单细胞凝胶电泳技术在运动医学中的应用

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单细胞凝胶电泳(single cell gel electrophoresis.SCGE)又称彗星实验(comet assay),是近年来发展起来的一种在单细胞水平上检测DNA损伤与修复的新技术。SCGE实验最初由Rydbery和Johanson(1978)提出.以后经Ostling和Johanson(1984)及Singh(1988)等对实验条件进行改良.使其具有简便快速、灵敏性高、重复性好、无需放射性标记等优点,目前已被广泛应用于临床药物筛选

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胚胎中脑神经干细胞分化的研究 f1国康复医学杂志，， J .中 2 0

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综述

单细胞凝胶电泳技术在运动医学中的应用 刘晓莉苏美华侯金芸 单细胞凝胶电泳 (nl cl gleet p oei C E s g el e l r hrs,S G ) i e co s又称彗星实验 (o tasy,近年来发展起来的一种在单 cme sa)是 细胞水平上检测 D A损伤与修复的新技术。C E实验最初 N SG 由 R d ey和 J h n o (9 8提出，以后经 Osl g和 y br o a sn 1 7 ) tn i

子诱发细胞 D A链断裂时，正常的 D A超螺旋结构变得 N N松弛，N D A环向外伸展，缺口暴露了负电荷， p> 3的链且 H 1

强碱性条件促使 D A变性和解螺旋。电泳时分子量较小、 N本身带负电荷的 D A断片离开主核向阳极迁移，经荧光染料 N 染色后。光标记的 D A形成彗星状图像中的彗尾，又名荧 N故

Jh no t18 ) Snh￣9 8等对实验条件进行改良 .其 o asn1 94及 i I18) ( g (使 具有简便快速、敏性高、复性好、需放射性标记等优灵重无点.目前已被广泛应用于临床药物筛选、肿瘤诊断与治疗、衰老和细胞凋亡机制的探讨以及遗传毒理学和生物监测等研究领域口 5随着 S G -1。 C E技术的不断成熟和完善，外一些学国者已将 S G C E技术运用于运动员的训练监控和运动性伤病的

彗星实验。细胞受损越严重，片越多， D A链缺口越多，断含 N 则进入尾部的 D A越多，现为尾长和尾部荧光强度增加。 N表

未损伤细胞在电泳中 D A仍停留于核中，成圆形荧光团， N形 而无彗星样尾部。

早期诊断等方面，本文就 S G C E技术在运动医学领域的应用做简要综述。

2 S CGE实验方法

SG C E实验主要是根据 S g等的方法日不同实验室结 ih n, 合各自不同的实验条件略加修改1 6 )常的实验步骤如下：。通

1 S CGE的检测原理

21细胞准备 .在体外实验中，将对数期生长的细胞用胰蛋白酶消化， 基金项目：家自然科学基金资助项目(0 70 0;京市自然科

国 3 7 15 )北 学基金资助项目 ( 0 2 2 ) 57 0 4

SG C E是一种在单细胞水平上检测真核细胞 D A单、 N双链断裂和碱性不稳定位点的方法。该技术的原理是包埋于琼 脂糖中的细胞在细胞裂解液的作用下，胞膜、膜及其他细核膜结构被破坏 .基质也被溶解、提，内蛋白质、 N核抽胞 R A及其他成分均可进入凝胶而扩散至裂解液中，而核 D A分子 N

1北京师范大学体育与运动学院，京，0 8 5 北 10 7作者简介：晓莉，,授，士刘女教博 收稿日期：0 7 1— 8 20—00

量很高，不能进入凝胶，只能留于原位。当各种 D A损伤因 N

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