贵州人群CYP2C19基因多态性及其对服用阿米替林后驾驶能力影响的研究

发布时间：2020-05-09 07:59

【摘要】：目的:调查贵州人群中阿米替林代谢关键酶CYP2C19基因多态性分布特征,研究CYP2C19不同基因类型的人群服用阿米替林后10h内驾驶损害的程度。方法:1、采用正交优化综合评分法对CYP2C19基因PCR扩增体系进行优化。选取无血缘关系贵州人群310名,以优化后条件进行扩增,AB3500XL遗传分析仪检测CYP2C19*2和*3两个SNP位点的基因多态性数据,Modified-power state软件计算等位基因频率、基因型频率并进行Hardy-Weinberg平衡检验,计算各位点非父排除率(PE)、匹配概率(Pm)、个人识别率(DP)、杂合度(H)、多态性含量(PIC)等,统计分析贵州人群多态性分布特征。通过文献检索得到其他地区及人种的CYP2C19*2和*3基因多态性组成的代谢类型占比数值。将试验所得贵州人群的代谢类型分布比率与其他地区和人种进行对比。2、选取不同CYP2C19*2和*3基因组合的志愿者共16名,除CYP2C19*2GG/CYP2C19*3AA仅1人,其他各种基因型组合各3名,根据体重,志愿者一次性口服阿米替林0.93mg/kg,从服药前0h开始记录11个小时的六项综合能力,包括连线试验、直尺试验、单脚直立试验、画图试验、嗜睡及疲劳量表,共计测量11次。采用SPSS 22.0统计软件,用一般线性模型分别比较组间、时间点之间是否有统计学差异,并对组间和时间点的交互项分析,探索各组间的变化趋势是否有差异。对各基因型人群的各项能力评分进行归一化处理后采用雷达图进行综合评价,用IPP软件对计算雷达图面积,比较面积大小。结果:1、优化后的4μL体系扩增条件为:PCR Mix 2.0μL、Taq DNA聚合酶0.2μL、循环32次。2、CYP2C19*2的GG、GA、AA三种基因型频率分别为50%、43.22%和6.94%,其G和A的等位基因频率分别为:71.61%和28.39%;CYP2C19*3的GG、GA、AA三种基因型频率分别为87.09%、11.94%和0.97%,其G和A的等位基因频率分别为93.06%和6.94%。CYP2C19*17基因型均为CC。CYP2C19*2和*3的群体遗传学参数分别如下:DP:0.559、0.227;H:0.435、0.119;PIC:0.32、0.12;PE:0.137、0.012;Pm:0.441、0.773;TPI:0.89、0.57。贵州人群CYP2C19*2和*3这两个位点的突变共组成的6种基因型,根据代谢速度分为快、中、慢代谢型分布频率依次为:43.55%、42.58%、和13.87%。贵州人群与沈阳、重庆等7个地区人群的CYP2C19快中慢三种代谢类型分布频率比较,差异没有统计学意义。以贵州人群为代表的中国人群与日本、泰国、印度人群的CYP2C19快中慢三种代谢型分布频率相比较,差异无统计学意义。以贵州人群为代表的亚洲人群与白色人种及黑色人种的CYP2C19代谢类型分布频率相比较,差异具有统计学意义。3、各项能力测试中,各组的最大分值时间点不同:直尺A-F各个基因型服药后最大抓取值的时间点分别为:4h、7h、6h、7h、7h、6~8h;疲劳评价中A~F各基因型的最大值的时间点依次为:5、4~5h、6h、5h、4h、3h;嗜睡测评中,A~F各基因型的最大值的时间点依次为:4、4、4、5、4、5h;连线试验中A~F各基因型的最大值的时间点依次为:3、6、4、5、7、6h;画图试验中,A~F的最大值分别在:8、2、2、2、2h、2和8h。各项能力的组间差异分别是:直尺试验中A组和D组、C组和D组、D组和E组组间差异具有统计学意义(p0.05);疲劳试验中A组和E组间差异具有统计学意义(p0.05);嗜睡试验中A组和D组、A组和E组间差异均具有统计学意义(p0.05);B组与D组、B组与E组间差异均具有统计学意义(p0.05);C组与D组、C组与E组间差异均具有统计学意义(p0.05);连线试验中;A组和C组、A组和E组间差异均具有统计学意义(p0.05);平衡组间无差异;画图试验中A组与C组、A组与D组差异均有统计学意义(p0.05)。对各项能力进行综合评价,比较各组的最大影响时间点,面积越小影响越大。⑴A~F组的最小面积时间点依次为:在4、6、6、4、7、6h;⑵A~F组的最小面积的大小均不相同;⑶各组受影响时间长短不同:A组5h;B组7h,C、D、F组均为8h、E组9h。结论:1、正交设计结合综合评分法具有评价指标全面、结果分析直观、设计过程简单、评价方法客观的优点,适宜于DNA扩增条件的优化。2、CYP2C19*2、*3的基因各代谢类型分布频率在我国及亚洲无地区差异性,但亚洲人种、白色人种、黑色人种之间存在差异性。3、服用阿米替林后,疲劳和嗜睡所对应的警觉力和注意力的影响较大,画图、单腿直立对应的视觉记忆和平衡力执行力能力影响无统计学差异。4、服用阿米替林10 h内,不同基因型人群的综合驾驶能力影响存在一定差异。5、所构建的综合驾驶能力评定方法可用于交警执法中简便、快速地评估服用药物后驾驶能力的影响情况。
【图文】：

基因分型,阳性对照,阴性,图谱

CYP2C19*2、*3、*17基因分型图谱

雷达图,能力综合,雷达图,最小面积

疲劳和嗜睡的增减比变化依然最大，与 5 项能力综合评价时一致；⑶画图试验的分值增减幅度不大（见图 2-8、2-9）。通过雷达图面积计算，，A~F 组的最小面积均在 4h，且面积大小值均不相同，这与五项能力综合评价一致（见表 2-10）。图 2-8 不同基因型六项能力 0、2、4、8h 雷达图Figure 2-8 Six abilities of different genotypes0, 2, 4, and 8h radar maps
【学位授予单位】：贵州医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：D919.1

【参考文献】