应用短扩增子ASPCR技术对FFPET进行SNP基因分型的研究
发布时间:2021-09-02 17:58
前言福尔马林固定石蜡包埋组织(Formalin Fixed and Paraffin Embedded Tissues,FFPET)是病理学、法医病理学等学科进行疾病诊断和科学研究的常用检材,多被长时期的保存而成为一种重要的个人实物档案,为解决涉嫌保险欺诈、医疗纠纷、财产继承等民事或刑事案件提供了一种极为重要的、可靠的法医物证检材。基于CODIS系统13个STR位点的Plus和Cofiler等试剂盒,虽已广泛应用于血液、唾液、上皮组织、发根及骨组织的基因分型,但是对FFPET进行基因分型时,常因组织固定过程中各种理化因素的影响致使DNA高度降解,从而难以获得稳定、可靠的分型结果。研究表明,福尔马林固定时间、切片厚度以及不同的脱蜡方法均可影响FFPET提取DNA的质量,从而影响其基因分型。通过优化蛋白酶消化条件,精简DNA提取步骤和纯化DNA模板虽能提高DNA纯度和减少DNA额外损伤,但并不能给FFPET的基因分型带来本质的改观;通过增加循环次数或采用巢式PCR等对PCR方法进行调整与改良,可以提高扩增产物量或扩增特异性,但并未明显改善其检出率。因此,越来越多的学者将研究的重点转移到如何...
【文章来源】:中国医科大学辽宁省
【文章页数】:42 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
FFPET提取DNA的AGE图谱
3T3AA,一T八乙M1T1A图2, rs1454361基因座扩增产物PAGE图谱T、A表示 rs1354361基因座两等位基因;l、2、3为样品号,其基因型分别为:AA,TT,TA;M为MarkerA, 1t.B图3, rs1454361基因座扩增产物测序结果A图为F瓜,(T)引物对PcR扩增产物的测序图B图为F/RZ(A)引物对PCR扩增产物的测序图(二)群体分布调查应用短扩增子ASPCR技术调查rs1454361基因座在中国辽宁地区汉族人群(152例)中多态性分布的结果:TT型为40例(26.32%)
1t.B图3, rs1454361基因座扩增产物测序结果A图为F瓜,(T)引物对PcR扩增产物的测序图B图为F/RZ(A)引物对PCR扩增产物的测序图(二)群体分布调查应用短扩增子ASPCR技术调查rs1454361基因座在中国辽宁地区汉族人群(152例)中多态性分布的结果:TT型为40例(26.32%),TA型为71例(46.71%),从.16.
【参考文献】:
期刊论文
[1]福尔马林固定石蜡包埋组织中DNA提取[J]. 谭卓毅,丁梅,王保捷. 法医学杂志. 2006(06)
[2]降解生物检材遗传标记检测的研究进展[J]. 何柏芳,楼迪栋. 法医学杂志. 2006(02)
[3]不同温度下离体人脾细胞DNA降解的差异性研究[J]. 何方刚,刘亚玲,舒细记,任亮,朱方成,王琦玮,王树发,黄知军,刘良. 中国法医学杂志. 2005(06)
[4]降解检材STR分型Ladder-Like条带形成原因的探讨[J]. 楼迪栋,余纯应,黄代新,赵贵森,任文,杨庆恩. 中国法医学杂志. 2005(06)
[5]普通甲醛固定石蜡包埋组织DNA提取方法的探讨[J]. 田子强,刘俊峰,张少为,李保庆,王福顺,张月峰. 癌症. 2004(03)
[6]Triton X-100快速提取甲醛固定、石蜡包埋组织内DNA的方法[J]. 贾怡,周斌,吕梅励,梁伟波,胡羽,张林. 刑事技术. 2003(06)
[7]石蜡包埋人体组织DNA分型的研究[J]. 周毅,严红,李万水,张大安,李俊涛. 刑事技术. 2003(04)
[8]提高石蜡包埋组织中提取DNA质量的实验研究[J]. 盖宝东,房学东,金仲田,张德恒,郑泽霖. 吉林大学学报(医学版). 2003(01)
[9]福尔马林固定石蜡包埋组织的PCR-STR分型[J]. 王剑,顾明波,杜庆新,李晓平,陈弄潮. 中国法医学杂志. 2002(03)
[10]两种提取石蜡包埋组织DNA方法的比较[J]. 张金生,刘鸿瑞. 诊断病理学杂志. 2000(02)
本文编号:3379466
【文章来源】:中国医科大学辽宁省
【文章页数】:42 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
FFPET提取DNA的AGE图谱
3T3AA,一T八乙M1T1A图2, rs1454361基因座扩增产物PAGE图谱T、A表示 rs1354361基因座两等位基因;l、2、3为样品号,其基因型分别为:AA,TT,TA;M为MarkerA, 1t.B图3, rs1454361基因座扩增产物测序结果A图为F瓜,(T)引物对PcR扩增产物的测序图B图为F/RZ(A)引物对PCR扩增产物的测序图(二)群体分布调查应用短扩增子ASPCR技术调查rs1454361基因座在中国辽宁地区汉族人群(152例)中多态性分布的结果:TT型为40例(26.32%)
1t.B图3, rs1454361基因座扩增产物测序结果A图为F瓜,(T)引物对PcR扩增产物的测序图B图为F/RZ(A)引物对PCR扩增产物的测序图(二)群体分布调查应用短扩增子ASPCR技术调查rs1454361基因座在中国辽宁地区汉族人群(152例)中多态性分布的结果:TT型为40例(26.32%),TA型为71例(46.71%),从.16.
【参考文献】:
期刊论文
[1]福尔马林固定石蜡包埋组织中DNA提取[J]. 谭卓毅,丁梅,王保捷. 法医学杂志. 2006(06)
[2]降解生物检材遗传标记检测的研究进展[J]. 何柏芳,楼迪栋. 法医学杂志. 2006(02)
[3]不同温度下离体人脾细胞DNA降解的差异性研究[J]. 何方刚,刘亚玲,舒细记,任亮,朱方成,王琦玮,王树发,黄知军,刘良. 中国法医学杂志. 2005(06)
[4]降解检材STR分型Ladder-Like条带形成原因的探讨[J]. 楼迪栋,余纯应,黄代新,赵贵森,任文,杨庆恩. 中国法医学杂志. 2005(06)
[5]普通甲醛固定石蜡包埋组织DNA提取方法的探讨[J]. 田子强,刘俊峰,张少为,李保庆,王福顺,张月峰. 癌症. 2004(03)
[6]Triton X-100快速提取甲醛固定、石蜡包埋组织内DNA的方法[J]. 贾怡,周斌,吕梅励,梁伟波,胡羽,张林. 刑事技术. 2003(06)
[7]石蜡包埋人体组织DNA分型的研究[J]. 周毅,严红,李万水,张大安,李俊涛. 刑事技术. 2003(04)
[8]提高石蜡包埋组织中提取DNA质量的实验研究[J]. 盖宝东,房学东,金仲田,张德恒,郑泽霖. 吉林大学学报(医学版). 2003(01)
[9]福尔马林固定石蜡包埋组织的PCR-STR分型[J]. 王剑,顾明波,杜庆新,李晓平,陈弄潮. 中国法医学杂志. 2002(03)
[10]两种提取石蜡包埋组织DNA方法的比较[J]. 张金生,刘鸿瑞. 诊断病理学杂志. 2000(02)
本文编号:3379466
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