人脐带间充质干细胞外泌体运输miR-340治疗放射性肺损伤作用机制研究

发布时间：2021-11-05 01:47

　　背景放射性肺损伤（radiation-induced lung injury,RILI）常发生在肺癌,乳腺癌等胸部肿瘤患者放疗后。严重放射性肺炎患者死亡率约为50%。天然药物,生物试剂等能减少肺内自由基、稳定DNA结构,已被用于预防和治疗RILI。然而,它们具有半衰期短,易降解的特点,副作用多。目前,虽然肺移植是治疗放射性肺纤维化最有效的干预措施,但由于缺乏可用的捐赠肺和移植并发症多等,临床应用较少。越来越多研究表明,间充质干细胞外泌体miRNAs是重要的细胞外通讯器,具有介导再生和免疫调节作用,能减少受损组织的炎症和纤维化。目的为了研究人脐带间充质干细胞（hUCMSCs）外泌体运输miR-340减轻放射肺损伤的作用机制,进一步明确miRNA修饰的间充质干细胞外泌体（MEX）在治疗RILI中的抗炎能力,为其成为一种安全,有效的无细胞治疗方案奠定基础。方法首先利用生物信息学Target Scan,miRanda数据库预测miR-340与TLR4基因3-’UTR序列结合的可能性,用双荧光素酶实验检测miR-340与TLR4的3-’UTR结合的能力,用RT-PCR和Western blot实... 

【文章来源】：新乡医学院河南省

【文章页数】：76 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

miR-340调控TLR4的基因结合序列及实验原理

新乡医学院硕士学位论文18图2.miR-340以TLR4的3"-UTR为靶向抑制TLR4及其下游靶蛋白的磷酸化水平Figure2.miR-340targetedthe3"-UTRofTLR4toinhibitsTLR4expressionanditsdownstreamtargetproteinphosphorylation4.讨论大量研究表明，TLR4/NF-κB是常见的炎症信号通路，在治疗肺癌，乳腺癌，胸腺癌等胸部肿瘤时，放疗可以激活TLR4/NF-κB信号通路，进而激活炎症细胞释放TGF-β，TNF-α，IL-1β，IL-6，IFN-γ等炎症因子，引起肺部炎症反应。为探究放疗对肺损伤的具体激活机制，我们通过对RAW264.7细胞和293T细胞进行荧光素酶实验和Westernblot实验得出miR-340以TLR4的3"-UTR为靶向，抑制TLR4的表达及其下游靶蛋白的磷酸化水平（P-P65），这一结果不仅验证了我们的猜测，也为我们后续第三部分研究MEX-miR-340对RILI治疗机制做了理论基矗有利于我们

新乡医学院硕士学位论文26图3.鉴定未分化的hUCMSCs和成脂、成骨、成软骨潜能Figure3.IdentifytheundifferentiatedhUCMSCsandtheirLipogenic,osteogenicandchondrogenicpotential图4.流式细胞术分析hUCMSCs表面标志物的表型Figure4.PhenotypeanalysisofhUCMSCssurfacemarkersbyflowcytometry3.2hUCMSCs外泌体的特性透射电镜观察hUCMSCs外泌体的主要形态为圆形囊泡大小主要在30~100m之

【参考文献】：
期刊论文
[1]Mesenchymal stem cells-derived exosomal microRNAs contribute to wound inflammation[J]. Dongdong Ti,Haojie Hao,Xiaobing Fu,Weidong Han.  Science China（Life Sciences）. 2016(12)
[2]Challenges in animal modelling of mesenchymal stromal cell therapy for inflammatory bowel disease[J]. Raghavan Chinnadurai,Spencer Ng,Vijayakumar Velu,Jacques Galipeau.  World Journal of Gastroenterology. 2015(16)
[3]放射性肺损伤防护的研究进展[J]. 毛艳,刘文其.  肿瘤. 2012(05)



本文编号：3476825