氯化锰长期低剂量染毒对大鼠子代生精细胞的影响及其作用机理

发布时间：2017-07-18 21:16

  本文关键词：氯化锰长期低剂量染毒对大鼠子代生精细胞的影响及其作用机理

  更多相关文章： 锰 生精细胞 凋亡 OPA1 DRP1 Caspase 9 Bim FOXO3A

【摘要】：目的:通过亲代雌性SD大鼠长期低剂量锰染毒,观察其对子代雄性大鼠生精细胞的影响。方法:雌性SD大鼠(体重90-120 g)32只随机分为对照组、2 mg/kg、4 mg/kg及8mg/kg染锰组,8只/组。分别腹腔注射等容氯化锰(Mn Cl·4H2O)和生理盐水(NS),5d/w,1次/d,共8w。后与正常雄性SD大鼠交配,通过阴道栓检测确定孕期后持续染毒6w(妊娠期和哺乳期各3w)。取子代成熟期(8w龄)雄性SD大鼠睾丸和血清做以下检测:1.苏木精-伊红(HE)染色观察睾丸结构;2.Real-time PCR技术检测雄性子鼠睾丸凋亡相关基因OPA1、DRP1、Caspase 9、Bim、FOXO3A的mRNA表达情况;3.免疫组化法和Western blot检测上述凋亡相关蛋白定位和定量表达情况;4.化学发光法检测子代大鼠血清总睾酮含量;5.WST-1法检测子代大鼠血清SOD活力;6.可见光法检测子代大鼠血清CAT活力;7.酶促反应法检测子代大鼠血清GSH-Px活力。结果:1.对照组睾丸曲细精管管腔大小基本一致、各级生精细胞有序排列,间质正常无充血、出血及炎症细胞浸润;各染锰组睾丸组织结构呈现不同程度的形态学改变,且其程度随染锰剂量增加而逐渐加重。2.锰对大鼠子代睾丸生精细胞DRP1、Caspase 9、Bim、FOXO3A表达的影响:与对照组相比,各染锰组DRP1、Caspase 9、Bim、FOXO3A mRNA、免疫组化染色阳性细胞率和蛋白相对表达量均较正常组偏高(P0.05),且各染锰组相比,随染锰剂量的增加而增强(P0.05)。3.锰对大鼠子代睾丸生精细胞OPA1的表达影响:与对照组相比,各染锰组OPA1mRNA、免疫组化染色阳性细胞率和蛋白相对表达量均较正常组偏低(P0.05),且各染锰组相比,随染锰剂量的增加而减弱(P0.05)。4.锰对子代雄性大鼠血清总睾酮含量的影响:各染锰组较对照组相比均降低(P0.05),且各染锰组之间相比,随染锰剂量的增加而降低(P0.05)。5.锰对子代雄性大鼠血清抗氧化酶系统的影响:与对照组相比,各染锰组SOD、CAT和GSH-Px活力均降低(P0.05),且各染锰组之间相比,随染锰剂量的增加而降低(P0.05)。结论:长期低剂量染锰可通过胎盘屏障和血睾屏障进入子代大鼠睾丸,引起生精细胞凋亡,导致其生精障碍。可能的机制为:1.作用于下丘脑-垂体-性腺轴,降低子代大鼠血清睾酮水平,引起精子发育的细胞周期阻滞;2.通过降低子代大鼠血清抗氧化酶活性,增加其体内氧化应激状态,诱导生精细胞细胞膜的脂质过氧化而启动细胞凋亡;3.通过上调FOXO3A、诱导Bim基因表达,和/或上调DRP1、下调OPA1基因表达,打破了线粒体融合/分裂平衡,启动了线粒体凋亡信号传递途径,诱导其下游信号Caspase 9的表达来实现生精细胞的凋亡过程。
【关键词】：锰 生精细胞 凋亡 OPA1 DRP1 Caspase 9 Bim FOXO3A
【学位授予单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R114
【目录】：

• 中英文缩略词表4-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 前言10-13
• 材料与方法13-28
• 结果28-39
• 讨论39-44
• 结论44-45
• 参考文献45-49
• 综述：锰的雄性生殖毒理效应及其机制研究进展49-56
• 参考文献53-56
• 致谢56-57
• 作者简介57

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 商学军,黄宇烽;生精细胞移植与睾丸功能研究[J];中华男科学;2001年01期

