PMA-实时荧光PCR快速检测蔬果中金黄色葡萄球菌活菌
发布时间:2017-06-21 05:00
本文关键词:PMA-实时荧光PCR快速检测蔬果中金黄色葡萄球菌活菌,由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】:目的将叠氮溴化丙锭(PMA)与实时荧光定量PCR(real-time PCR)技术相结合,快速检测蔬果中金黄色葡萄球菌活菌。方法通过对影响PMA作用的关键因素,包括PMA浓度、光照时间以及活、死菌比例混合等进行试验,确定PMA的作用条件。以金黄色葡萄球菌nuc基因为靶基因,建立PMA-实时荧光定量PCR方法,并构建金黄色葡萄球菌重组质粒标准品,用于检测蔬果中金黄色葡萄球菌活菌。结果在PMA 30μg/ml浓度下,曝光5 min,可实现PMA筛选金黄色葡萄球菌活菌的作用。由构建的质粒标准品模板建立标准曲线表现出良好线性关系,相关系数r=0.9995,所建立的方法灵敏度可达到14 copies/μl,且特异性良好。经2 h增菌后用PMA进行筛选,再用荧光定量PCR检测,可实现快速对蔬果样品中活的金黄色葡萄球菌的检测。结论用PMA-实时荧光定量PCR方法可快速检测蔬果中活的金黄色葡萄球菌,可为食品安全风险监测提供可靠数据。
【作者单位】: 上海市疾病预防控制中心;
【关键词】: 叠氮溴化丙啶 荧光定量PCR 金黄色葡萄球菌 活菌 蔬果
【基金】:全球健康-盖茨基金项目:中国脊髓灰质炎病毒在环境中的监测(项目号:OPP1039272)
【分类号】:R155.5
【正文快照】: 金黄色葡萄球菌是一种重要的食源性致病菌,广泛存在于自然界中,可因污染食物并由其产生的肠毒素造成食物中毒,危及人类生命健康。在我国10年食品安全监测报告数据中有8.9%的食物中毒案例由金黄色葡萄球菌引起[1]。同时,在各种食物类型中,沙拉、凉拌菜以及鲜榨果汁等金黄色葡萄
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1 黄岭芳;赖卫华;张莉莉;;食品中金黄色葡萄球菌快速检测方法的研究进展[J];食品与机械;2009年06期
2 王娉;劳华均;胡s,
本文编号:467656
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