放射性肺损伤早期的肺组织重建机制研究

发布时间：2021-07-30 03:09

　　目的：用分子生物学和细胞生物学方法，从细胞水平和分子水平深入研究肺纤维化的发生机制，研究肺泡巨噬细胞、成纤维细胞、Ⅳ型胶原和明胶酶B在放射性肺损伤中的关系，进而阐明肺组织重建的机理及其与肺纤维化发生之间的联系。 方法：用一定剂量的⁶⁰Coγ射线照射C57小鼠和Wistar大鼠。将C57小鼠分为2组：照射组（n=9）和对照组（n=9）。分别于照后1、2、4w活杀取其肺组织提取总RNA。将Wistar大鼠分为对照组和照射后7d组，用0.9％的生理盐水灌洗肺脏，用差速贴壁法分离肺泡巨噬细胞，并用台盼蓝排斥试验鉴定其存活率＞95％，然后用分离好的巨噬细胞制备肺泡巨噬细胞条件培养液（Condition Medium of Alveolar Macrophage，CMAM），用于下一步试验。MTT法检测CMAM对人肺成纤维细胞（Human Lung Fibroblast，HLF）的促增殖作用，于不同的条件培养液培养HLF 6h、12h、24h、48h、72h后检测HLF的增殖情况。用CMAM大量培养HLF，于培养后的不同时间点提取总蛋白，分别用Western Blot和... 

【文章来源】：延边大学吉林省 211工程院校

【文章页数】：42 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
Sheet for Abbreviation
Chinese Abstract
Abstract
1. Intruduction
2. Material and Methods
    2.1 Animals
    2.2 Isolation and Culture of Rat Alveolar Macrophages (AM)
    2.3 Preparation of Conditional Medium of Alveolar Macrophage
    2.4 Human Lung Fibroblasts (HLF) Culture
    2.5 Cell Proliferation Assay
    2.6 Western Blot Determineation
    2.7 Analysis of MMP-9 by Zymography
    2.8 RNA Extraction and RT-PCR
    2.9 Statistics Analysis
3. Results
    3.1 Effect of CMAM on HLF Proliferation
    3.2 Effect of CMAM on Synthesis of Collagen Ⅳ in HLF
    3.3 Effect of CMAM on Collagen Ⅵ Excreting and MMP-9 Synthesis by HLF
    3.4 Expression of Collagen Ⅳ MMP-9 and TIMP-1 Genes in Mice after Irradiation by ~(60)Co-γ Ray
4. Discussion
5. Concluding Remarks
6. Legends for Figures
7. Acknowledgements
8. References
9. Reviews
10. References



本文编号：3310565