GGC肽/hSSTr2a融合受体核素报告基因显像的实验研究

发布时间：2021-12-02 20:31

　　目的:将编码GGC肽（diglycylcysteine,双甘氨酰半胱氨酸）的基因序列与人生长抑素2a型受体（hSSTr2a）基因的膜外N端开放阅读框相连接,构建融合受体重组腺病毒载体Ad5-GGC-hSSTr2a-IRES-EGFP。通过体外受体结合试验、细胞摄取试验、核素报告基因显像等一系列体外与体内实验研究,探讨以GGC序列为报告基因进行核素报告基因显像的可行性,以期建立一种新型的核素报告基因显像系统。方法:1.重组腺病毒载体Ad5-GGC-hSSTr2a-IRES-EGFP的构建与表达鉴定。采用RT-PCR方法扩增hSSTr2a基因全长cDNA序列,将GGC肽的基因序列（亲水序列P1,疏水序列P2）与hSSTr2a的膜外N端开放阅读框相连接,通过一系列基因工程技术构建同源重组腺病毒骨架质粒pAdEasy-1/GGC-hSSTr2a-IRES-EGFP （pAd-SIG-P1, P2）。提取pAd-SIG-P1和pAd-SIG-P2质粒并转化大肠杆菌DH5a感受态细胞,酶切线性化后经脂质体（Lipofectamine2000）介导转染HEK293细胞,同源重组产生融合受体重组腺病毒... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：97 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
    中文摘要
    英文摘要
前言
    参考文献
正文
    第一部分 Ad5-GGC-hSST12a-IRES-EGFP 重组腺病毒的构建与表达鉴定
        摘要
        Abstract
        材料和方法
        结果
        讨论
        参考文献
    第二部分 Ad5-GGC-hSST12a-IRES-EGFP 重组腺病毒在MCF-7细胞内的表达
        摘要
        Abstract
        材料和方法
        结果
        讨论
        参考文献
    第三部分 Ad5-GGC-hSST12a-IRES-EGFP 在荷瘤裸鼠体内的报告基因显像
        摘要
        Abstract
        材料和方法
        结果
        讨论
        参考文献
全文总结
附录
    附录一 英文缩写注释表
    附录二 攻读博士学位期间发表论文及申请课题
致谢



本文编号：3529157