伤科外用药对运动性骨骼肌慢性损伤再生过程中结蛋白表达影响的研究

发布时间：2020-01-28 12:13

【摘要】：研究目的：骨骼肌慢性损伤在运动员、体育爱好者中发病率一直处于较高水平，结蛋白是骨骼肌修复过程中的重要蛋白，了解骨骼肌损伤过程中结蛋白的表达规律可以有预防运动性骨骼肌慢性损伤，也是运动训练周期安排的重要依据。本研究通过动物实验，研究成年兔在大强度的跑跳运动后造成运动性慢性骨骼肌损伤模型，，探索其损伤过程中结蛋白的表达规律，此规律可作为运动训练的周期安排以及预防运动损伤的重要依据；并将各药物干预组与训练对照组进行纵向对比，同时结合各时间段内不同药物干预组之间进行横向对比，得出不同时期，不同药物干预组的结蛋白表达情况，充分结合各组组织学变化，探索药物干预运动性肌肉损伤后结蛋白表达的规律，为进一步探索药物对于肌肉损伤的效果奠定基础。为临床应用提供依据，更好的为运动员及体育运动爱好者治疗此类疾病，降低运动性慢性肌肉损伤对于专业运动员运动能力和运动寿命的影响，以及缩短体育运动爱好者的运动损伤的恢复期。研究方法：成年雄性新西兰兔94只作为实验对象，体重为2300g±200g。随机分为空白对照组、运动对照组、药物干预组。其中运动对照组根据动物运动时间长短分为2周训练对照组、3周训练对照组、4周训练对照组、5周训练对照组。药物干预组需要先进行两周跑跳训练后，将其分为9组进行药物干预，为消痛贴膏训练3周组、消痛贴膏训练4周组、消痛贴膏训练5周组；扶他林训练3周组，扶他林训练4周组，扶他林训练5周组，安慰剂训练3周组，安慰剂训练4周组，安慰剂训练5周组。根据训练方案进行大强度跑跳运动，每只兔每天跑跳运动最少进行300次，每周连续训练5天。在不同的时间节点进行左后退腓肠肌内侧头取材。通过免疫组化检测方法，分析其不同时时期不同药物干预结蛋白表达情况。研究结果： 1.以时间节点进行纵向比较：与空白组比较，训练2周组、训练3周组OD值比空白组上升都具有极显著性差异，训练4周组、训练5周组没有显著性差异；与训练2周组比较，训练3周组OD值没有显著性差异，训练4周、训练5周组下降具有显著性差异；与训练3周组比较，训练4周、训练5周OD值下降极具显著性差异；与训练4周组比较，训练5周组OD值没有显著性差异。 2.相同用药以时间节点进行纵向比较：在消痛贴膏组中，与训练敷药3周组比较，训练敷药4周组和训练敷药5周组的OD值下降极具显著性差异；与训练敷药4周组比较，训练敷药5周组OD值没有显著性差异。在扶他林组中，与训练敷药3周组比较，训练敷药4周组和训练敷药5周组的下降极具显著差异；与训练敷药4周组比较，训练敷药5周组OD值的下降也极具显著差异。在安慰剂组中，各训练时间分组之间均没有显著性差异。 3.相同时间节点以不同药物干预进行横向比较：训练和药物干预3周时，与对照组比较，安慰剂组的OD值极显著低于对照组，扶他林组的OD值显著高于对照组；与安慰剂组比较，消痛贴膏组以及扶他林组的OD值极显著高于安慰剂组。训练和药物干预4周、5周时，不同用药组之间均没有较明显差异性。研究结论： 1．慢性骨骼肌损伤中，新伤的产生和旧伤的修复相互之间不干预，重复运动损伤过程中表现出来的病理变化事实上是损伤和再生相互叠加起来的结果。 2．消痛贴膏在整个实验过程中，对于慢性骨骼肌损伤再生过程中结蛋白的表达没有起到促进作用。 3．扶他林软膏（双氯芬酸二乙胺乳膏剂）在整个实验过程中，对于慢性骨骼肌损伤再生过程中结蛋白的表达起到了促进作用。
【图文】：

示意图,结蛋白,Z线,示意图

Morgan DL 等人研究认为[29]，细胞骨架结构的解离的主要原因是肌肉离心收缩运动时所产生的应力，这种机械性的应力可引起细胞骨架结构结合处的力量不平衡，从而导致细胞骨架机构遭到破坏以及 Z 线被破坏。李世成等人研究发现[30]，大强度离心运动后的实验动物骨骼肌肌纤维膜出现破裂现象，胞浆内钙离子浓度升高，导致受伤部位局部钙离子浓度升高，激活了钙激活中性蛋白酶的活性，从而导致细胞骨架蛋白发生降解，而导致结蛋白损伤。正常线粒体的呼吸被钙离子的升高而抑制，激活补体，炎症细胞聚集，发生局部肌肉细胞组织坏死现象发生，与此同时多核白细胞和单核巨噬细胞也会参与这个局部吞噬过程，它们在此过程中促进许多细胞因子的释放。1.4.6.1 结蛋白在正常骨骼肌中的表达各国学者对于结蛋白的研究是从二十世纪八十年代开始的，随着科研水平的提高，研究者们采用的研究方法也种类繁多，但大多数学者还是采用免疫组织化学技术、荧光抗体技术、免疫电镜及激光共聚焦扫描显微镜等技术方法。目前绝大部分学者对结蛋白在肌纤维中的分布和表达进行了大量的实验研究，并且进一步地研究了结蛋白在肌卫星细胞中的分布和表达，并取得了比较一致的研究成果。

均匀分布,图像,显微镜,细胞核

当方差不齐时，使用 Tamhane’s T2（M）检验。对本 T 检验进行。P＜0.05 被认为有显著性差异，P＜0.01 织形态学观察结果观察成年兔腓肠肌内侧头肌肉细胞组织形态学变化，使用切片组织进行了处理，使用显微镜（OLYMPUS CX31 以织切片进行观察并拍照。腓肠肌组织 HE 染色后，显微镜红色，细胞核为蓝色。苏木精-伊红染色是组织病理学中到各种组织或细胞的一般形态及特点[47]。下观察，横纹肌表面平滑，肌纤维呈多角状排列紧密，纤完整无破裂，胞浆均匀一致，细胞核均匀分布于肌膜下，生、肥大或固缩。染色质均匀一致，没有间断。组织切片
【学位授予单位】：首都体育学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R873;G804.7

【参考文献】