实验大鼠过敏性休克时IL-25、类糜蛋白酶表达的研究
本文选题：过敏性休克 切入点：IgE 出处：《皖南医学院》2017年硕士论文 论文类型：学位论文
【摘要】：目的:研究大鼠过敏性休克时IL-25和肥大细胞类糜蛋白酶表达的意义。方法:将清洁级(SD)雄性实验大鼠随机分为正常对照组和实验组,实验组分别于第1、5d腹腔注射鸡卵蛋白,自首次给药后第18d尾静脉注射鸡卵蛋白激发过敏性休克,正常对照组注射生理盐水,造模完成后,实验组又分为实验对照组和实验死亡组;实验对照组为激发过敏性休克未死亡的大鼠,实验死亡组为激发过敏性休克死亡的大鼠:分为死后常温0h组、死后常温12h组、死后冷藏12h、24h、48h、72h组(每组各6只)。最后在规定时间内取心血,用酶联免疫吸附测定法(ELISA法)分别检测血清中的IgE、IL-25和肥大细胞类糜蛋白酶的含量;并且在相应时间取出各组织(喉头、气管、肺、心、肝、肾及小肠组织),放于10%中性甲醛中固定48h后,脱水、浸蜡和包埋,制成蜡块。再经过切片,进行HE染色,观察各组织病理变化;并选取肺、心和小肠组织的切片,用免疫组织化学染色技术对目标蛋白进行染色,显微镜下观察拍照IL-25和类糜蛋白酶在各组的表达变化并采集图片,再利用计算机图像处理技术分析比较各组IL-25和类糜蛋白酶的积分光密度(IOD)。分析完实验数据,探讨在过敏性休克不同保存时间段两个指标与正常对照组变化情况,从而判断这两个指标在过敏性休克方面的价值。结果:1)血清中指标IgE、IL-25及类糜蛋白酶的分析结果:(1)正常对照组与实验对照组(过敏性休克未死亡组)、过敏性休克死亡常温0h、常温12h、冷藏12h、24h、48h、72h组的IgE含量进行比较P0.01;IL-25及类糜蛋白酶的含量分别用上面方法进行比较,同样得出P0.01。(2)实验对照组与过敏性休克死亡各组的IgE含量进行比较P0.01;IL-25及类糜蛋白酶的含量分别用上面方法进行比较,同样得出P0.01。(3)过敏性休克死亡常温0h组与其他休克死亡各组的IgE含量比较P㧐0.05;IL-25及类糜蛋白酶的含量分别用上面方法比较,同样得出p㧐0.05;观察数据发现,血清中的ige含量在常温0h组最大,其他组有所下降,血清中的il-25含量也是如此;血清中的类糜蛋白酶含量在常温12h组最大,其他组有所下降。2)指标il-25:(1)在肺组织内,正常对照组与实验对照组、过敏性休克死亡各组il-25的iod值进行比较p0.05;实验对照组与过敏性休克死亡常温0h组il-25的iod值进行比较p0.05,与过敏性休克死亡常温12h、冷藏12h、24h、48h、72h组il-25的iod值进行比较p㧐0.05;过敏性休克死亡常温0h组与休克死亡冷藏48h、72h组il-25的iod值进行比较p0.05,与休克死亡常温12h、冷藏12h、24h组il-25的iod值进行比较p㧐0.05,且在休克死亡常温0h时il-25的iod均值最大,其他组依次降低;(2)在心肌内,正常对照组与实验对照组、过敏性休克死亡各组il-25的iod值进行比较p0.05;实验对照组与过敏性休克死亡常温0h、冷藏12h、24h、48h、72h组il-25的iod值进行比较p0.05,与过敏性休克死亡常温12h组il-25的iod值进行比较p㧐0.05;过敏性休克死亡常温0h组与其他休克死亡各组il-25的iod值进行比较p㧐0.05,且在休克死亡常温0h时il-25的iod均值最大,其他组有所降低,常温12h时的下降幅度大于冷藏12h的;(3)在小肠组织内,正常对照组与实验对照组、过敏性休克死亡各组il-25的iod值进行比较p0.05;实验对照组与过敏性休克死亡各组il-25的iod值进行比较p㧐0.05;过敏性休克死亡常温0h组与其他休克死亡各组il-25的iod值进行比较p㧐0.05,在休克死亡常温0h时iod值最大,其他有所下降。3)类糜蛋白酶指标:(1)在肺组织中,正常对照组与实验对照组、过敏性休克死亡各组类糜蛋白酶的iod值进行比较p0.05;实验对照组与过敏性休克死亡常温0h、冷藏12h、24h组类糜蛋白酶的iod值进行比较p0.05,与过敏性休克死亡常温12h、冷藏48h、72h组类糜蛋白酶的iod值进行比较p㧐0.05;过敏性休克死亡常温0h组与休克死亡常温12h、冷藏48h、72h组类糜蛋白酶的iod值进行比较p0.05,与休克死亡冷藏12h、24h组类糜蛋白酶的iod值进行比较p㧐0.05,且在休克死亡常温0h时类糜蛋白酶的iod均值最大,其他组依次降低;(2)在心肌中,正常对照组与实验对照组、过敏性休克死亡各组类糜蛋白酶的iod值进行比较p0.05;实验对照组与过敏性休克死亡各组类糜蛋白酶的IOD值进行比较P0.05;过敏性休克死亡常温0h组与其他休克死亡各组的类糜蛋白酶的IOD值进行比较P㧐0.05,且在休克死亡常温0h时类糜蛋白酶的均值最大,其他组有所降低,常温12h时的下降幅度大于冷藏12h的;(3)在小肠组织中,正常对照组与实验对照组、过敏性休克死亡各组类糜蛋白酶的IOD值进行比较P0.05;实验对照组与过敏性休克死亡各组类糜蛋白酶的IOD值进行比较P0.05,过敏性休克死亡常温0h组与其他休克死亡各组的类糜蛋白酶的IOD值进行比较P㧐0.05,在休克死亡常温0h时IOD值最大,其他有所下降。结论:1)血清IgE在大鼠过敏性休克时表达显著升高,证明造模成功;并且发现血清IgE水平与休克严重程度呈一定的正相关性。2)大鼠过敏性休克血清、肺、心肌和小肠组织中IL-25表达增加,随着死后保存时间的延长,表达呈下降趋势;且血清中的IL-25高低与休克严重程度呈现一定的正相关。3)大鼠过敏性休克血清、肺、心肌及小肠组织中类糜蛋白酶表达增加,随着死后保存时间的延长,表达呈现下降趋势;并且在血清、心肌和小肠组织中,其水平与休克严重程度呈现一定的正相关性。
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【学位授予单位】：皖南医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：D919.4
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，本文编号：1608892
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