通过检测miRNA水平诊断心源性猝死中急性心肌梗死的法医学实验研究

发布时间：2020-05-14 03:47

【摘要】：目的:心源性猝死(sudden cardiac death,SCD)是指心脏器质性原因造成的主要以意识骤然丧失为特征的、急速的、自然的死亡。急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)是导致SCD最主要的原因之一。目前,微小核糖核酸(microRNAs)经动物学实验已经被证实了可以用来诊断AMI,且在发生AMI后不同死亡时间间隔(PMI),microRNAs仍然具有重要鉴别价值。本论文的研究目的是初步探究miRNA-1、miRNA-126、miRNA-133、miRNA-499与AMI、死后PMI的相关性,进而为深入研究miRNA-1、miRNA-126、miRNA-133、miRNA-499是否能够成为AMI相关的敏感生物标记物及死后PMI的推断打下基础。在技术手段上能有效帮助法医工作者快速准确地鉴定AMI猝死。方法:1、实验用SD大鼠随机分为四组,AMI组:结扎大鼠心脏左冠状动脉前降支,造模后于0.25h、0.5h、1h、2h麻醉处死大鼠,取心血及心脏组织,每个时间点12只。AMI对照组:4只大鼠,大鼠心脏左冠状动脉前降支穿线不结扎,麻醉处死后取心血及心脏组织。PMI组:将大鼠麻醉处死后分别放置0h、3h、6h、12h、24h,后开胸采集大鼠右心室血液,每个时间点12只。PMI对照组:5只大鼠,直接麻醉处死采血。2、结扎大鼠左冠状动脉前降支后采用生理信号采集处理系统及HE染色后评估大鼠AMI造模是否成功。3、应用qRT-PCR方法检测AMI后0.25h、0.5h、1h、2h大鼠心血中miRNA-1、miRNA-126、miRNA-133、miRNA-499表达量,同样方法检测大鼠死后0h、3h、6h、12h、24h上述四种miRNA的含量,将其作为参数引入回归方程。结论:本实验首次研讨了在AMI发生后0.25h与对照组的区别,大鼠心血中miRNA-1、miRNA-126、miRNA-133及miRNA-499较对照组有显著升高,具有明显的相关性与对应性,证实与大鼠AMI的发生存在着密切相关的联系,从而预测miRNA-1、miRNA-126、miRNA-133及miRNA-499能够成为一种新型的AMI诊断生物标志,为今后法医工作中对早期AMI引起的心源性猝死的死亡机制分析及临床上AMI患者的早期救治打下了坚实的根基。研究了miRNA-1、miRNA-126、miRNA-133及miRNA-499与死后PMI之间的关系,四者在死后12h内含量较稳定,对今后法医工作中死后PMI推断有指导性意义。
【图文】：

体液鉴定、种属鉴定、死亡时间推断及个体年龄、疾病鉴定等方面扮演的新角色。1.3.1 miRNA 在体液中的分布及表达在法医调查中，检测，，收集和正确识别体液是对专业人员重要的支持手段。多年来，使用了各种基于血清学的方法，但是其缺乏灵敏性和特异性。为了解决这个问题，多数研究者们认为 miRNA 具有潜力用于识别证据，如尿、汗液、唾液、生殖系统的分泌物等。miRNA 是一种具有 20-25 个单核核苷酸的微小 RNA 结构，其特性使得与miRNA 相比它们更不容易发生降解过程。不易降解对于法医鉴定是非常重要的特征，因为在犯罪现场，生物学证据可能暴露于各种不利的环境因素中。最近，已发表的研究能够识别一些特定的 miRNA（如图 4.1 所示）。葡萄牙 Portuguese Inst Oncol 的Medeiros, R 等[21]人于 2015 年收集所有迄今为止的信息，并评估了具有潜在破坏miRNA 分析的许多因素，例如：方法学方法，环境因素，生理条件，性别，病理和样品储存条件等。

图 4.2 唾液识别的逐步策略[27]葡萄牙 Medeiros, R 等[28]人于 2015 年在《LIFE SCI》发表其收集有关血浆和血 miRNA 的来源的信息（如图 4.3 所示），以及评估其作为外周血的生物标志物潜
【学位授予单位】：中国人民公安大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：D919.4

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本文编号：2662726