高能电子射线对L929成纤维细胞的影响以及PQQ（吡咯并喹啉醌）对大鼠皮肤急性放射性烧伤的治疗作用的初步研究

发布时间：2021-01-29 17:58

　　目的:高能电子射线模拟β射线照射L929成纤维细胞和大鼠皮肤后,观察细胞生长增殖和细胞凋亡,探讨β放射损伤的细胞机制;应用PQQ,观察其对大鼠皮肤急性放射性烧伤的治疗作用。方法:①以10Gy照射剂量的高能电子射线模拟β射线照射L929细胞,采用MTT实验观察辐照后细胞的生长曲线,细胞同步化后,应用流式细胞术观察辐照后细胞在不同时间点（4h、8h、12h、24h、36h、48h）的细胞周期分布和细胞凋亡率,应用半定量PCR（RT-PCR）、琼脂糖凝胶电泳进行凋亡指标（Caspase-3）的检测。②45Gy剂量照射SD大鼠臀部皮肤后,分别以喷射、口服给药途径使用新型维生素PQQ,使用剂量分别是300mmol/L、2mg/kg体重,应用氧自由基测试盒检测SOD、MDA、NOS,辐照野皮肤整体照相,HE染色观察炎症发展、表皮细胞、真皮层内成纤维母细胞和毛囊上皮细胞及胶原纤维的损伤变化。结果:①受照后L929细胞生长曲线呈倒“Z”状,在24h时辐照组细胞MTTA570值出现明显的下降,之后缓慢上升于第3天进入指数增长期,於第4天达到最高点,但与正常细胞生长曲线有一定差距,之后出现下降趋势。受照细... 

【文章来源】：苏州大学江苏省

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

10Gyβ射线照射L929细胞后4h、24h细胞直方图

11图 4 10Gyβ 射线照射 L929 细胞 Caspase-3 的 RT-PCR 结果3.4 细胞周期分析表 1 中可见，辐射后细胞发生 G2 期阻滞。辐照后，随着时间的增加，细胞周期分布改变：G2/M 期细胞的比例不断增加，至 24h 时，G2/M 期细胞达到最高峰，占 65.965%；同时，处于 S 期的细胞数不断降低,至 24h 时，S 期细胞达到最低，占 12.451%(图 2)；G0/G1 期比例变化不显著，基本呈下降趋势，各时间点均低于正常细胞水平。

辐照未给药组 PQQ 喷射治疗组PQQ 口服治疗组图4 辐照未给药组、PQQ喷射治疗组、PQQ口服治疗组SD大鼠辐照野皮肤整体照相2.5 HE 染色辐照未加药组第一周，表皮水肿，轻微坏死，未见炎症反应，胶原纤维断裂；辐照未加药组第三周，部分毛囊上皮破坏，大部分表皮细胞变性坏死，棘细胞、纤维母细胞肿胀，胶原纤维断裂明显,表皮下胶原纤维坏死，炎症反应严重；辐照未加药组第五周，毛囊上皮细胞严重破坏，表皮细胞几乎完全坏死，脱落形成皮肤溃疡，棘细胞、纤维母细胞肿胀，空泡变性

【参考文献】：
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本文编号：3007332