3.5GyΧ射线对小鼠间充质干细胞的损伤及其机制的研究

发布时间：2021-01-20 07:34

　　【目的】探讨小鼠间充质干细胞在中剂量Χ射线照射后的损伤情况、相应机制以及Wnt信号通路在放射后衰老细胞中的表达。【方法】小鼠间充质干细胞C3H10T1/2行3.5GyΧ射线照射,于照射后各时间点行Hoechst33258染色和Annexin V/FITC染色检测细胞凋亡,流式测细胞周期,行SA-β-gal染色检测细胞衰老。采用Realtime PCR技术检测Fas及其配体FasL,p53及其下游组分p21^WAF1基因的表达,免疫荧光法检测细胞Fas蛋白的表达。Realtime PCR技术检测衰老细胞中经典Wnt信号通路中Wnt3a,非经典Wnt信号通路中Wnt5a及与Wnt信号存在串话的shh信号表达。【结果】Hoechst33258染色和Annexin V/FITC染色显示细胞在照射后3h开始出现凋亡,至12h达高峰,此后凋亡率逐渐下降。Fas、FasL mRNA在照射后3h开始增高,12h达到高峰,照射后一周恢复正常。同样,免疫荧光染色显示照射后Fas蛋白表达增加,于照射后6h荧光强度开始增加,至12h呈强阳性反应,至24h基本恢复正常。放射后72hSA-β-... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

哺乳动物中两种类型细胞衰老

小鼠和人类细胞中参与细胞衰老的信号通路

图 3 .经典 Wnt 信号通路参与细胞衰老过程Wnt 家族是一类分泌型糖蛋白，在胚胎发育的多个阶段起重要作用。许多研究表明 Wnt 信号通路对干细胞的自我更新和扩增具有重要的支持作用 。Wnt 信号通路包括经典 Wnt 信号通路和非经典 Wnt 信号通路。目前为止，在哺乳动物至少有 19 种 Wnt蛋白，其中 Wnt1、2、3、3a、8、8b 属经典 Wnts，Wnt5、5a、5b、6、7a、11 属非经典 Wnts。在间充质干细胞表达多个 Wnt 配体如 Wnt2、4、5a、11、16 等。经典 Wnt信号主要促进间充质干细胞增殖和保持其处于未分化状态，而非经典 Wnt 通路则在调节和促进 MSC 向成骨和成软骨等多向分化方面发挥重要作用,可与经典 Wnt 通路相互竞争抑制【12】。以往许多研究表明 Wnt 信号的激活可延缓细胞衰老，对某些衰老相关的疾病如老年痴呆症、糖尿病、早衰综合症、肿瘤和骨质疏松病等的研究也表明，激活的 Wnt 通路可减缓细胞的衰老。但是，近年来许多研究显示 Wnt 信号的持续活化会导致干细胞的衰老。LIU 等【13】通过对 Klotho 衰老小鼠模型研究发现：Wnt 通路的持

【参考文献】：
期刊论文
[1]放射损伤对小鼠骨髓间充质干细胞成骨潜能及造血干细胞龛位的影响[J]. 马杰,史明霞,李炳宗,李静,房佰俊,孙慧,赵春华.  西安交通大学学报(医学版). 2009(03)
[2]辐射导致小鼠骨髓基质细胞衰老的机制研究[J]. 张可杰,朱艳,孙汉英,黄丽芳,付劲蓉,刘文励.  中华医学杂志. 2006(48)
[3]造血干细胞联合骨髓间充质干细胞移植实验效果观察[J]. 汪萍,呼莹,姜学英,马冠杰,宋永平,赵春华.  郑州大学学报(医学版). 2006(05)



本文编号：2988653