肌腱细胞微环境对大鼠骨髓间充质干细胞增殖和腱/韧带相关基因表达影响的实验研究

发布时间：2021-05-18 02:48

　　腱/韧带是坚韧的结缔组织,它们通过其结构、力学性质和外形的变化以响应外力的刺激,在运动中起着重要作用,但活动范围超过极限或拉扯过剧,腱/韧带常常会受到损伤甚至断裂,严重影响人们的健康。腱/韧带损伤的治疗目前仍然是整形外科中具有挑战性的问题,比如如何加快治疗速度、提高治疗质量直至完全治愈等等,都是临床上亟待解决的难题。骨髓间充质干细胞（Mesenchymal stem cells, MSCs）是一类具有增殖和多向分化潜能的特殊细胞。在特定条件下,MSCs在体外可增殖并分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞和肌肉细胞等。这种增殖能力和分化可塑性为临床上腱/韧带损伤组织的修复带来了希望,使腱/韧带创伤的治疗甚至组织工程化成为可能。MSCs的自我更新和分化行为高度依赖于其所处的特殊局部微环境。已有研究证明各种理化因素刺激或特殊细胞微环境对MSCs的增殖、分化等生物学行为起着重要的调节作用,但MSCs在腱/韧带细胞微环境下的增殖、分化行为特征及其相关规律人们还不清楚,有关这方面的研究不仅具有重要的理论意义,而且具有潜在的应用价值。为此,本实验采用Transwell system建立大鼠MSCs与大鼠... 

【文章来源】：重庆大学重庆市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
1 绪论
    1.1 问题的提出
    1.2 国内外研究的现状
        1.2.1 肌腱的损伤与修复
        1.2.2 微环境对MSCs 增殖和分化的影响
    1.3 本文研究的目的、意义以及主要内容
        1.3.1 本文研究目的及意义
        1.3.2 本文研究的主要内容
2 细胞的分离培养
    2.1 引言
    2.2 实验材料
        2.2.1 实验动物
        2.2.2 主要仪器设备
        2.2.3 主要实验试剂
        2.2.4 主要实验试剂的配制
    2.3 实验方法
        2.3.1 MSCs 的分离培养
        2.3.2 MSCs 的鉴定
        2.3.3 大鼠肌腱细胞分离培养
    2.4 实验结果
        2.4.1 MSCs 的形态学观察
        2.4.2 MSCs 表面相关抗原的表达
        2.4.3 MSCs 细胞周期测定
        2.4.4 大鼠肌腱细胞的形态学观察
    2.5 分析讨论
        2.5.1 MSCs 的分离培养
        2.5.2 MSCs 的鉴定
        2.5.3 肌腱成纤维细胞的分离培养
    2.6 本章小结
3 肌腱细胞微环境对MSCS 增殖的影响
    3.1 引言
    3.2 实验材料和方法
        3.2.1 实验材料
        3.2.2 实验方法
    3.3 实验结果
        3.3.1 MSCs 的生长曲线
        3.3.2 肌腱细胞微环境下MSCs 的生长、形态
        3.3.3 肌腱细胞微环境对MSCs 增殖的影响
    3.4 分析讨论
        3.4.1 体外培养MSCs 的生长特点
        3.4.2 MSCs 在肌腱细胞微环境下生长、增殖的变化
        3.4.3 肌腱细胞微环境对c-fos 基因表达变化的影响
    3.5 本章小结
4 肌腱细胞微环境对MSCS 腱/韧带相关基因表达的影响
    4.1 引言
    4.2 实验材料和方法
        4.2.1 实验材料
        4.2.2 实验方法
    4.3 实验结果
        4.3.1 MSCs 在肌腱细胞微环境下表型的变化
        4.3.2 MSCs 腱/韧带相关基因表达的变化
        4.3.3 大鼠肌腱细胞腱/韧带相关基因的表达
    4.4 分析讨论
        4.4.1 肌腱细胞微环境对MSCs 分化的诱导
        4.4.2 肌腱成纤维细胞相关基因的表达
    4.5 本章小结
5 结论与展望
    5.1 主要结论
    5.2 后续研究工作展望
致谢
参考文献
附录


【参考文献】：
期刊论文
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[8]皮肤成纤维细胞构建组织工程化肌腱的初步研究[J]. 陈兵,丁小邦,刘方军,崔磊,刘伟,商庆新,曹谊林.  中华医学杂志. 2002(16)
[9]骨髓间充质干细胞的分离与培养[J]. 艾国平,粟永萍,闫国和,冉新泽,刘晓宏,罗成基,程天民.  第三军医大学学报. 2001(05)
[10]人骨髓间充质干细胞分离与培养方法的建立[J]. 刘晓丹,郭子宽,李秀森,张双喜,毛宁.  军事医学科学院院刊. 2000(04)



本文编号：3192964