莱菔硫烷对镉暴露小鼠生精机能干预作用的研究

发布时间：2017-06-30 01:00

  本文关键词：莱菔硫烷对镉暴露小鼠生精机能干预作用的研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：[背景]镉(Cd)是一种严重的环境污染物,可以经消化道及皮肤吸收,具有多种器官毒性,镉能诱导生物体产生大量活性氧自由基而形成氧胁迫,引起一系列脂质过氧化反应,从而使机体抗氧化体系失衡。莱菔硫烷(Sulforaphane, SFN)是一种有机硫化合物,是迄今最高效的抗氧化物之一,能有效减少氧化应激和组织细胞的损伤。[目的]本试验主要研究莱菔硫烷通过Nrf2-ARE通路对染镉雄性小鼠生殖机能的保护作用。[方法]购买健康的清洁级雄性昆明系小鼠60只,随机分成4组,分别为：空白对照组(H2Oi.p.)、氯化镉组(2.3 mg/kg CdCl2 i.p.)、莱菔硫烷组(10 mg/kg SFN i.p.).镉+莱菔硫烷组(10 mg/kg SFN i.p.;2.3 mg/kg CdCl2 i.p.),连续给药10 d,检测小鼠睾丸组织结构功能变化、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量及总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性的变化。运用相对荧光定量PCR及Western blot方法检测睾丸组织核因子E2相关因子2(Nrf2)及其靶基因谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、血红素加氧酶1 (HO-1)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)及醌氧化还原酶1(NQO1) mRNA和蛋白水平。[结果]1.镉对小鼠睾丸组织结构有一定的破坏,影响其生理功能,莱菔硫烷对小鼠睾丸结构和功能没有影响,莱菔硫烷对镉攻毒小鼠的睾丸组织结构具有一定的保护作用。2.与对照组小鼠相比,镉会显著降低小鼠睾丸中GSH含量及T-SOD活性p0.01),显著提高MDA的含量(p＜0.01)。相比空白组莱菔硫烷显著提高GSH含量及T-SOD活性p0.05),MDA的含量无显著差异(p＞0.05)。与镉组相比镉+莱菔硫烷组显著升高了GSH含量及T-SOD活性(p＜0.01),显著降低了MDA的表达量(p＜0.01)。3.相比正常组小鼠,镉降低了小鼠睾丸中的Nrf2及其下游靶基因nRNA及蛋白水平(p＜0.01,p＜0.05),莱菔硫烷提高了Nrf2及其下游靶基因mRNA及蛋白水平(p＜0.01,p0.05),与镉组相比镉+莱菔硫烷组显著提高了Nrf2及其下游靶基因mRNA及蛋白水平p0.01,p0.05)。[结论]镉会降低睾丸生精机能,使睾丸组织抗氧化能力减弱,发生氧化损伤,而莱菔硫烷可拮抗镉诱导的损伤作用。莱菔硫烷通过激活Nrf2上调其下游的抗氧化和解毒酶表达水平,揭示Nrf2-ARE通路参与镉诱发的内源性应激防御机制。
【关键词】：氯化镉 莱菔硫烷 小鼠 睾丸 Nrf-ARE通路
【学位授予单位】：沈阳农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R114
【目录】：

