RNA用于体液鉴别的方法学建立及其法医学应用研究

发布时间：2019-04-23 10:04

【摘要】：目的 为了对犯罪现场体液斑迹同时进行组织来源和个体识别的鉴定，建立一种准确、灵敏、快速的新方法。本文从基因表达的组织特异性入手，筛选出包括外周血、月经血、精液、阴道分泌物、唾液在内的常见体液特异性的mRNA标识，通过RNA判断体液来源以及DNA进行个体识别。 方法 根据实验要求，分别收集外周血、月经血、精液、阴道分泌物、唾液样本；比较并确立同时提取RNA和DNA的方法；选取了用于体液组织来源识别的7对引物,扩增产物在300bp以下，片段长度相似则采用不同荧光标记用以区分，统一了扩增条件，使7对引物可以在相同参数下扩增，用毛细管凝胶电泳法对RNA逆转录扩增产物和DNA扩增产物进行检验；应用所建立的方法分别通过对外周血、月经血、精液、唾液、阴道分泌物进行验证。 结果 1确定采用TRIzol法进行RNA和DNA的同时提取。 2根据目标样本的序列，筛选多对引物，探索优化扩增体系，使扩增条件能够同时满足多对引物的需要。 3对外周血、月经血、精液、阴道分泌物、唾液样本进行验证，均得到可靠结果。 4五种体液除了均表达管家基因18S、GAPDH外，外周血表达SPTB；月经血表达MMP-7、SPTB、HBD-1；精液表达PRM-2；阴道分泌物表达HBD-1；唾液表达STATH。 结论 1本课题所建立的是一种对体液判别有效、实用的方法。 2根据RNA在不同类型、功能的细胞或组织中的表达模式存在差异，，确立通过检测RNA表达水平来进行体液组织来源鉴别的方法。提取RNA进行组织来源鉴定的同时进行DNA个体识别的检验。 3采用RNA作为研究目标进行体液识别的标识，为此研究领域提供了一个新的思路。
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【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：D919

【参考文献】

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本文编号：2463371