大鼠生前与死后损伤肌肉组织中自噬相关蛋白表达

发布时间：2021-11-09 02:22

　　目的研究大鼠骨骼肌损伤后BECN1、LC3和p62三种自噬相关蛋白的表达,探讨其在鉴别生前与死后损伤中的应用。方法 72只健康成年Sprague-Dawley大鼠被随机分为未损伤的对照组、生前损伤组（0.5、1、2、4、8、16和24 h）和死后损伤组（0.5、1、2和4 h）,制作大鼠右后肢损伤模型。运用Western印迹法检测对照组、生前损伤组以及死后损伤组骨骼肌中自噬蛋白BECN1、LC3-2/LC3-1和p62的表达,分别将数据中心化和标准化处理,建立生前损伤和死后损伤正交偏最小二乘判别分析（orthogonal partial least square-discriminate analysis,OPLS-DA）鉴别模型。结果大鼠骨骼肌挫伤后BECN1、p62蛋白的表达以及LC3-2/LC3-1值在生前损伤和死后损伤组中虽有不同程度的变化,但差异无统计学意义。BECN1的表达量及LC3-2/LC3-1值经中心化和标准化处理后,可区分生前损伤和死后损伤。生前损伤和死后损伤OPLSDA模型提取的主成分对模型的解释程度较好（Rx2=0.563,Ry2=0.439）,但预测程度稍差（... 

【文章来源】：法医学杂志. 2020,36(03)CSCD

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

大鼠骨骼肌生前损伤和死后损伤的OPLS-DA模型

Western印迹法分别检测生前损伤组、对照组和死后损伤组大鼠骨骼肌中自噬相关蛋白的相对表达量（图1、表1）。结果显示，BECN1、p62蛋白表达量及LC3-2/LC3-1值在生前损伤和死后损伤的肌肉组织中虽有不同程度的变化，但差异无统计学意义。由此说明，依据传统的数据处理方法，无法满足生前损伤和死后损伤的鉴别。2.2 自噬相关蛋白BECN1和LC3-2/LC3-1值数据中心化

本研究用BECN1和LC3-2/LC3-1值两个变量建立了有监督的OPLS-DA以区分生前损伤和死后损伤（图3）。用3个指标（BECN1、p62相对表达量及LC3-2/LC3-1值）在所有样本中的数值建立区分生前损伤和死后损伤的OPLS-DA模型（图3A），提取出两个主成分（图3B），其Rx2=0.563、Ry2=0.439、Q2=0.366。200次响应排序检验（图3C）以检测模型是否发生了过拟合，如图3C所示，回归线与Y轴的交点在0以上，而拟合线与Y轴的焦点在0以下，并且两直线相交于第一象限，表明模型未发生过拟合。图3 大鼠骨骼肌生前损伤和死后损伤的OPLS-DA模型

【参考文献】：
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本文编号：3484444