活力和MDA含量的影响46-52
• 2.5.5.1 辐射后各组SOD活力的变化46
• 2.5.5.2 辐射后各组MDA含量的变化46-48
• 2.5.5.3 辐射后各组GSH-PX活力的变化48
• 2.5.5.4 辐射后各组CAT活力的变化48-50
• 2.5.5.5 辐射后各组T-AOC活力的变化50-52
• 2.5.6 血清IL-2、IL-6、Bcl-2、Bax标准曲线52-53
• 2.5.6.1 血清IL-2 标准曲线52
• 2.5.6.2 血清IL-6 标准曲线52
• 2.5.6.3 血清 Bcl-2 标准曲线52-53
• 2.5.6.4 血清Bax标准曲线53
• 2.5.7 牦牛活性蛋白对辐射损伤小鼠血清IL-2、IL-6、Bcl-2、Bax变化的影响53-58
• 2.5.7.1 照射后各组小鼠血清IL-2 的变化53-55
• 2.5.7.2 照射后各组小鼠血清IL-6 的变化55-56
• 2.5.7.3 照射后各组小鼠血清Bcl-2 的变化56-57
• 2.5.7.4 照射后各组小鼠血清Bax的变化57-58
• 2.5.8 辐射后各组小鼠小肠HE病理观察58-60
• 2.6 讨论60-62
• 2.7 结论62-64
• 结论64-65
• 参考文献65-69
• 致谢69-70
• 作者简介70-72
• 综述72-79
• 参考文献76-79

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前8条

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本文编号：421774