从木质纤维素载体中释放提取生物样本DNA的研究
发布时间：2021-06-16 18:59
随着现代科技的不断进步,DNA技术越来越受到重视。作为能够识别锁定嫌疑人的有力工具,DNA检验技术在刑事案件检验中得到广泛应用在重大疑难案件中发挥了重要作用。陈旧生物样本检验是目前DNA检验技术中需解决的难题,在实际工作中我们发现,陈旧生物样本物证经常出现检验位点检出不全,甚至无法得到有效分型的现象。致使一些重大疑难命案积案使破受到影响陈旧生物样本物证因为生物样本浸润到木质纤维素载体里时问较长,不可避免地受外在条件环境中的光、空气、水分等的影响[1],现有的生物样本处理和DNA提取方法都对于镶嵌在紧密载体内部的生物样本和木质纤维素载体交联的生物样本处理不足,生物样本无法充分释放,对于保存时间长、蛋白变性程度严重,以及与载体交联严重的生物样本的DNA提取都不理想,有时甚至无法获得有效DNA,因而浪费了宝贵的生物样本和现场检材,影响了案件侦破和关键证据的取得。为了从陈年的含有生物样本的木质纤维素类物证检材中提取出DNA生物样本证据并进行检验,本研究利用高温老化的方法对物证进行老化模拟实验,由于在法医学中,木质纤维素物证检材主要分为纸类和棉布类,所以本研究分别针对两类进...
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
木质纤维素的结构示意图
即纤维素酶蛋白含量为 1.87 mg/ml，1 ml 标准体系解棉布释放还原糖的量最大为 1.63 mg/ml，为最佳纤维素酶复配表 2.6 针对纸类木质纤维素的纤维素酶用量研究结果表号 1 2 3 4 5 6 7 8 蛋白含量g）0.37 0.75 1.12 1.50 1.87 2.24 2.62 2.99 释放量/ml）0.03 0.27 0.50 0.87 1.63 1.18 0.86 0.68 酶最佳反应时间研究S 法测还原糖含量所得 OD540，即为对应纤维素酶用量降解采集应时间水解采集卡的还原糖释放量如图 2.1 所示，由此可得反应素酶释放还原糖的量在 30 min 时最大为 1.672 mg/ml，在之后的平缓甚至缓慢下降，即选用 30 min 作为复配酶反应的时间。
图 2.2 束斑直径为 50 μm 时的烘干 20 小时的血液采集卡组的电镜照片如图图 2.3 所示，束斑直径为 50 μm 时的烘干 7 天的血液采集卡组的电镜照片，图 2中左侧 c 图为对照组未经复配酶处理的烘干 7 天的血液采集卡的电镜照片，右侧 d 图为实验组经复配酶处理的烘干 7 天的血液采集卡的电镜照片。在图 c 中，首先因为血液采集卡的纤维经过了 7 天的老化实验处理，采集卡的纤维与图 2.2 中 a 小图有明显的差别，虽然未经复配酶处理表面就已不太平滑,但整体仍为圆柱状，有较为浅浅的小沟壑；在图 d 中纤维表面极其不平整，非常不平滑，出现了极其明显的沟壑，甚至中间有很长很深的沟壑表明复配酶对血液采集卡的纤维更为明显的降解作用。
【参考文献】：
期刊论文
[1]磁珠DNA自动提取系统在法医检验中的应用研究[J]. 刘桂涛,徐兴驰. 法制博览. 2019(04)
[2]不同保存时间对于血液DNA提取质量的影响[J]. 孙婷,纳莉,丁璐,周瑜,卢震辉,杜勇. 中国继续医学教育. 2019(03)
[3]卵泡液中游离线粒体DNA提取和定量方法的研究[J]. 刘宇,赵雪,邹敏,邵淑敏,李娇,张衷源,汪文诤,张玲. 生殖医学杂志. 2018(11)
[4]国产和进口磁珠提取试剂盒提取微量DNA的对比分析[J]. 李丽芬,林超奇,李小丹. 海峡科学. 2018(11)
[5]5种试剂盒对血浆游离DNA提取效果的比较[J]. 李雪莲,齐谢敏,邹秉杰,黄青,宋沁馨,周国华. 中国现代应用药学. 2018(08)
[6]一种磁珠提取结合实时荧光定量核酸扩增定量检测重组人血白蛋白中毕赤酵母DNA残留方法的建立[J]. 王敏力,马秋平,侯继锋. 中国药学杂志. 2018(10)
[7]全自动核酸提取仪与手动提取组织DNA的效率比较[J]. 林丹义,张科平,许洁,颜黎栩,骆新兰,刘艳辉. 临床与实验病理学杂志. 2017(12)
[8]“动物组织中DNA的分离提取及含量测定”实验教学改革[J]. 赵玉红,李欣,李小菊,周浩,李登文,石建党,张金红,赵立青. 实验技术与管理. 2017(11)
