抗人共刺激分子B7-2单克隆抗体的免疫放射分析试剂盒的研制及应用研究

发布时间：2021-05-20 08:25

　　目的建立稳定的单克隆抗体6C8的125I标记方法;固相抗体6A5包被试管法;人血清中可溶性B7-2分子的免疫放射检测方法学的建立并初步探讨其临床意义。方法应用氯胺T法125I标记单克隆抗体6C8及标记抗体的纯化;纸层析法检测标记率和放化纯;活化管技术;采用物理吸附法和多聚赖氨酸活化管化学连接方法对单克隆抗体在聚苯乙烯试管上的固定方法进行了研究;用标准原来检测标记抗体和包被抗体的活性;加入不同的血清体积和0.1%吐温80、反应不同的时间摸索最佳反应条件;双抗体法分离技术;建立可溶性B7-2分子的免疫放射分析法。结果经过反复的实验分析,建立了标记抗体6C8的最佳实验条件:Na125I 7.4MBq、氯胺-T 20μg、抗体6C8 6μg、Na2S2O5100μg、反应时间30秒、总体积为200～300μl;最佳固相包被条件:聚苯乙烯试管经γ射线照射12h后,用0.2mol/L PH 7.4磷酸盐缓冲液400μl稀释抗体,选择抗体6A5的浓度为5mg/L,4℃冰箱中放置24小时,吸出抗体溶液,0.2mol/L PH 7.4磷酸盐缓冲液洗5次。加入500μl/管的3%的BSA封闭液,封闭时间选... 

【文章来源】：苏州大学江苏省

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文提要
Abstract
研究背景
第一部分 建立稳定的单克隆抗体 6C8 的 ~(125)I 标记方法
    1 材料与方法
    2 结果
    3 讨论
    参考文献
第二部分 固相抗体6A5 包被试管法及人血清中可溶性 B7-2 分子的免疫放射检测方法学的建立及其临床意义
    1 材料与方法
    2 结果
    3 方法学的研究
    4 讨论
    5 应用
    参考文献
综述
硕士学习期间已发表及待发表的论文
英文缩写
致谢



本文编号：3197441