IL-37对A549细胞生长及放射敏感性的影响及可能机制的研究
发布时间：2022-01-04 05:44
目的:研究IL-37对A549细胞的生长及放射敏感性的影响,并初步研究相关作用机制,探讨IL-37作为新型放射增敏剂的可能性。方法:选用人肺腺癌A549作为研究对象,通过应用重组人白介素-37（rh IL-37）及腺病毒介导IL-37（Ad-IL-37）研究IL-37对A549细胞生长及其对放射敏感性影响的情况。（1）流式细胞术检测不同放射剂量对A549细胞的影响,选择合适放射剂量;（2）应用Ad-IL-37转染A549细胞,应用Western Blot检测其在A549细胞中的表达;（3）四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测IL-37（rh IL-37及Ad-IL-37）对人肺腺癌A549细胞及联合照射组A549细胞生长增殖情况的影响;（4）流式细胞术观察IL-37（rh IL-37及Ad-IL-37）对A549细胞凋亡率及细胞周期的影响;（5）Western Blot检测IL-37对细胞凋亡基因及蛋白的影响;（6）RT-PCR检测IL-37对A549细胞凋亡相关基因表达的影响;（7）Western Blot检测IL-37对A549细胞PI3K/AKT通路相关蛋白及基因的表达。结果:（1...
【文章来源】：青岛大学山东省
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同放射剂量下细胞凋亡情况（选择4Gy为本实验的放射剂量）
青岛大学硕士学位论文1624KD处呈现明显的特异性条带（P＜0.05），而其他两组该条带明显较弱，证明IL-37在A549细胞中成功转染并表达。ABC图2A空病毒组荧光情况BIL-37组荧光情况CIL-37在A549细胞中的表达（*IL-37组IL-37蛋白表达较对照组差异具有统计学意义（P＜0.05））。3MTT法检测细胞增殖情况3.1应用MTT法检测不同浓度rhIL-37对A549细胞增殖的影响，结果显示，rhIL-37在10ng/mL时对细胞的OD值无明显影响，在该浓度下rhIL-37对A549细胞生长增殖无明显影响，但在100ng及200ng/mL时，rhIL-37组较对照组在24h时各组OD值差异无明显统计学意义（P＝0.84，0.60，均＞0.05），在48h，72h，96h，120h时较对照组OD值具有统计学意义（均P＜0.05）（见表2），24h时各组细胞抑制率比较差异无统计学意义（P＝0.42，＞0.05），48h后各组细胞抑制率差异均有统计学意义（均P＜0.05）（见表3），因此后续实验选择100ng/mL为本实验的浓度。表2不同rh-IL37浓度下人A549细胞不同时间吸光度值变化情况（SX）
实验结果17组别样本数24h48h72h96h120h对照组30.84±0.071.12±0.041.57±0.142.12±0.121.86±0.0610ng/mL组30.81±0.041.06±0.021.56±0.042.03±0.11.77±0.06100ng/mL组30.82±0.020.97±0.05*1.30±0.09*1.68±0.08*1.42±0.09*200ng/mL组30.84±0.080.86±0.07*1.14±0.05*1.46±0.11*1.32±0.05**较对照组差异具有统计学意义，P＜0.05图3不同rhIL-37浓度下对A549细胞OD值影响表3不同rh-IL37浓度下人A549细胞不同时间细胞抑制率变化情况（SX，%）组别样本数24h48h72h96h120h0ng/mL组30000010ng/mL组31.99±1.832.63±0.232.96±1.873.42±1.043.67±0.384100ng/mL组31.96±0.988.32±7.04*12.08±7.72*15.89±0.09*19.38±0.29*200ng/mL组31.32±0.4710.82±7.24*17.71±4.69*20.66±9.78*24.32±5.67*注：*较对照组差异具有统计学意义，P＜0.053.2应用MTT法检测rhIL-37对A549细胞生长情况的影响，将细胞分为4组（对照组、rhIL-37组（100ng/mL）、单纯照射组、rhIL-37+照射组），实验结果显示，在24h时各组OD值及抑制率各组间差异无明显统计学意义（P＝0.79，＞0.05），在48h，72h，96h，120h时rhIL-37组、照射组、rhIL-37+照射组的OD值及抑制率较对照组差异具有统计学意义，同时，rhIL-37+照射组较照射组差异具有统计学意义（均P＜0.05）（见表4，5）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]IL-37抑制体外培养的SMMC-7721肝癌细胞的增殖、侵袭和迁移[J]. 张国庆,汤成泳,谭婧宇,刘锐,周密,吴忠均. 细胞与分子免疫学杂志. 2015(10)
