疑难降解检材DNA检验方法研究

发布时间：2024-05-15 00:20

　　目的:本论文以陈旧骨骼、牙齿及福尔马林固定石蜡包埋组织中残留的少量降解的核酸分子作为研究对象,利用多种技术方法,比较并建立适合降解检材的提取技术方法。并将建立的方法应用于其他案件中常见微量降解的检材;对骨骼、牙齿、福尔马林固定石蜡包埋组织及其他疑难降解检材中没有得到完整STR分型的,应用MiniFilerTM试剂盒进行检验,并评估MiniFilerTM试剂盒在疑难降解检材STR分型中的法医学应用价值。 方法:选取10例已知检验结果的骨骼和牙齿样本,分别用不同脱钙、不同裂解液、不同纯化的方法进行实验并比较;在此基础上改进并建立骨骼提取的方法;并应用建立的方法对24例案件中骨胳样本进行检验。 选取10例医院病理科收集的福尔马林固定石蜡包埋组织,经不同的脱蜡温度和脱蜡时问预处理后提取石蜡包埋人体组织中的DNA进行复合扩增检验,比较不同预处理方法对DNA提取效果的影响;选取经上述预处理后效果最优的一组分别采用有机法和Chelex.100法进行提取,比较两种方法的提取效果;将10例石蜡包埋组织得到的分型结果与相应的血样DNA进行比对,观察癌组织基因突变对PCR反应及结果分析的影响。 对13例其他...

【文章页数】：46 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1-1使用OEB裂解液消化裂解后的结果

本文应用1组骨骼裂解液OEB与2组GuSCN裂解液的样本分别提取了1年、2年、4年、7年陈旧骨骼和牙齿样本的DNA均得到12个以上STR基因座的分型结果，经统计学检验，两组使用方法效果无显著性差异（见表1，图1-1，1-2）。但其中3、4、8号样本使用OEB裂解液检出基因座数目较....

图1-2使用异硫腈胍消化裂解后的结果

液检出基因座数目较GuSCN裂解液法检出数目多。图1-1使用OEB裂解液消化裂解后的结果图1-2使用异硫腈胍消化裂解后的结果

图2-1经过脱钙处理后的结果

2.2脱钙与否对骨骼或牙齿样本检验结果的影响未经预脱钙的3组，仅保存1年和3年的样本得到部分基因座的分型结果，其余均未得到分型结果。（见表1，图2-1，2-2）图2-1经过脱钙处理后的结果

图2-2未经过脱钙处理的结果

7图2-2未经过脱钙处理的结果2.3不同纯化方法对骨骼或牙齿样本检验结果的影响使用Microncon100纯化法的4组，10份样本均未得到STR分型（见表1）。2.4与传统硅珠法比较结果用1组结果与刘雅诚等[9]报道的硅珠法所得到的结果进行比较（检材相同），其中2、3、9....

本文编号：3973628