食醋对小鼠肠道细菌16SrDNA及相关细胞因子表达量的影响

发布时间：2017-07-31 02:06

  本文关键词：食醋对小鼠肠道细菌16SrDNA及相关细胞因子表达量的影响

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【摘要】：目的：探究食醋对小鼠肠道细菌16SrDNA表达量的变化影响,并使用硫酸葡聚糖(DSS)诱导C57BL/6小鼠制备炎症性肠病模型,检测相关细胞因子表达量的变化,探究食醋对肠道的保护作用及对炎症性肠病的抵御作用。方法：将24只C57BL/6小鼠随机3组,分别标记为模型组、食醋组和对照组。对照组和模型组小鼠自由饮用蒸馏水28天后,对照组继续饮用蒸馏水,模型组自由饮用3%DSS溶液；食醋组自由饮用食醋溶液28天后,给予3%DSS溶液。在第0、7、14、21和28天收集食醋组与对照组小鼠的粪便,提取粪便细菌总DNA。采用荧光定量PCR鉴定双歧杆菌属、乳杆菌属、肠球菌属、梭菌属以及脱硫弧菌属的16SrDNA表达变化。在造模成功后,处死小鼠,取小鼠结肠中段,提取肠组织总RNA并反转录为cDNA,检测IL-10、IL-17A、IL-17F及IL-23的相对表达量变化。结果；乳杆菌属16SrDNA表达量是5类待测菌属的表达量是最高的。与对照组相比较,在不同时间点乳杆菌属的16SrDNA表达量有变化,双歧杆菌属的16SrDNA表达在实验组中有明显的升高。但双岐杆菌属和乳酸菌属两种益生菌属的16SrDNA含量在5种检测菌属中的比例维持在92.61%-99.09%。第28天时,梭菌属与肠球菌属在实验组中的16SrDNA表达量明显低于对照组。肠球菌属、脱硫弧杆菌属和梭菌属3种有害菌属的16SrDNA水平仅占5种菌属16SrDNA表达量0.91%-7.32%。通过DSS诱导形成炎症性肠病模型后,检测细胞因子相对表达量,分析发现IL-10的相对表达量在模型组中略低于食醋组和对照组,对照组的相对表达量稍高于食醋组,模型组、食醋组和对照组三者的相对表达量呈上升趋势,但无统计学差异。IL-17A在DSS组中的相对表达量略高于食醋组,但两组表达量均明显低于对照组,但不具有统计学差异。食醋组中IL-17F相对表达量明显低于对照组和模型组,模型组的表达量约为实验组的5倍(P0.01),具有显著的统计学差异。食醋组小鼠与仅饮用蒸馏水小鼠的IL-17F表达量虽然有一定差距,但无统计学意义。在对照组中,IL-23的相对表达量相对于食醋组和模型组数值较低,模型组、食醋组和对照组数值虽呈下降,但是不具有明显的统计学意义。结论：食醋对肠道双歧杆菌属、乳杆菌属两种益生菌属有一定正向调节作用,对肠球菌属、梭菌属以及脱硫弧菌属3种有害菌属具有一定的抑制作用。食醋对不同细胞因子具有不同程度的影响,进而对肠道起到一定保护作用,在抵御炎症性肠病过程中起到一定作用。
【关键词】：肠道菌群 食醋 细胞因子 炎症性肠病 荧光定量 PCR
【学位授予单位】：延边大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R151
【目录】：

• 中文摘要6-8
• ABSTRACT8-12
• 第一章 前言12-14
• 第二章 材料与方法14-22
• 2.1 实验材料14-15
• 2.1.1 实验动物14
• 2.1.2 主要试剂14
• 2.1.3 主要仪器设备14-15
• 2.2 实验方法15-22
• 2.2.1 实验分组15-16
• 2.2.2 样品采集16
• 2.2.3 主要溶液配制16
• 2.2.4 粪便细菌总DNA提取16-17
• 2.2.5 肠组织总RNA提取17-18
• 2.2.6 RNA反转录cDNA18
• 2.2.7 引物设计与合成18-19
• 2.2.7.1 粪便细菌引物设计18-19
• 2.2.7.2 细胞因子引物设计19
• 2.2.8 常规PCR19-20
• 2.2.8.1 粪便细菌PCR20
• 2.2.8.2 细胞因子PCR20
• 2.2.9 实时荧光定量PCR20-22
• 2.2.9.1 粪便细菌荧光定量PCR21
• 2.2.9.2 细胞因子荧光定量PCR21-22
• 第三章 结果22-27
• 3.1 常规PCR结果22-23
• 3.1.1 粪便细菌PCR结果22
• 3.1.2 细胞因子PCR结果22-23
• 3.2 荧光定量PCR结果23-27
• 3.2.1 粪便细菌荧光定量PCR结果23-25
• 3.2.2 细胞因子荧光定量PCR结果25-27
• 第四章 讨论27-31
• 4.1 粪便细菌16SrDNA表达量变化27-28
• 4.2 细胞因子表达量变化28-31
• 结论31-32
• 参考文献32-35
• 致谢35-36
• 综述36-45
• 参考文献41-45

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前7条

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本文编号：596981