miRNA-34a/KLF4在X射线诱导肝细胞凋亡时的调节作用

发布时间：2024-02-27 15:08

　　目的： 探讨miR-34a/KLF4在X射线外照射诱发小鼠肝细胞凋亡时的调节作用机制,为进一步阐明miR-34a在电离辐射损伤发生中的作用提供实验依据,并推动以其为靶点的辐射损伤救治新手段的探索。 方法： 1.双荧光素酶活性实验检测miR-34a对KLF4的靶向作用。对数生长期的小鼠肝细胞瞬时转染miR-34a模拟物和抑制剂后,Real-Time PCR方法检miR-34a和KLF4mRNA表达,western blot蛋白印记法检测KLF4蛋白表达。 2.对数生长期的小鼠肝细胞,经10Gy X射线照射后不同时间点收集细胞,采用流式细胞仪检测细胞凋亡变化,Real-Time PCR方法检测miR-34a表达。瞬时转染miR-34a模拟物和抑制剂后,流式细胞仪检测10Gy X射线照射小鼠肝细胞凋亡变化。慢病毒干扰KLF4后,流式细胞仪检测10Gy X射线照射小鼠肝细胞凋亡变化。 结果： 1.生物信息学软件预测,发现miR-34a在KLF4-3’UTR有一个序列保守的潜在靶位点。为了验证miR-34a和KLF4的靶点作用关系,构建了含KLF4-3’UTR结合序列的报告基因质粒。双荧光素酶活...

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
引言
第一部分 pGL3-KLF4-3'UTR和pGL3-KLF4-3'UTR-MUT质粒的构建
    1.1 实验材料
    1.2 方法
    1.3 实验结果
    1.4 讨论
第二部分 miR-34a和KLF4的靶作用验证
    2.1 实验材料
    2.2 方法
    2.3 结果
    2.4 讨论
第三部分 miR-34a/KLF4对X射线照射小鼠肝细胞凋亡的调控机制
    3.1 实验材料
    3.2 方法
    3.3 结果
    3.4 讨论
结论
参考文献
文献综述
    参考文献
中英文对照缩略语词表
攻读硕士学位期间发表和待发表论文
致谢



本文编号：3912651