• 中文摘要10-11
• 英文摘要11-13
• 第一部分 引言13-20
• 1.1 研究背景13-14
• 1.2 镉的防治14-15
• 1.2.1 螯合剂与镉14
• 1.2.2 金属硫蛋白与镉14-15
• 1.2.3 锌与镉15
• 1.2.4 钙与镉15
• 1.2.5 维生素与镉15
• 1.2.6 莱菔硫烷与镉15
• 1.3 莱菔硫烷的化学作用15-18
• 1.3.1 莱菔硫烷与肿瘤16
• 1.3.2 莱菔硫烷与免疫调节16
• 1.3.3 莱菔硫烷与脑和神经的损伤16-17
• 1.3.4 莱菔硫烷与抗炎作用17
• 1.3.5 莱菔硫烷与抗氧化损伤17-18
• 1.4 Nrf2-Keap1/ARE信号通路18-19
• 1.4.1 转录因子核相关因子E2相关因子2(Nrf2)简介18
• 1.4.2 Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)简介18-19
• 1.5 本试验目的与意义19-20
• 第二部分 试验部分20-58
• 试验一 镉对雄性小鼠生精机能、MDA及T-SOD影响的研究20-27
• 2.1 试验材料20-21
• 2.1.1 试验动物20
• 2.1.2 分组及给药20
• 2.1.3 主要试剂的配制20
• 2.1.4 试验药品及试剂20-21
• 2.1.5 主要仪器21
• 2.2 试验方法21-24
• 2.2.1 精液品质的检测21-22
• 2.2.2 总蛋白定量检测22
• 2.2.3 T-SOD活性的检测22-23
• 2.2.4 MDA含量的检测23-24
• 2.2.5 数据统计分析24
• 2.3 试验结果24-25
• 2.3.1 小鼠的死亡结果24
• 2.3.2 小鼠精液品质的检测结果24-25
• 2.3.3 小鼠睾丸T-SOD和MDA的检测结果25
• 2.4 讨论25-26
• 2.5 小结26-27
• 试验二 莱菔硫烷对镉中毒小鼠生精机能的干预作用的研究27-37
• 3.1 试验材料27-28
• 3.1.1 试验动物27
• 3.1.2 分组及给药27
• 3.1.3 试验药品和试剂27
• 3.1.4 试验仪器27-28
• 3.2 试验方法28-30
• 3.2.1 小鼠精液品质的检测28
• 3.2.2 HE染色28-29
• 3.2.3 血清睾酮含量的检测29
• 3.2.4 T-SOD、GSH和MDA的检测29-30
• 3.2.5 数据统计分析30
• 3.3 试验结果30-35
• 3.3.1 小鼠睾丸及附睾脏器系数检测结果30-31
• 3.3.2 小鼠精液品质检测结果31-32
• 3.3.3 小鼠睾丸HE染色结果32-33
• 3.3.4 小鼠睾酮检测结果33
• 3.3.5 小鼠睾丸组织内T-SOD、GSH以及MDA的检测结果33-35
• 3.4 讨论35-36
• 3.5 小结36-37
• 试验三：SFN对镉暴露小鼠睾丸中Nrf2及下游靶基因mRNA和蛋白水平的影响37-58
• 4.1 试验材料37-39
• 4.1.1 试验动物37
• 4.1.2 试验动物的分组及给药37
• 4.1.3 试验主要试剂的配制37-38
• 4.1.4 试验药品与试剂38-39
• 4.1.5 试验主要仪器39
• 4.2 试验方法39-48
• 4.2.1 RNA的提取及反转录39-40
• 4.2.2 PCR反应40-42
• 4.2.3 qPCR反应42-43
• 4.2.4 试验结果的计算43-44
• 4.2.5 蛋白的提取及定量44
• 4.2.6 Western blot检测蛋白表达量44-48
• 4.2.7 数据的统计与分析48
• 4.3 试验结果48-54
• 4.3.1 小鼠睾丸组织中各基因引物的特异性检测结果48
• 4.3.2 各基因qPCR引物中的特异性及标准曲线的结果分析48-49
• 4.3.3 小鼠睾丸组织mRNA和蛋白水平检测结果49-54
• 4.4 讨论54-57
• 4.5 小结57-58
• 结论58-59
• 参考文献59-65
• 附录65-69
• 英文缩写词表69-70
• 致谢70-71
• 攻读硕士研究生期间发表的文章71

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 夏薇,赵秀娟,吴坤,苑林宏;北方12种蔬菜中莱菔硫烷含量的测定[J];疾病控制杂志;2005年03期

2 孙超,仉郁芝;硫烷硫代谢库[J];医教研究;1995年03期

3 李斓;喻姗姗;李玲玉;吴晓颖;陈宴林;赵敬;;莱菔硫烷对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究[J];中风与神经疾病杂志;2012年04期

