丹参酮对力竭运动大鼠腓肠肌细胞凋亡的影响

发布时间：2018-03-31 09:15

  本文选题：丹参酮　切入点：力竭运动　出处：《福建中医药大学》2013年硕士论文

【摘要】：研究目的：本课题旨在研究丹参酮对力竭运动大鼠血清CK、LDH活性、腓肠肌组织形态学及细胞凋亡相关因子Caspase-3、8、9的影响,探讨丹参酮改善力竭运动大鼠腓肠肌细胞凋亡的可能机制。研究方法：选用体重200ga：20g的雄性SD大鼠,按随机数字表分为安静对照组(A组)和运动组(B组),运动组大鼠又分为力竭运动组(B0组),运动+低剂量丹参酮组(B1组),运动+中剂量丹参酮组(B2组),运动+高剂量丹参酮组(B3组),运动+维生素E组(B4组)(所有分组n=8只)。安静对照组不做任何运动,常规饲养,自由饮食；运动组大鼠进行力竭运动。B1、B2、B3、B4组予在力竭运动后腹腔注射药物。B1低剂量组3mg/kg/d,B2中剂量组6mg/kg/d, B3高剂量组12mg/kg/d, B4维生素E组25mg/kg/d、经过5周力竭运动实验后,各组分别取血清、腓肠肌组织保存,用光镜及透射电镜观察腓肠肌形态结构的变化,检测血清指标CK. LDH的变化,应用免疫组织化学法检测Caspase-3、8、9蛋白的表达及TUNEL法检测腓肠肌细胞凋亡及细胞凋亡指数,应用Real-time PCR检测Caspase-3 mRNA的表达情况。研究结果：1.血清CK、LDH检测结果比较1.1正常对照组血清CK、LDH分别为996.57±64.23、618.17±72.96；与正常对照组比较,力竭运动模型组血清CK、LDH活性明显升高,分别为1961.60±305.74(P0.05)、1398.20±95.62(P0.01)。1.2低、中、高剂量丹参酮组分别与力竭运动模型组比较,血清CK活性均明显降低,分别为1334.20±139.56、1188.80±91.93、1337.20±130.91(P0.05)；血清LDH活性均明显降低,分别为1113.30±159.58(P0.05)、802.00±120.34(P0.01)、1094.80±147.17(P0.05)。1.3维生素E组与力竭运动模型组比较,血清CK、LDH活性均明显降低,分别为1226.20±159.73(P0.05)、1079.40±85.83(P0.01)。2.形态学观察(1)HE染色结果：模型组大鼠腓肠肌组织有以下病理改变：腓肠肌纤维肿胀,结构紊乱,排列不齐；肌横纹不清晰,局部肌膜不完整；肌核分布不均,出现核聚集或部分肌细胞核消失；肌间隙严重消失。而丹参酮组能明显改善力竭运动损伤,肌纤维排列明显较整齐,条理较清晰,只有少部分肌纤维肿胀；肌细胞核较均匀分布在肌膜下,无增生和肿胀或固缩,较清晰；肌纤维间隙尚正常。(2)电镜观察结果：正常组腓肠肌纤维排列规则整齐,清晰可辨,可见线粒体分布于相邻的肌原纤维之间,包膜尚清楚,而模型组大鼠腓肠肌组织出现肌丝排列不整齐,模糊,肌节紊乱,Z线异常,出现模糊、流变、扭曲,线粒体空泡样变,肿胀,溶解。不同剂量丹参酮组腓肠肌肌纤维较模型组损伤程度要轻,以中剂量组改善最为明显。3.免疫组化检测结果模型组中Caspase-3、8、9细胞阳性着色程度明显较正常组深,免疫组化评分明显高于正常组(P0.01)；与模型组相比较,丹参酮组Caspase-3、8、9细胞阳性着色程度明显较浅,免疫组化评分明显低于模型组(P0.01)；与模型组相比较,维生素E组Caspase-3、8、9细胞阳性着色程度明显较浅,免疫组化评分明显低于模型组(P0.01或P0.05)。4.TUNEL检测结果：模型组凋亡细胞数量明显增多,高于正常对照组(P0.01)；丹参酮组凋亡细胞数量明显低于模型组(P0.01)；维生素E组细胞凋亡数量较模型组减少(P0.05)。5.Real-time PCR检测结果：模型组Caspase-3 mRNA相对表达量明显高于正常对照组(2-△△Ct2)；低剂量丹参酮组Caspase-3 mRNA相对表达量与模型组相比较未见显著差异(0.52-△△Ct2)；中剂量丹参酮组Caspase-3 mRNA相对表达量明显低于模型组(2-△△Ct0.5)；高剂量丹参酮组Caspase-3 mRNA相对表达量明显低于模型组(2-△△Ct0.5)；维生素E组Caspase-3 mRNA相对表达量明显低于模型组(2-△△Ct0.5)。研究结论：1、不同剂量丹参酮可降低力竭运动大鼠血清CK、LDH活性,对力竭运动大鼠的腓肠肌损伤具有一定保护作用,不同剂量之间未呈现量效关系,以中剂量丹参酮的疗效较佳。2、不同剂量丹参酮都能改善腓肠肌组织病理形态,减轻腓肠肌结构的破坏,缓解腓肠肌损伤情况,中剂量丹参酮组改善效果最为明显。3、丹参酮可以通过下调Caspase-3、8、9蛋白及Caspase-3 mRNA的表达来实现抗凋亡作用,从而改善腓肠肌组织损伤状态。
[Abstract]:鐮旂┒鐩�鐨勶細鏈�璇鹃�樻棬鍦ㄧ爺绌朵腹鍙傞叜瀵瑰姏绔�杩愬姩澶ч紶琛，

本文编号：1690088