同种异体UCMSC移植治疗树鼩急性放射损伤的疗效及机制研究

发布时间：2021-08-10 00:16

　　一、研究背景间充质干细胞（Mesenchymal stem cell,MSC）可以从多种组织器官分离得到,包括骨髓、皮肤、血管、脂肪甚至是多能间质干细胞异质群体。MSC在高强度的电离辐照下仍能保持其干细胞特性。MSC已被广泛用来治疗放射性缺血或机械性损伤的动物模型,临床上也开始运用MSC对放射引起的软组织病变和意外暴露辐射进行治疗。动物研究和早期临床试验表明MSC主要通过分化为功能性实质细胞和为其他细胞生存提供有利微环境在组织再生中起作用^[1-3]。目前大部分研究主要集中在骨髓间充质干细胞（Bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC）,但是BMSC的增殖分化潜能随年龄增大而下降,而且BMSC自体移植依赖患者自身的状态,导致应用受限。UCMSC（Umbilical cord mesenchymal stem cell,UCMSC）来源充足,伦理争议较少,无免疫排斥问题,可以大规模生产,是细胞移植的理想种子。二、研究目的1.建立急性放射损伤树鼩模型。2.评价和分析同种异体UCMSC移植治疗急性放射损伤树鼩模型的疗效与机制。三、研究方法... 

【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

树鼩照射设备及装置

图 1 树鼩 UCMSC 分离培养A:剪碎的脐带组织；B:P3 代贴壁生长的 UCMSC（100×）；C: P3 代 UCMSC 生长3.2 树鼩 UCMSC 的鉴定流式结果显示树鼩 UCMSC 表面标记 CD105、CD90、CD34、CD31 阳为：98.7%、96.3%、0.185%、0.043%,说明树鼩 UCMSC 是一群具有特征标细胞(图 2A)。树鼩 UCMSC 体外成骨诱导后用茜素红染色，可见大量橘红色钙结节；树鼩UCMSC体外成脂诱导后用油红O染色，可见明显红染颗粒；树鼩体外成软骨诱导后经阿利新蓝染色，鉴定有软骨基质蛋白多糖生成（图 2B）光定量 PCR 检测结果提示（图 2C）诱导分化后的 UCMSC 成骨基因（Runx2OCN），成脂基因（LPL、PPARγ2），成软骨基因（Sox6 、Col2a1）的 mR明显高于对照组，对照组为同代未诱导的树鼩 UCMSC。

图 1 树鼩 UCMSC 分离培养A:剪碎的脐带组织；B:P3 代贴壁生长的 UCMSC（100×）；C: P3 代 UCMSC 生长曲线3.2 树鼩 UCMSC 的鉴定流式结果显示树鼩 UCMSC 表面标记 CD105、CD90、CD34、CD31 阳性率分别为：98.7%、96.3%、0.185%、0.043%,说明树鼩 UCMSC 是一群具有特征标志的均一细胞(图 2A)。树鼩 UCMSC 体外成骨诱导后用茜素红染色，可见大量橘红色的钙盐和钙结节；树鼩UCMSC体外成脂诱导后用油红O染色，可见明显红染颗粒；树鼩UCMSC体外成软骨诱导后经阿利新蓝染色，鉴定有软骨基质蛋白多糖生成（图 2B）。实时荧光定量 PCR 检测结果提示（图 2C）诱导分化后的 UCMSC 成骨基因（Runx2、ALPI、OCN），成脂基因（LPL、PPARγ2），成软骨基因（Sox6 、Col2a1）的 mRNA 表达明显高于对照组，对照组为同代未诱导的树鼩 UCMSC。


本文编号：3333060