hUC-MSCs-CM和3-MA对辐射后小胶质细胞自噬和凋亡的影响

发布时间：2021-04-27 19:22

　　目的研究人脐带间充质干细胞条件培养基（human umbilical cord mesenchymal stem cells conditioned medium,hUC-MSCs-CM）和自噬抑制剂3-MA对接受10Gy辐射后小胶质细胞自噬和凋亡以及炎症反应的影响,为放射性脑损伤的防治提供新思路。方法1采用酶消化法分离培养hUC-MSCs,倒置显微镜下观察细胞形态,流式细胞仪鉴定细胞表型。选取对数期生长良好的第3～4代hUC-MSCs用无血清的IMEM培养基培养48h,收集上清制备hUC-MSCs-CM备用。2采用6MV-XRay直线加速器10Gy照射BV2小胶质细胞建立辐射细胞模型,hUC-MSCs-CM和3-MA进行干预。3实验共分5组:A空白对照组（Control组）;B单纯接受10Gy电离辐射组（RT组）;C 10Gy+hUC-MSCs-CM共刺激组（MSCs组）;D10Gy+3-MA共刺激组（3-MA组）;E 10Gy+3-MA+hUC-MSCs-CM共刺激组（MSCs+3-MA组）。4 CCK-8法检测各实验组BV2小胶质细胞增殖情况;采用Annexin V/PI双染色法... 

【文章来源】：华北理工大学河北省

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
引言
第1章 实验研究
    1.1 材料与方法
        1.1.1 实验材料
        1.1.2 实验试剂
        1.1.3 主要仪器设备型号及产地
        1.1.4 细胞培养耗材
        1.1.5 缓冲试剂的配置方
        1.1.6 实验分组及处理
        1.1.7 实验方法
        1.1.8 统计学分析
    1.2 实验结果
        1.2.1 h UC-MSCs的形态特征
        1.2.2 h U-MSCs表面抗原表达的流式鉴定
        1.2.3 辐射与3-MA对BV2细胞增殖的影响
        1.2.4 MSCs-CM和3-MA对辐射BV2 细胞增殖的影响
        1.2.5 MSCs-CM和3-MA对辐射BV2 细胞凋亡的影响
        1.2.6 各组BV2 细胞TUNEL染色的比较
        1.2.7 各组BV2 细胞Cleavedcaspase-3 蛋白的表达
        1.2.8 MSCs-CM和3-MA对辐射BV2 细胞Beclin1的m RNA和蛋白表达的影响
        1.2.9 MSCs-CM和3-MA对辐射BV2 细胞LC3 蛋白表达的影响
        1.2.10 MSCs-CM和3-MA对辐射BV2 细胞TNF-α、IL-1β分泌水平的影响
    1.3 讨论
    1.4 结论
参考文献
结论
第2章 综述 放射性损伤和认知障碍研究进展
    2.1 脑放射治疗对认知功能的影响
    2.2 放射性认知障碍的发病机制
        2.2.1 颅脑照射对神经干细胞、神经发生以及神经可塑性的影响
        2.2.2 颅脑照射诱发氧化应激与线粒体功能障碍
        2.2.3 颅脑照射诱发炎症反应
    2.3 结论和展望
    参考文献
致谢
在学期间研究成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]脐带间充质干细胞对小胶质细胞增殖及活化的影响[J]. 王娜,陈乃耀.  山东大学学报(医学版). 2016(10)



本文编号：3164023