2,4-滴丁酯对雄性小鼠生殖毒性的研究
发布时间：2017-07-15 08:21
本文关键词：2,4-滴丁酯对雄性小鼠生殖毒性的研究
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【摘要】：目的: 本研究通过观察2,4-滴丁酯对雄性小鼠生精过程和睾丸组织结构的影响、测定与睾丸组织毒作用相关的生物学效应指标，探讨2,4-滴丁酯对雄性小鼠的生殖毒性作用机理，为进一步揭示其环境污染产生的潜在生殖毒性及为男性生殖健康的保护提供科学依据。 方法: 将48只清洁级健康雄性ICR小鼠适应性饲养一周后随机分为4组，分别为对照组（玉米油）和低（10mg/kg，1/40LD50）、中（20mg/kg，1/20LD50）和高剂量（40mg/kg，1/10LD50）2,4-滴丁酯染毒组，每组12只。用玉米油稀释2,4-滴丁酯乳油，采用灌胃方式进行染毒，每天1次，连续染毒5周。 染毒结束后24h，摘眼球取血后颈椎脱臼处死小鼠，精子计数，测定小鼠睾丸组织相关标志酶的活性、抗氧化酶的活性、ATPase的活性及脂质过氧化产物的含量，血清中睾酮的水平，观察小鼠睾丸组织的病理学改变。 采用统计软件spss13.0对实验数据进行统计分析，结果以Ｘ±s表示，多组间的比较采用单因素方差分析（one-way ANOVA），组间的两两比较用SNK检验法（Student-Newman-Keuls法）。检验水准a=0.05，以P＜0.05为差异有统计学意义。 结果: 1.2,4-滴丁酯对小鼠睾丸及附睾脏器系数的影响 小鼠睾丸脏器系数随染毒剂量的升高逐渐下降,其中高剂量组与对照组、低剂量组之间的差异具有统计学意义（P0.05）;高、中剂量组与对照组比较，小鼠附睾脏器系数之间的差异具有统计学意义（P0.05）。 2.2,4-滴丁酯对小鼠精子的影响 小鼠的精子数量随2,4-滴丁酯染毒剂量的升高呈下降的趋势，与对照组和低剂量组比较，中、高剂量组的小鼠精子数量较低，差异具有统计学意义（P0.05）；精子畸形率随染毒剂量的升高呈上升的趋势，高、中剂量组与对照组和低剂量组比较，差异具有统计学意义（P0.05）。 3.2,4-滴丁酯对小鼠睾丸组织的氧化性损伤 T-AOC活力随着2,4-滴丁酯染毒剂量的增加逐渐下降，高剂量组与其他组比较差异具有统计学意义（P0.05）；SOD活力随着2,4-滴丁酯染毒剂量的增加逐渐下降，各剂量组之间的差异具有统计学意义（P0.05）；MDA含量随着2,4-滴丁酯染毒剂量的增加逐渐升高，且高剂量组与对照组之间的差异具有统计学意义（P0.05）。 4.2,4-滴丁酯对小鼠睾丸组织中相关标志酶活性的影响 SDH活力随着2,4-滴丁酯染毒浓度的升高逐渐降低，高、中剂量组与对照组比较差异具有统计学意义（P0.05），且高剂量组与中、低剂量组比较差异具有统计学意义（P0.05）；与对照组和低剂量2,4-滴丁酯染毒组比较，高、中剂量组睾丸组织中LDH活力较低，差异具有统计学意义（P0.05），且高剂量组与中剂量组比较差异具有统计学意义（P0.05）。 5.2,4-滴丁酯对小鼠睾丸组织中ATPase活性的影响 各剂量组Ca㧏㧏Mg㧏㧏-ATPase活力与对照组比较差异具有统计学意义（P0.05）；与对照组和低剂量组比较，高、中剂量组睾丸组织中Na㧏K㧏-ATPase活力值较低，，差异具有统计学意义（P0.05）。 6.2,4-滴丁酯对小鼠血清中睾酮水平的影响 血清中睾酮水平随着2,4-滴丁酯染毒浓度的升高逐渐降低，与对照组和低剂量组相比较，高、中剂量组血清中睾酮水平较低，差异具有统计学意义（P0.05），且高剂量组与中剂量组之间的差异具有统计学意义（P0.05）。 7.2,4-滴丁酯对小鼠睾丸组织结构的影响 小鼠睾丸病理切片显示：低剂量组生精上皮未见明显改变，但有个别初级精母细胞或次级精母细胞出现核浓缩的现象；中、高剂量组生精上皮变薄，各级生精细胞排列紊乱、层次不清、部分缺失，管腔中可见脱离于生精上皮的生精细胞，近管腔处成熟精子少见。 结论： 研究结果表明，接触2,4-滴丁酯能够影响小鼠的精子数量；对睾丸组织具有一定的氧化损伤作用；抑制小鼠睾丸组织中相关标志酶及ATPase活性；降低血清中睾酮水平；影响睾丸组织的形态结构。
