钙对铅致大鼠脑组织损伤的营养干预机制研究

发布时间：2017-08-02 17:16

  本文关键词：钙对铅致大鼠脑组织损伤的营养干预机制研究

  更多相关文章： 钙 铅 海马 脑 皮质 基因及蛋白表达

【摘要】：[目的]通过观察不同剂量钙对染铅大鼠脑组织中二价矿物元素和海马与皮质组织形态的影响,并从分子水平研究钙对染铅大鼠海马与皮质的影响,进而探究钙对铅致脑组织损伤的营养干预机制,为进一步补钙预防铅的危害提供理论依据。[方法]选用21日龄的清洁级雄性SD大鼠60只,共分五组,每组12只。分别为对照组(基础饲料,蒸馏水)、染铅组(基础饲料,0.2%醋酸铅水)、试验Ⅰ组(基础饲料添加0.5%碳酸钙,0.2%醋酸铅水)、试验Ⅱ组(基础饲料添加1%碳酸钙,0.2%醋酸铅水)和试验Ⅲ组(基础饲料添加2%碳酸钙,0.2%醋酸铅水)。连续饲养60天后,取大鼠脑、海马及皮质,测定脑指数,及钙、铅、铁、锌、铜、锰、镁等二价矿物元素的含量;通过HE染色切片,观察海马和皮质的组织形态；用荧光定量RT-PCR法测定海马与皮质中Grm5. Camk2a、Grinl、Homerl、Prkca 和 ERK2 的 mRNA表达量;用Westernb1ot测定大鼠海马中CaMKII的蛋白表达量。[结果](1)与对照组相比,各组大鼠脑指数都明显降低；与染铅组相比,试验组差异均极显著升高(P0.01),且试验Ⅱ组脑指数达到最大。(2)与对照组相比,染铅组大鼠脑组织中钙、锌、铁、镁的含量都极显著降低(P0.01),铅的含量明显升高(P0.01),铜、锰的含量则无明显变化。与染铅组相比,试验组大鼠脑组织中钙、铁、镁含量均极显著升高(P0.01),且试验Ⅲ组含量最高；锌的含量极显著升高(P0.01),且试验Ⅱ组含量最高;铅的含量明显降低,试验Ⅱ、Ⅲ组差异达极显著(P0.01),且试验Ⅱ组含量最低；铜、锰的含量均无明显变化。(3)与对照组相比,染铅组海马与皮质细胞数量较少,细胞层变薄,细胞间隙增大,核仁不清晰。与染铅组相比,试验Ⅱ组海马与皮质细胞数量增加,细胞间隙缩小,核仁较为清晰,大部分细胞结构完好；试验Ⅲ组海马细胞核较清晰,但细胞数目较少;皮质细胞体形小,核仁不清晰。(4)与对照组相比,染铅组海马和皮质中Grm5、Camk2a、Grin1、Homer1、Prkca、 ERK2的mRNA表达量均极显著降低(P0.01)。与染铅组相比,试验Ⅰ组海马中Grm5、Camk2a、Prkca、ERK2和皮质中Homerl、Camk2a、Grinl mRNA的表达量均显著升高(P0.05、P0.01);试验Ⅱ组和Ⅲ组的海马和皮质中目的基因mRNA表达量均显著升高(P0.05、P0.01)。(5)与对照组比较,染铅组大鼠海马中CaMKIⅠ的蛋白表达量极显著下降(P0.01)。与染铅组相比,试验Ⅱ组CaMKII的蛋白表达量极显著上升(P0.01),试验Ⅲ组显著升高(P0.05)。[结论]补充适当剂量的钙能调控大鼠脑组织中因铅而引起的钙、铁、锌、镁等二价矿物元素的失调,缓解铅对大鼠海马及皮质的损伤,并可通过调控海马及皮质中NMDAR和mGluR5信号通路介导的相关基因及海马中CaMKII的蛋白表达等干预铅对脑组织的损害。
【关键词】：钙 铅 海马 脑 皮质 基因及蛋白表达
【学位授予单位】：山西农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R151
【目录】：

• 摘要7-9
• 第一章 文献综述9-16
• 1 铅致神经系统损伤的研究进展9-12
• 1.1 铅的吸收与代谢9
• 1.2 铅对脑组织的影响9-10
• 1.3 铅致脑组织损伤的机制10-12
• 2 钙对铅致神经系统损伤干预机制的研究进展12-14
• 2.1 钙的吸收及生理功能12
• 2.2 钙对铅的拮抗作用12-13
• 2.3 钙对铅致NMDAR通道的调控机制13
• 2.4 钙对铅致mGluR5通道的调控机制13-14
• 3 研究目的与意义14-15
• 4 技术路线15-16
• 第二章 钙对染铅大鼠脑组织铅、钙、铁、锌、铜、镁、锰的影响16-23
• 1 材料和方法16-17
• 1.1 实验材料16
• 1.2 实验方法16-17
• 1.3 统计分析17
• 2 结果与分析17-22
• 2.1 钙对染铅大鼠脑指数的影响17
• 2.2 钙对染铅大鼠脑组织钙、铅、锌、铁、铜、镁、锰含量的影响17-22
• 3 讨论22
• 4 小结22-23
• 第三章 钙对染铅大鼠脑组织形态的影响23-31
• 1 材料和方法23-26
• 1.1 实验材料23
• 1.2 实验方法23-26
• 2 结果与分析26-29
• 2.1 钙对染铅大鼠脑海马形态的影响26-27
• 2.2 钙对染铅大鼠脑皮质形态的影响27-29
• 3 讨论29-30
• 4 小结30-31
• 第四章 钙对染铅大鼠海马与皮质NMDAR和mGluR5通路相关基因mRNA表达的影响31-54
• 1 材料与方法31-34
• 1.1 试验动物及样品的采集31
• 1.2 材料31-32
• 1.3 实验方法32-34
• 2 结果与分析34-52
• 2.1 RNA纯度及质量检测35
• 2.2 海马与皮质内参与目的基因mRNA标准曲线的建立及回归方程的设定35-38
• 2.3 海马内参与目的基因mRNA的扩增动力学曲线和熔解曲线38-41
• 2.4 皮质内参与目的基因mRNA的扩增动力学曲线和熔解曲线41-45
• 2.5 海马和皮质β-actin、Grm5、Camk2a、Grin1、Homer1、Prkca和ERK2 cDNA扩增电泳图45
• 2.6 钙对染铅大鼠海马Grm5、Camk2a、Grin1、Homer1、Prkca和ERK2 mRNA表达量的影响45-48
• 2.7 钙对染铅大鼠皮质Grm5、Camk2a、Grin1、Homer1、Prkca和ERK2 mRNA表达量的影响48-52
• 3 讨论52-53
• 4 小结53-54
• 第五章 钙对染铅大鼠海马中CaMKII蛋白表达的影响54-58
• 1 材料与方法54-56
• 1.1 实验材料54-55
• 1.2 实验方法55-56
• 2 结果与分析56-57
• 3 讨论57
• 4 小结57-58
• 全文结论58-59
• 参考文献59-63
• Abstract63-65
• 致谢65

【参考文献】

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本文编号：610363