黄曲霉毒素b1对肝细胞L-02氧化损伤及营养干预研究

发布时间：2017-07-08 08:26

  本文关键词：黄曲霉毒素b1对肝细胞L-02氧化损伤及营养干预研究

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【摘要】：真菌毒素与人类的生活息息相关,据联合国粮食及农业组织(FAO)统计,全球约有25%的粮食面临被真菌毒素污染的危险。真菌毒素是真菌的次级代谢产物,通过污染粮食和饲料从而进入到食物链中。因此,有关真菌毒素的危害和营养干预的研究备受关注。本实验以人的肝细胞L-02为研究对象,试图通过黄曲霉毒素B1(AFB1)对肝细胞的氧化损伤作用及绿原酸(CGA)和槲皮素(QU)的营养干预作用的研究,为缓解AFB1污染对人类健康的伤害提供参考。主要的研究方法和具体结果如下：1)少量的AFB1对L-02细胞的存活率有促进作用,但总体来说,L-02细胞的存活率与AFB1的浓度呈反比。AFB1能够降低L-02细胞内蛋白质的含量,其含量随着AFB1浓度的升高而逐渐减少,与谷胱甘肽相关的酶活力也有变化。当有少量的AFB1刺激时,谷胱甘肽还原酶(GR)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)的活力明显升高,不过随着AFB1浓度的增高,这两种酶的活力逐渐下降。实验浓度下的AFB1对谷胱甘肽转移酶(GST)活力没有影响。在AFB1浓度较低时(低于125μM),谷胱甘肽(GSH)含量随着AFB1浓度升高而升高。随着AFB1浓度继续增高时,GSH含量逐渐降低,说明细胞内的氧化损伤程度越来越严重。2)CGA对L-02细胞增殖有促进作用,同时蛋白质含量随着CGA浓度升高而升高。CGA对细胞内的GR及GPx活力有促进作用,但对GST的活力影响不大。当L-02细胞经AFB1处理后,CGA能够提高细胞内GST活力。低浓度的CGA增加细胞内GSH含量且其含量随着AFB1浓度的增加有所上升,并在CGA浓度为40μg/ml处明显增加,说明细胞内氧化损伤被缓解。3)浓度低于160g,g/ml的QU对L-02细胞增殖有促进作用。但浓度达到320μg/ml后,对细胞有毒性作用。在AFB1处理细胞后,QU增加细胞内蛋白的含量,也改变了相关抗氧化酶的活性。QU对L-02细胞内的CR、GPx以及GST活力有促进作用。QU能够促进L-02细胞内GSH的生成,且在浓度为40μg/ml时明显增加,说明QU有很好的干预效果。
【关键词】：AFB1 L-02细胞 CGA QU 营养干预 氧化应激
【学位授予单位】：南京理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R151
【目录】：

• 摘要5-6
• Abstract6-10
• 1 引言10-21
• 1.1 真菌毒素10-11
• 1.2 黄曲霉毒素研究进展11-16
• 1.2.1 黄曲霉毒素的概述11-12
• 1.2.2 黄曲霉毒素的限量标准12-13
• 1.2.3 黄曲霉毒素的脱毒方法的研究现状13-14
• 1.2.4 黄曲霉毒素的致病机理14-16
• 1.3 绿原酸及槲皮素药理研究概述16-17
• 1.4 谷胱甘肽在氧化应激中的地位17-19
• 1.4.1 氧化应激17-18
• 1.4.2 谷胱甘肽的抗氧化作用18-19
• 1.5 营养干预的研究19-20
• 1.6 研究的意义20-21
• 2 AFB1对肝细胞L-02的影响21-37
• 2.1 引言21
• 2.2 材料与方法21-32
• 2.2.1 实验材料与试剂21
• 2.2.2 实验仪器21-22
• 2.2.3 实验方法22-32
• 2.3 实验结果与讨论32-36
• 2.3.1 AFB1对L-02细胞存活率的影响32
• 2.3.2 AFB1对L-02细胞内总蛋白含量的影响32-33
• 2.3.3 AFB1对L-02细胞内GR活力的影响33-34
• 2.3.4 AFB1对L-02细胞内GPx活力的影响34-35
• 2.3.5 AFB1对L-02细胞内GST活力的影响35
• 2.3.6 AFB1对L-02细胞中GSH含量的影响35-36
• 2.3 小结36-37
• 3 绿原酸营养干预37-44
• 3.1 引言37
• 3.2 材料与方法37-38
• 3.2.1 实验材料与试剂37
• 3.2.2 实验仪器37-38
• 3.2.3 实验方法38
• 3.3 结果与讨论38-42
• 3.3.1 CGA对L-02细胞生长增殖的影响38-39
• 3.3.2 CGA对L-02细胞内总蛋白含量的影响39-40
• 3.3.3 CGA对L-02细胞内GR活力的影响40
• 3.3.4 CGA对L-02细胞内GPx活力的影响40-41
• 3.3.5 CGA对L-02细胞内GST活力的影响41-42
• 3.3.6 CGA对L-02细胞内GSH含量的影响42
• 3.4 小结42-44
• 4 槲皮素营养干预44-50
• 4.1 引言44
• 4.2 材料与方法44-45
• 4.2.1 实验材料与试剂44
• 4.2.2 实验仪器44
• 4.2.3 实验方法44-45
• 4.3 结果与讨论45-49
• 4.3.1 QU对L-02细胞生长增殖的影响45-46
• 4.3.2 QU对L-02细胞内总蛋白含量的影响46-47
• 4.3.3 QU对L-02细胞内GR活力的影响47
• 4.3.4 QU对L-02细胞内GPx活力的影响47-48
• 4.3.5 QU对L-02细胞内GST活力的影响48-49
• 4.3.6 QU对L-02细胞内GSH含量的影响49
• 4.4 小结49-50
• 5 结论与展望50-52
• 5.1 结论50
• 5.2 本课题的创新点50-51
• 5.3 展望51-52
• 参考文献52-58
• 致谢58-59
• 附录59

【共引文献】

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1 张毅敏;谭天伟;;环糊精键合凝胶介质分离纯化金银花中绿原酸[J];过程工程学报;2009年05期

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6 刘蔚,李利,蒋献,邓次冰,李咏;高强度窄谱蓝光治疗寻常痤疮临床观察[J];四川大学学报(医学版);2005年01期

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本文编号：533767