【关键词】：2 4-滴丁酯 睾丸 氧化损伤 血清睾酮 生殖毒性
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R114
【目录】：
- 中文摘要4-7
- Abstract7-12
- 英文缩略词表12-13
- 第一章 绪论13-22
- 1.1 2,4-滴丁酯的概述13-18
- 1.1.1 2,4 滴丁酯的结构和理化性质14
- 1.1.2 2,4 滴丁酯的合成及应用14-15
- 1.1.3 2,4 滴丁酯的除草作用机制15
- 1.1.4 2,4 滴丁酯的环境行为特性15-16
- 1.1.5 2,4 滴丁酯使用过程中存在的问题16-17
- 1.1.6 2,4 滴丁酯生产和使用过程中的防护17
- 1.1.7 2,4 滴丁酯接触的应急处理及中毒救治17-18
- 1.2 2,4 滴丁酯的毒作用研究18-22
- 1.2.1 2,4 滴丁酯的生殖毒性作用18-19
- 1.2.2 2,4 滴丁酯对雄性内分泌系统的影响19-20
- 1.2.3 2,4 滴丁酯的其他毒性作用20-22
- 第二章 材料与方法22-33
- 2.1 实验材料22-23
- 2.1.1 实验动物22
- 2.1.2 主要仪器22
- 2.1.3 主要试剂22-23
- 2.2 实验方法23-32
- 2.2.1 实验相关试剂的配制23
- 2.2.2 实验动物分组及染毒方法23
- 2.2.3 实验小鼠一般状况的观察23-24
- 2.2.4 组织样本的采取与制备24
- 2.2.5 小鼠精子计数实验24
- 2.2.6 小鼠精子畸形实验24-25
- 2.2.7 小鼠睾丸、附睾脏器系数的测定25
- 2.2.8 小鼠睾丸组织蛋白含量的测定25
- 2.2.9 小鼠睾丸组织中 T AOC、SOD 活力及 MDA 含量的测定25-28
- 2.2.10 小鼠睾丸组织中 SDH 和 LDH 活力的测定28-29
- 2.2.11 小鼠睾丸组织中 ATPase 活力的测定29-30
- 2.2.12 小鼠血清中睾酮含量的测定30-31
- 2.2.13 小鼠睾丸组织的形态学检查31-32
- 2.3 统计学分析32-33
- 第三章 结果33-39
- 3.1 2,4 滴丁酯对小鼠一般情况的影响33
- 3.2 2,4 滴丁酯对小鼠睾丸和附睾重量及脏器系数的影响33-34
- 3.3 2,4 滴丁酯染毒对小鼠精子的影响34
- 3.4 2,4 滴丁酯对小鼠睾丸组织的氧化损伤34-35
- 3.4.1 小鼠睾丸组织中 T AOC 活力的测定结果34-35
- 3.4.2 小鼠睾丸组织中 SOD 活性及 MDA 含量的变化35
- 3.5 2,4 滴丁酯对小鼠睾丸组织中相关标志酶活性的影响35-36
- 3.6 2,4 滴丁酯对小鼠睾丸组织中 ATPASE 活性的影响36
- 3.7 2,4 滴丁酯对小鼠血清中睾酮水平的影响36-37
- 3.8 2,4-滴丁酯染毒小鼠睾丸组织病理切片观察结果37-39
- 第四章 讨论39-44
- 4.1 2,4 滴丁酯染毒对小鼠一般状况的影响39
- 4.2 2,4 滴丁酯对小鼠睾丸及附睾的影响39-40
- 4.3 2,4 滴丁酯对小鼠精子计数和精子畸形的影响40-41
- 4.4 2,4 滴丁酯对小鼠睾丸组织的氧化损伤41-42
- 4.5 2,4 滴丁酯对小鼠睾丸组织中相关标志酶活性的影响42
- 4.6 2,4 滴丁酯对小鼠睾丸组织中 ATPASE 活性的影响42-43
- 4.7 2,4 滴丁酯对小鼠血清中睾酮水平的影响43-44
- 结论44-45
- 参考文献45-52
- 作者简介及其在学期间所取得的研究成果52-53
- 致谢53
【参考文献】
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