六色荧光标记快速PCR扩增体系的建立及验证

发布时间：2017-11-13 08:17

  本文关键词：六色荧光标记快速PCR扩增体系的建立及验证

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【摘要】：目的建立PCR快速扩增程序和体系,并对其技术指标进行验证。方法采用六色荧光标记技术,对24个常染色体STR基因座、1个Y-STR基因座和Amelogenin、Y-In Del基因座进行复合扩增及毛细管电泳检测,同时考察体系的灵敏度、特异性、同一性、稳定性、混合样本及批量样本测试,并观察各种常见检材及降解、脱落细胞检材的分型情况。结果所建立的体系灵敏度达0.062 5 ng,快速扩增仅耗时65 min就可获得准确分型;种属特异性高;各种纸质血样本和混合、降解、脱落细胞检材的分型正确。结论本研究建立的快速扩增体系可显著提升检验速率,分型准确、稳定,对建立STR数据库、研究群体遗传学和进行法医学鉴定有重要意义。
【作者单位】： 许昌市公安局刑事科学技术研究所;襄城县公安局刑侦大队;宁波海尔施基因科技有限公司;中国政法大学证据科学教育部重点实验室;
【分类号】：D919
【正文快照】： 100088)STR分型是目前法医学检验中DNA分型技术的核心,而PCR扩增反应是DNA检验中的关键环节,常规PCR扩增过程需要约3 h,如果能进一步缩短,将有利于提高鉴定效率。快速PCR扩增在保证各项性能指标的前提下,能实现较短时间内高效扩增目的片段[1],现有商品化的Global FilerTMExpre

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1 吴微微;郝宏蕾;金胄;郑小婷;;PCR扩增3因素对低拷贝模板STR分型的影响研究[J];中国法医学杂志;2006年S1期

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3 张璐;王保捷;丁梅;林子清;庞灏;邢佳鑫;宣金锋;;循环次数与体系对DNA检测灵敏度的影响[J];法医学杂志;2013年02期

4 ;[J];;年期

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1 谢新耀;直接PCR扩增体系的建立与应用性研究[D];第三军医大学;2004年

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本文编号：1179856