用蛋白质组学方法筛选全身辐照大鼠血浆差异表达蛋白质

发布时间：2024-06-01 17:08

　　目的在核事故和辐射事故下采取准确、快速的生物分析技术估算暴露人群的受照剂量,在临床治疗中起着十分重要的作用。辐射生物剂量估算的“金标准”-分析“双着丝粒+环”,存在实验周期长、对分析人员技术要求高等特点,无法满足上述高通量、快速的要求。近年来,能实现快速、高通量筛选的蛋白质组学技术己在辐射研究中广泛应用,为发现辐射敏感生物标志物提供了有效方法。其中,应用最多的定量蛋白质组学方法是体外标记定量技术-串联质谱标签(Tandem Mass Tags,TMT)等,这些方法可以筛选分析不同剂量照射后大鼠血浆中的差异表达蛋白质。目前国内外应用蛋白质组学方法对辐射后生物差异表达蛋白质的研究中,所选择的辐射剂量点少、观察时间短、缺乏验证实验。本研究的目的是在现有研究基础上,应用TMT定量蛋白质组学方法研究0 Gy、1 Gy、3 Gy和5 Gy照射剂量后1 d、3d、5 d和7 d大鼠血浆蛋白质组学的变化,进行生物信息学分析,同时验证血浆·中的具有良好辐射剂量-效应关系的差异表达蛋白质,为进一■步开发应用提供实验依据。方法1.实验动物、分组及照射:SPF级SD雄性大鼠,体重(2000)g。将观察生长健康...

【文章页数】：76 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２?ＴＢＩ?Ｙ射线照射后大鼠血浆中所有上调和下调差异表达蛋白质的ＧＯ分析

??胞外空间蛋白，１３．８％位于血液微粒中（图２．ａ）。分子功能分析显示差异表达蛋??白质的首要功能是抗原结合活性（１８．５％），其次是免疫球蛋白受体结合活性??（１７．３％）、丝氨酸型内肽酶抑制剂活性（１４．３％）和ＡＴＰ结合活性（１０．１％）（图??２．ｂ）。在生物学过程分类....

图３筛选中２４９上调表达蛋白质中１８９种蛋白质之间相互作用网络??３．蛋白质的ＥＬＩＳＡ定量分析??

大剂量时蛋白质表达较低，难以检测到，所以本研究重点关注表达增高的差异蛋??白质，所以将表达増高的２４９种蛋白质录入系统，查找到１８９种蛋白质，并对其??相互关系进行分析。根据ＳＴＲＩＮＧ分析结果（图３?），上述中有量效趋势的Ａ２ｍ、??Ｃｌｕ和Ｃｐ蛋白质被确定位于蛋白质相互作用网....

图４?６（）Ｃｏ?Ｙ射线全身照射ＳＤ大鼠后不同时间点血浆中Ａ２ｍ蛋白表达变化??注：与ＯＧｙ组比较，“＊”，尸＜０．０５；?户＜０．０１；后面结果中的意义同前

３?Ｇｙ组在照后３?ｄ浓度最高３０．３５±５．２６呢／ｍｌ。实验组中，同一剂量点Ａ２ｍ蛋白??的表达量均在照射后Ｉｄ或者３ｄ达到最高值后，随着照射后时间的延长，表达??量降低，逐渐回归到对照水平（图４）。??照射后１?ｄ，各剂量组血浆中Ａ２ｍ蛋白表达量高于对照组，但只有５?Ｇｙ组....

图5‘ocoy射线全身照射sD大鼠后不同时间点血浆中cHGA蛋白表达变化

?７?－?－?－???注：ａｙ为蛋白质在血浆中的表达水平（ｐｇ／ｍｌ），?ｘ为吸收剂量（Ｇｙ），尸＜０．０５。??３．１．２?ＣＨＧＡ蛋白表达变化??照射后３?ｄ和５?ｄ，大鼠血浆中ＣＨＧＡ蛋白的表达量随着照射剂量的增加而??升高。与对照组比较，１?Ｇｙ和３?Ｇｙ组的ＣＨＧＡ蛋白....

本文编号：3986209