2 蒋耀青,张乃昌,吴鉴,顾苏滨,朱苏玲,李芳媛,孙海源;镉对雄性小鼠生精细胞的影响[J];遗传学报;1988年03期

3 黄宇烽,徐建平,商学军,戈一峰;凋亡生精细胞的形态学观察[J];金陵医院学报;1995年03期

4 黄宇烽，徐建平，，商学军，戈一峰;凋亡生精细胞的观察[J];解剖学报;1996年01期

5 童建孙,王兴海;生精细胞的凋亡[J];国外医学(计划生育分册);1996年01期

6 王江平,叶德立,张明辉,李焱萍;睾丸内生精细胞与精液生精细胞之研究[J];江西医学检验;2003年02期

7 陈伟;陆祥;舒小林;李季蓉;;砷对大鼠生精细胞及端粒酶逆转录酶表达影响[J];中国公共卫生;2008年11期

8 李翠英;袁长巍;曹兴午;;生精细胞检查及其临床意义[J];中国男科学杂志;2010年06期

9 印洪林,周晓军,黄宇烽,崔英霞,陆珍凤;人类凋亡生精细胞超微结构研究[J];中华男科学;2001年01期

10 陈伟;陆祥;舒小林;李季蓉;;三氧化二砷对大鼠生精细胞端粒酶逆转录酶活性的影响[J];苏州大学学报(医学版);2008年02期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 赵广明;杨立顺;赵连华;韩贵夫;王相泽;陈奇珂;杨明;;人凋亡生精细胞、胀亡生精细胞和精子形态学研究[A];第四届全国临床检验学术会议论文汇编[C];2006年

2 赵广明;;人凋亡生精细胞、胀亡生精细胞和精子形态学研究[A];第五次全国中青年检验医学学术会议论文汇编[C];2006年

3 杜一;张燕君;曹慧仁;田青云;彭正华;孔维华;;热激对小鼠生精细胞中前列腺素E合成酶表达的影响[A];中国生理学会2007年消化内分泌生殖学术研讨会论文摘要汇编[C];2007年

4 李学家;张秀娟;陈子亮;季芳;彭白露;刘晓明;;性成熟前食蟹猴生精细胞的发育进程[A];第九届中国实验动物科学年会（2010新疆）论文集[C];2010年

5 王怀秀;李弘;袁彩霞;曹莹丽;秦琴;;人类生精细胞在培养过程中的分化与变形[A];中华医学会生殖医学分会人类精子库管理学组第三届年会全国男性生殖医学和精子库管理新进展第四次研讨会论文汇编[C];2012年

6 张燕君;李学坤;解艳艳;刘增英;孔维华;;热激通过泛素-蛋白酶体途径导致小鼠生精细胞中Cdc2含量降低[A];中国生理学会消化内分泌生殖代谢生理专业委员会2011年消化内分泌生殖学术会议论文摘要汇编[C];2011年

7 杨筱珍;陈耀星;王子旭;;己烯雌酚影响成年仓鼠睾丸一氧化氮生成及其与生精细胞凋亡关系的研究[A];中国畜牧兽医学会2004学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集（下册）[C];2004年

8 刘辉;;牦牛及其种间杂交后代生精细胞的凋亡[A];新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展（上册）[C];2001年

9 陈敏;刘以训;;热浴对猴支持细胞骨架与连接分子的影响[A];第一届中华医学会生殖医学分会、中国动物学会生殖生物学分会联合年会论文汇编[C];2007年

10 薛蕾;陈浩宇;王水明;吴惠;孙成峰;常公民;王少霞;董波;彭瑞云;;微波辐射对大鼠生精细胞的影响研究[A];第八届全国生物医学体视学学术会议、第十一届全军军事病理学学术会议、第七届全军定量病理学学术会议论文（摘要）汇编[C];2012年

中国博士学位论文全文数据库 前7条

1 徐蕾蕊;氟络草酮睾丸毒牲及其机制研究[D];复旦大学;2014年

2 王涛;TLR3在小鼠生精细胞中的表达及功能[D];北京协和医学院;2012年

3 俞作仁;小鼠精子发生不同阶段生精细胞基因表达谱的研究[D];中国协和医科大学;2003年

4 杨筱珍;己烯雌酚对成年仓鼠精子发生的影响及其作用机理的研究[D];中国农业大学;2005年

5 陈巧媛;小鼠雄性生殖细胞的天然免疫防御机制[D];北京协和医学院;2014年

6 张晓艳;Toll样受体在小鼠受损生精细胞诱导睾丸炎症反应中的功能[D];北京协和医学院;2012年

7 徐健;小鼠睾丸生殖细胞凋亡及相关基因调控的研究[D];中国协和医科大学;1999年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 褚慧;氯化锰长期低剂量染毒对大鼠子代生精细胞的影响及其作用机理[D];遵义医学院;2016年

2 孙静波;不同培养方法和细胞因子对小鼠生精细胞的增殖分化效应[D];安徽医科大学;2011年

3 谭俊玲;小鼠生精细胞与支持细胞自噬与自噬诱因的初步研究[D];山东大学;2013年

4 张春红;镉致体外培养鸡支持—生精细胞凋亡机理的研究[D];东北农业大学;2006年

5 李桂玲;槲皮素对己烯雌酚致仓鼠生精损害的缓解作用[D];河北农业大学;2010年

6 朱勤;两种环境内分泌干扰物对小鼠生精细胞T型Ca~(2+)通道的作用研究[D];南京医科大学;2011年

7 杨西平;热激导致小鼠生精细胞中MPF变化的动态过程[D];山东大学;2006年

8 华叶;小鼠生精细胞的分离纯化与鉴定[D];华东理工大学;2011年

9 夏长河;丙烯酰胺对大鼠生精细胞XRCC1蛋白表达与凋亡的影响[D];河北医科大学;2013年

10 陆亮;小鼠生精细胞T型Ca~（2+）通道和ENaC的研究[D];南京医科大学;2008年

本文编号：559807