大分割放疗对实体瘤细胞损伤机制的研究

发布时间：2018-03-10 06:20

本文选题：肝转移癌　切入点：大分割放疗　出处：《天津医科大学》2013年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的:大分割放疗因其治疗时间短等优势,在体部肿瘤应用越来越广泛,尤其是在早期肺癌、原发性及转移性肝癌等肿瘤中获得较高的局部控制率。目前研究表明:与常规放疗相比较,大分割放疗对肿瘤细胞的损伤作用更明显,但目前就大分割放疗照射所造成肿瘤细胞的死亡方式尚不清楚。细胞受到照射后,其死亡方式主要有细胞凋亡与细胞坏死,新近研究表明:细胞坏死可以通过RIP1/RIP3信号通路调控,因此,本课题主要研究以下两部分内容:1.收集天津医科大学附属肿瘤医院射波刀中心收治的肝转移癌病例的临床资料,分析大分割放疗对肝转移瘤局部控制率。2.以非小细胞肺癌细胞系为载体,研究不同分割放疗后肿瘤细胞的死亡方式及其相关调控机制。有望为大分割放疗提供放射生物学依据。方法:1.收集天津医科大学附属肿瘤医院射波刀中心收治的57例肝转移癌患者的临床资料,并进行随访。结果采用SPSS进行肿瘤局部控制及影响因素分析;2.通过免疫印迹技术验证RIP1及RIP3在2种非小细胞肺癌细胞系中表达水平;3.采用3种不同的RIP3干扰质粒转染293T细胞,制备慢病毒,感染A549和LTEP-A2细胞,建立稳定细胞系;采用免疫印迹技术验证RIP3的干扰效果;4.选择不同分割剂量照射非小细胞肺癌细胞系,并行克隆形成实验检验细胞的克隆形成能力。5.采用免疫印迹技术检测两种细胞系不同分割照射后(1OGy×1F、2Gy×1F、2Gy×9F)不同时间点(0.5h、1h、2h、4h、6h、8h、16h、24h),细胞凋亡分子标记caspase-3、cleaved caspase-3及细胞坏死标记HMGB-1的表达水平;6.采用免疫荧光检测A549细胞单次大剂量量照射后细胞坏死标记HMGB-1的表达水平。结果:1.肝转移癌射波刀治疗后1年及2年的局部控制率分别为94.4%和89.7%。2.RIP1和RIP3在非小细胞肺癌细胞系A549及LTEP-A2均有表达,但表达水平存在差异。3.细胞克隆形成实验结果显示:A549及LTEP-A2细胞随照射剂量的增加,RIP1泛素化酶抑制剂necrostatin-1使其克隆形成能力明显高于对照组(DMSO组)。4.免疫印迹技术检测A549细胞经不同分割剂量照射后不同时间点的HMGB-1、caspase-3及cleaved caspase-3的表达水平。结果显示:提取全细胞蛋白,HMGB-1、caspase-3和cleavedcaspase-3在各不同剂量组均无时间依赖性。5.免疫荧光结果显示:A549细胞经单次大剂量(1OGy)照射后HMGB1随着时间延长从细胞核释放到细胞浆内。结论:1.对有1-4个肝转移灶的患者,采用射波刀治疗安全有效。2.RIP1及RIP3在正常的肺腺癌细胞系A549和LTEP-A2中均有表达,可为采用细胞系研究程序性坏死提供细胞载体。3.HMGB1存在于细胞核内的非组蛋白,对采用全细胞蛋白免疫印迹检测无法对细胞放疗后细胞坏死水平进行有效检测;但随着照射剂量的增加cleaved caspase3表达水平升高,提示细胞随着照射剂量增高发生凋亡增多。4.A549细胞系经过不同分割剂量照射后,胞浆中的HMGB1表达水平呈现时间依赖性。采用细胞程序性坏死抑制剂Nec-1则能有效抑制细胞核内HMGB1蛋白向胞浆内释放。5.两种细胞系经不同分割剂量照射后,采用细胞程序性坏死抑制剂则可提高细胞的克隆形成能力。以上研究结果提示:大分割放疗后,肿瘤细胞可能发生程序性坏死,其程度可能与分割剂量呈正相关。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R730.55

【相似文献】