Caspase3特异的异喹啉类细胞凋亡显像剂的研究

发布时间：2018-04-10 07:22

  本文选题：Caspase3　切入点：放射性标记　出处：《中国人民解放军医学院》2017年硕士论文

【摘要】：目的:本研究设计了新型凋亡探针,合成了前体和标准品,进行了 18F标记和11C标记的探索,并通过A549细胞摄取实验、细胞阻断实验、肝凋亡模型大鼠与对照组生物分布实验和荷A549瘤裸鼠PET显像等一系列实验,深入研究了 Caspase 3特异的异喹啉类的探针11C-HIQPM的生物学特性,初步证明了异喹啉类探针能够特异结合凋亡细胞,具有在体探测凋亡细胞的潜力。方法:在不同的碱性环境和加热温度下,分析前体HIQPH和标准品(HIQPF、HIQPM、HIQPS)的稳定性;分别利用氟多功能模块和碳多功能模块进行18F和11C标记,利用HPLC与标准品共进样鉴定产物,进一步对确定结构的产物进行质量控制;在体外,以顺铂诱导A549肺腺癌细胞凋亡,通过细胞摄取实验测量11C-HIQPM与细胞结合不同时间的摄取规律以及细胞放射性摄取率与细胞凋亡率之间的关系,通过阻断实验研究11C-HIQPM与Caspase 3结合的特异性,并检测了12C-HIQPM对Caspase 3的半浓度抑制常数;以D-半乳糖胺/脂多糖联合应用诱导大鼠肝细胞凋亡,研究了11C-HIQPM在正常大鼠和肝凋亡大鼠体内的分布规律和区别;取荷A549瘤裸鼠,在顺铂化疗作用前后分别进行11C-HIQPMPET/CT显像,对比肿瘤部位和肌肉组织放射性摄取值的变化。结果:前体和标准品在高温和强碱下稳定性差,在各种反应条件下18F标记均无法得到目标产物18F-HIQPF; 11C标记得到2位N甲基化的产物11C-HIQPM,放射化学纯度大于98%,比活度为41.81±9.89 GBq/μmol (n = 5),体外稳定性高;凋亡的A549细胞摄取11C-HIQPM最高的时间是20min,之后反而被细胞排出;A549细胞对11C-HIQPM的摄取率与细胞凋亡率相关(y= 0.0192 x +0.1310,R2 =0.9257) : Caspase3特异阻断剂Ac-DEVD-CHO抑制凋亡细胞摄取11C-HIQPM的IC50 为 113.4 nM,表明11C-HIQPM 能与 Caspase 3 特异结合,12C-HIQPM 对 Caspase 3的IC50为36nM; 11C-HIQPM在大鼠体内主要经肾脏代谢,其余器官存在少量非特异性摄取,模型组大鼠肝脏摄取值为正常大鼠肝脏摄取值的1.7倍:根据PET/CT显像结果,荷A549瘤裸鼠化疗前,肿瘤/肌肉摄取值比(T/M)为1.9,化疗后,肿瘤/肌肉摄取值比为5.8,化疗后肿瘤摄取值是化疗前肿瘤摄取值的3.6倍,凋亡的肿瘤组织在PET图像中呈现“高亮”区域,与周围组织对比度高。结论:通过11C标记得到新型异喹啉类凋亡显像剂11C-HIQPM,体外细胞摄取实验和体内生物分布实验均表明11C-HIQPM能够特异结合活化的Caspase 3,并有潜力应用于在体凋亡细胞检测。本研究初步验证异喹啉类显像剂能够适用于PET凋亡显像。
[Abstract]:AIM : To study the biological characteristics of the probe 11C - HIQPM in normal rats and normal rats . The effects of 11C - HIQPM and Caspase - 3 were studied by means of cell - uptake experiments . The IC50 of 11C - HIQPM on the uptake of 11C - HIQPM was 1 . 7 times higher than that of normal rats . The results showed that 11C - HIQPM could specifically bind to Caspase 3 , and the tumor / muscle uptake value was 3.6 times that of normal rats .

【学位授予单位】：中国人民解放军医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R817

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本文编号：1730231