沉默ATRX对电离辐射诱导肿瘤细胞周期阻滞的影响及其机制

发布时间：2021-11-05 19:14

　　现阶段,肿瘤是危害公众健康的一大难题,虽然总体死亡率呈下降趋势,但仍旧是人类死亡的头号杀手。放射治疗是肿瘤的重要治疗手段,可通过破坏细胞周期进程进而造成细胞死亡,来达到治疗肿瘤的目的。其直接靶点是DNA,DNA损伤修复机制被认为是肿瘤细胞的阿喀琉斯之踵,辐射造成细胞周期阻滞主要是为DNA损伤修复赢得时间,辐射通过造成严重的DNA损伤而无法修复进而促使肿瘤细胞发生凋亡或者衰老。α-地中海贫血/精神发育迟滞综合征X染色体相关基因（α-thalassemia/mental retardation syndrome X-linked,ATRX）可以参与DNA甲基化、DNA修复、端粒稳定和募集组蛋白变体H3.3等。本研究建立了靶向沉默ATRX的肿瘤细胞稳转模型,探讨电离辐射对细胞周期阻滞、DNA损伤修复、细胞凋亡和衰老、以及辐射增敏作用的影响及其分子机制,为探寻肿瘤辐射增敏新的分子靶点提供理论和实验数据。目的:研究靶向沉默ATRX对电离辐射诱导的肿瘤细胞周期阻滞的影响及分子机制,并进一步探讨对DNA损伤修复、细胞衰老和凋亡、放射敏感性的作用及相关分子机制,为探寻增敏肿瘤辐射新的分子靶点提供理论及...

【文章来源】： 吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：86 页

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中文摘要
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第1章 文献综述
    1.1 ATRX基因
        1.1.1 ATRX的结构
        1.1.2 ATRX的功能
        1.1.3 肿瘤与ATRX
        1.1.4 ATRX与 Daxx
    1.2 p53 基因
        1.2.1 p53 的生物学功能
        1.2.2 p53 在细胞周期中的调控作用
        1.2.3 p53与MDM2 的负反馈调控
    1.3 电离辐射与细胞周期阻滞
        1.3.1 G1 期阻滞
        1.3.2 S相延迟
        1.3.3 G2 期阻滞
    1.4 电离辐射所致的DNA损伤修复反应
        1.4.1 DNA损伤修复机制
        1.4.2 DNA损伤修复相关通路
    1.5 肿瘤细胞死亡表型
        1.5.1 细胞衰老
        1.5.2 细胞凋亡
        1.5.3 有丝分裂灾难
    1.6 立题依据
第2章 材料和方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验试剂
        2.1.2 实验仪器及耗材
        2.1.3 试剂配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 细胞培养
        2.2.2 慢病毒转染
        2.2.3 X线照射
        2.2.4 细胞周期检测
        2.2.5 细胞增殖能力检测
        2.2.6 克隆形成实验
        2.2.7 免疫荧光实验
        2.2.8 细胞衰老检测
        2.2.9 细胞凋亡检测
        2.2.10 蛋白免疫印迹法
        2.2.11 蛋白免疫共沉淀
    2.3 抗体目录
    2.4 统计学分析
第3章 实验结果
    3.1 沉默ATRX的细胞模型建立
    3.2 辐射对沉默ATRX HCT116 细胞周期的作用
        3.2.1 辐射导致沉默ATRX的 HCT116 细胞周期阻滞
        3.2.2 辐射导致沉默ATRX HCT116 细胞周期蛋白变化
    3.3 辐射对沉默ATRX细胞存活的影响
        3.3.1 辐射对沉默ATRX细胞增殖的影响
        3.3.2 辐射对沉默ATRX的 HCT116 细胞克隆形成的影响
    3.4 辐射对沉默ATRX HCT116 细胞DNA损伤修复的影响
    3.5 辐射对沉默ATRX细胞衰老影响
    3.6 辐射对沉默ATRX细胞凋亡的影响
    3.7 ATRX和 p53 蛋白之间的相互关系
        3.7.1 生物信息学网站查询蛋白作用关系
        3.7.2 ATRX通过Daxx与 MDM2,p53 产生作用
第4章 讨论
    4.1 ATRX参与辐射诱导的细胞周期阻滞
    4.2 辐射沉默ATRX HCT116 细胞DNA损伤修复的作用
    4.3 ATRX对放射敏感性及死亡表型的影响
    4.4 ATRX与 p53 之间的间接调控关系
第5章 结论
参考文献
附图
作者简介及在学期间的科研成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]Daxx过表达能显著抑制AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞的增殖和迁移 [J]. 曹玉梅,孙四玉,杨冬梅,霍艳杰,邱飞,谢雪娇,庹勤慧.  南方医科大学学报. 2019(10)

硕士论文
[1]细胞周期调节因子p21WAF1、p53及Gadd45a在乳腺癌组织中的表达及意义[D]. 高其忠.苏州大学 2011



本文编号：3478357