本文编号：3567778
【文章来源】：青岛大学山东省
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同放射剂量下细胞凋亡情况（选择4Gy为本实验的放射剂量）
青岛大学硕士学位论文1624KD处呈现明显的特异性条带（P＜0.05），而其他两组该条带明显较弱，证明IL-37在A549细胞中成功转染并表达。ABC图2A空病毒组荧光情况BIL-37组荧光情况CIL-37在A549细胞中的表达（*IL-37组IL-37蛋白表达较对照组差异具有统计学意义（P＜0.05））。3MTT法检测细胞增殖情况3.1应用MTT法检测不同浓度rhIL-37对A549细胞增殖的影响，结果显示，rhIL-37在10ng/mL时对细胞的OD值无明显影响，在该浓度下rhIL-37对A549细胞生长增殖无明显影响，但在100ng及200ng/mL时，rhIL-37组较对照组在24h时各组OD值差异无明显统计学意义（P＝0.84，0.60，均＞0.05），在48h，72h，96h，120h时较对照组OD值具有统计学意义（均P＜0.05）（见表2），24h时各组细胞抑制率比较差异无统计学意义（P＝0.42，＞0.05），48h后各组细胞抑制率差异均有统计学意义（均P＜0.05）（见表3），因此后续实验选择100ng/mL为本实验的浓度。表2不同rh-IL37浓度下人A549细胞不同时间吸光度值变化情况（SX）
实验结果17组别样本数24h48h72h96h120h对照组30.84±0.071.12±0.041.57±0.142.12±0.121.86±0.0610ng/mL组30.81±0.041.06±0.021.56±0.042.03±0.11.77±0.06100ng/mL组30.82±0.020.97±0.05*1.30±0.09*1.68±0.08*1.42±0.09*200ng/mL组30.84±0.080.86±0.07*1.14±0.05*1.46±0.11*1.32±0.05**较对照组差异具有统计学意义，P＜0.05图3不同rhIL-37浓度下对A549细胞OD值影响表3不同rh-IL37浓度下人A549细胞不同时间细胞抑制率变化情况（SX，%）组别样本数24h48h72h96h120h0ng/mL组30000010ng/mL组31.99±1.832.63±0.232.96±1.873.42±1.043.67±0.384100ng/mL组31.96±0.988.32±7.04*12.08±7.72*15.89±0.09*19.38±0.29*200ng/mL组31.32±0.4710.82±7.24*17.71±4.69*20.66±9.78*24.32±5.67*注：*较对照组差异具有统计学意义，P＜0.053.2应用MTT法检测rhIL-37对A549细胞生长情况的影响，将细胞分为4组（对照组、rhIL-37组（100ng/mL）、单纯照射组、rhIL-37+照射组），实验结果显示，在24h时各组OD值及抑制率各组间差异无明显统计学意义（P＝0.79，＞0.05），在48h，72h，96h，120h时rhIL-37组、照射组、rhIL-37+照射组的OD值及抑制率较对照组差异具有统计学意义，同时，rhIL-37+照射组较照射组差异具有统计学意义（均P＜0.05）（见表4，5）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]IL-37抑制体外培养的SMMC-7721肝癌细胞的增殖、侵袭和迁移[J]. 张国庆,汤成泳,谭婧宇,刘锐,周密,吴忠均. 细胞与分子免疫学杂志. 2015(10)
本文编号：3567778
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