[9]应用M48磁珠试剂盒提取牙齿DNA[J]. 程冲,陈启鸣. 海峡科学. 2017(11)
[10]利用显微搜索衣物上血迹进行DNA检验1例[J]. 张瑾,张颖,刘开会,温帅媛,白艳平,陶克明. 中国法医学杂志. 2015(05)
博士论文
[1]不同预处理工艺对稻壳纤维素酶酶解效果的影响[D]. 余君.华中农业大学 2008
硕士论文
[1]天然纤维素超微结构层次及不同内切纤维素酶降解特异性的研究[D]. 陈玉.山东大学 2017
本文编号：3233611
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
木质纤维素的结构示意图
即纤维素酶蛋白含量为 1.87 mg/ml，1 ml 标准体系解棉布释放还原糖的量最大为 1.63 mg/ml，为最佳纤维素酶复配表 2.6 针对纸类木质纤维素的纤维素酶用量研究结果表号 1 2 3 4 5 6 7 8 蛋白含量g）0.37 0.75 1.12 1.50 1.87 2.24 2.62 2.99 释放量/ml）0.03 0.27 0.50 0.87 1.63 1.18 0.86 0.68 酶最佳反应时间研究S 法测还原糖含量所得 OD540，即为对应纤维素酶用量降解采集应时间水解采集卡的还原糖释放量如图 2.1 所示，由此可得反应素酶释放还原糖的量在 30 min 时最大为 1.672 mg/ml，在之后的平缓甚至缓慢下降，即选用 30 min 作为复配酶反应的时间。
图 2.2 束斑直径为 50 μm 时的烘干 20 小时的血液采集卡组的电镜照片如图图 2.3 所示，束斑直径为 50 μm 时的烘干 7 天的血液采集卡组的电镜照片，图 2中左侧 c 图为对照组未经复配酶处理的烘干 7 天的血液采集卡的电镜照片，右侧 d 图为实验组经复配酶处理的烘干 7 天的血液采集卡的电镜照片。在图 c 中，首先因为血液采集卡的纤维经过了 7 天的老化实验处理，采集卡的纤维与图 2.2 中 a 小图有明显的差别，虽然未经复配酶处理表面就已不太平滑,但整体仍为圆柱状，有较为浅浅的小沟壑；在图 d 中纤维表面极其不平整，非常不平滑，出现了极其明显的沟壑，甚至中间有很长很深的沟壑表明复配酶对血液采集卡的纤维更为明显的降解作用。
【参考文献】：
期刊论文
[1]磁珠DNA自动提取系统在法医检验中的应用研究[J]. 刘桂涛,徐兴驰. 法制博览. 2019(04)
[2]不同保存时间对于血液DNA提取质量的影响[J]. 孙婷,纳莉,丁璐,周瑜,卢震辉,杜勇. 中国继续医学教育. 2019(03)
[3]卵泡液中游离线粒体DNA提取和定量方法的研究[J]. 刘宇,赵雪,邹敏,邵淑敏,李娇,张衷源,汪文诤,张玲. 生殖医学杂志. 2018(11)
[4]国产和进口磁珠提取试剂盒提取微量DNA的对比分析[J]. 李丽芬,林超奇,李小丹. 海峡科学. 2018(11)
[5]5种试剂盒对血浆游离DNA提取效果的比较[J]. 李雪莲,齐谢敏,邹秉杰,黄青,宋沁馨,周国华. 中国现代应用药学. 2018(08)
[6]一种磁珠提取结合实时荧光定量核酸扩增定量检测重组人血白蛋白中毕赤酵母DNA残留方法的建立[J]. 王敏力,马秋平,侯继锋. 中国药学杂志. 2018(10)
[7]全自动核酸提取仪与手动提取组织DNA的效率比较[J]. 林丹义,张科平,许洁,颜黎栩,骆新兰,刘艳辉. 临床与实验病理学杂志. 2017(12)
[8]“动物组织中DNA的分离提取及含量测定”实验教学改革[J]. 赵玉红,李欣,李小菊,周浩,李登文,石建党,张金红,赵立青. 实验技术与管理. 2017(11)
[9]应用M48磁珠试剂盒提取牙齿DNA[J]. 程冲,陈启鸣. 海峡科学. 2017(11)
[10]利用显微搜索衣物上血迹进行DNA检验1例[J]. 张瑾,张颖,刘开会,温帅媛,白艳平,陶克明. 中国法医学杂志. 2015(05)
博士论文
[1]不同预处理工艺对稻壳纤维素酶酶解效果的影响[D]. 余君.华中农业大学 2008
硕士论文
[1]天然纤维素超微结构层次及不同内切纤维素酶降解特异性的研究[D]. 陈玉.山东大学 2017
本文编号：3233611
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