细胞因子和造血干细胞移植在辐射损伤动物治疗中的应用研究

发布时间：2024-02-16 06:07

　　目的:联合应用重组人白介素11(rhIL-11)和重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)治疗辐射引起的急性放射病动物模型,观察其疗效。应用转hOSM(人抑瘤M)基因细胞作为饲养层,观察其体外促进造血干/祖细胞(HSPC)增殖、抑制HSPC分化和维持HSPC归巢能力的作用。 方法:(1)建立⁶⁰Coγ射线急性放射病比格狗动物模型,在对症治疗的基础上,联合应用rhIL-11和rhG-CSF,观察动物的一般情况、外周血象、外周血有核细胞早期凋亡和坏死率、血浆中细胞因子浓度及组织病理学变化。(2)用分子生物学技术建立转hOSM基因细胞系,免疫磁珠法分离脐带血CD34⁺HSPC,以转基因细胞作为饲养层对其进行扩增,观察其抑制HSPC分化的作用;将扩增后的CD34⁺HSPC移植入急性放射病SCID小鼠体内,应用荧光显微镜和RT-PCR法检测移植效果。 结果:(1)急性放射病比格狗经细胞因子治疗后,45天存活率升高,外周血象也明显改善;外周血有核细胞早期凋亡和坏死率明显降低;外周血血浆中IL-2和IFN-γ浓度在早期均升高,随后I...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图3比格狗胸骨骨髓腔病理学检查（HE，×100）

对照组比格狗胸骨骨髓腔内几乎全被脂肪组织所填充，仅见很少的造血细胞，对症治疗组胸骨骨髓腔内有较多的造血细胞，CK治疗组动物胸骨骨髓腔内造血细胞增生活跃，可见各系髓细胞，有大量的造血细胞(图3)。

图1转基因293T细胞照片（×200）

应用Zeocin对正常293T细胞进行筛选，确定最佳筛选浓度为25μg/ml。经反复感染的293T细胞在Zeocin加压筛选后，部分细胞能够存活，长出克隆。荧光显微镜下可见这些细胞均有GFP的表达（图1）。

图1实验组SCID小鼠的骨髓细胞照片

普通光镜荧光显微镜图1实验组SCID小鼠的骨髓细胞照片M123图2RT-PCR法鉴定ALU基因内皮，随时间增长，移植细胞增殖，但含量最多的是在骨髓、脾和究中，我们利用2.5Gy60COγ射线破坏小鼠体内的造血干细胞，以建动物模型，在照射后的4h内....

本文编号：3900952