DRD5基因5'端SNPs及对基因表达的影响

发布时间：2023-02-23 18:32

　　目的:精神分裂症是一种十分复杂的脑功能障碍性疾病,研究显示其发生受到遗传和环境的共同作用。目前,在法医司法精神病鉴定中,对被鉴定人是否患有精神疾病仍缺乏有效的客观指标。它的病因涉及到多种神经递质和假说,而大量的病理学和生理学证据都支持了精神分裂症的多巴胺系统功能失调假说。而多巴胺受体5基因的突变可能会导致其与DA结合能力或表达量的改变而与许多精神疾病相关。目前为止,对DRD5基因在精神分裂症发病机制中的作用机制仍然不明确,相关多态性在转录水平的研究不多。在课题组的前期研究中曾对DRD5基因中的4个SNPs与偏执型精神分裂症的相关性进行了研究,发现rs77434921的A等位基因以及rs2076907的等位基因G可能是偏执型精神分裂症的危险因子。为了进一步探讨DRD5基因在偏执型精神分裂症发病机制中的作用,本研究根据课题组前期研究成果提供的信息,分析DRD5基因5`端序列的rs77434921和rs2076907位点以及5`端序列对基因表达的影响,进而探究多巴胺受体5基因与精神分裂症的关联。方法:1.设计带有酶切位点的引物扩增DRD5基因,包含5`端非翻译区以及两个SNPs在内的-159...

【文章页数】：46 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
英文缩略语
1 前言
2 材料和方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验样品
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 主要仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 目的片段扩增
        2.2.2 PCR产物回收
        2.2.3 构建PGM-T重组载体
        2.2.4 大肠杆菌的转化及扩大培养
        2.2.5 质粒小型提取
        2.2.6 DNA序列分析
        2.2.7 构建PGL3重组表达载体
        2.2.8 大量提取质粒并测定浓度纯度
        2.2.9 细胞培养及转染
        2.2.10 双荧光素酶报告分析
        2.2.11 单个SNP的分析
        2.2.12 DRD5基因5'端序列截短
        2.2.13 提取RNA及实时荧光定量PCR分析
        2.2.14 统计分析
3 实验结果
    3.1 重组载体验证
    3.2 双荧光素酶报告分析
        3.2.1 两个SNPs组成单倍型的分析
        3.2.2 单个SNP单倍型分析
        3.2.3 DRD5基因5'端序列截短片段分析
    3.3 实时定量PCR进行mRNA水平分析
4 讨论
    4.1 DRD5基因5'端序列SNP的研究
    4.2 截短载体在不同细胞系中的调控作用
    4.3 DRD5基因mRNA水平检测
    4.4 法医学意义
5 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历



本文编号：3748520