4 林娜;单毓娟;赵瑞芳;袁超;王舒然;;莱菔硫烷对血管内皮细胞粘附分子表达影响[J];中国公共卫生;2009年03期

5 张国良;赵秀娟;张宇秋;赵艳;张海金;吴坤;;蔬菜中莱菔硫烷提取工艺的正交优选[J];哈尔滨医科大学学报;2009年06期

6 胡丽贞;李雅杰;薛宏凤;王舒然;;莱菔硫烷对高脂环境下心肌细胞保护作用[J];中国公共卫生;2013年10期

7 胡晔;梁浩;袁其朋;;十字花科植物种子中莱菔硫烷的薄层色谱鉴别[J];北京化工大学学报(自然科学版);2006年02期

8 王丽红;刘娟;王桂艳;杜娟;;光果葶苈中莱菔硫烷的提取及含量测定[J];中国现代应用药学;2010年04期

9 张小林;翁惠萍;张海燕;;萝卜硫烷的研究进展[J];化工中间体;2008年12期

10 张小林;;萝卜硫烷的研究进展[J];化工中间体;2010年03期

中国重要会议论文全文数据库 前4条

1 张国良;赵秀娟;张宇秋;吴坤;;蔬菜中莱菔硫烷的提取与纯化技术[A];第四届第二次中国毒理学会食品毒理学专业委员会与营养食品所毒理室联合召开学术会议论文集[C];2008年

2 王敏;李延青;陈建;高艳景;于涛;杨晓云;袁孟彪;;莱菔硫烷诱导鼠结肠代谢酶活性及生物学效应的实验研究[A];中华医学会第七次全国消化病学术会议论文汇编（下册）[C];2007年

3 潘萌;黄睿;何灿霞;赵越;单毓娟;;莱菔硫烷通过p38-NF-κB通路抑制环氧化酶-2的表达[A];中国毒理学会第三届中青年学者科技论坛暨2011年全国前列腺药理毒理学研讨会论文集[C];2011年

4 杨方星;庄树林;张超;戴和平;刘维屏;;莱菔硫烷对二VA英毒性的保护作用[A];第七次全国分析毒理学大会暨第四届分析毒理专业委员会第二次会议论文摘要集[C];2012年

中国重要报纸全文数据库 前1条

1 刘霞;花椰菜能对抗老年痴呆症[N];科技日报;2011年

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 梁浩;莱菔硫烷的制备及其抗癌活性的研究[D];北京化工大学;2007年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 李琳;Nrf2、HO-1、VEGF在糖尿病大鼠肾脏中表达情况及莱菔硫烷对其干预作用的研究[D];河北医科大学;2015年

2 高锋;莱菔硫烷对镉暴露小鼠生精机能干预作用的研究[D];沈阳农业大学;2016年

3 肖倩;莱菔硫烷的稳定性及胃漂浮片的研究[D];北京化工大学;2007年

4 李扬;西兰花芽苗菜中莱菔硫烷的分离纯化及抗癌活性的测定[D];黑龙江八一农垦大学;2009年

5 王慧;莱菔硫烷载药体系的制备与评价[D];北京化工大学;2011年

6 付建飞;莱菔硫烷对高脂膳食小鼠糖代谢的调控作用及机制研究[D];宁波大学;2014年

7 李椿方;大孔吸附树脂和逆流色谱分离纯化莱菔硫烷的研究[D];北京化工大学;2008年

8 闫旭;高纯度莱菔硫烷的制备及其工业化放大研究[D];北京化工大学;2011年

9 张胜智;西兰花种子中硫代葡萄糖苷的提取及高纯度莱菔硫烷的制备工艺研究[D];北京化工大学;2012年

10 李斓;莱菔硫烷对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究[D];重庆医科大学;2012年

  本文关键词：莱菔硫烷对镉暴露小鼠生精机能干预作用的研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：499941