力竭运动及钝挫伤对大鼠骨骼肌卫星细胞体外增殖及MSTN含量的影响

发布时间：2017-08-25 08:39

  本文关键词：力竭运动及钝挫伤对大鼠骨骼肌卫星细胞体外增殖及MSTN含量的影响

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【摘要】：目的：研究力竭运动及钝挫伤对大鼠骨骼肌卫星细胞以及肌肉生长抑制素(MSTN)影响。 方法：选取24只wistar雄性大鼠,随机分为4组,每组6只。分别是安静对照组(control,C);力竭运动组(Exhaustive exercise group):力竭运动组进行一次力竭性下坡跑运动均达到力竭状态,并取即刻组(Exhaustive,EO)、力竭后24h组(E24)、力竭后48h组(E48)。力竭运动组和安静对照组分别于末次力竭运动后不同时问点和安静状态下进行麻醉,宰杀并取下心肌和左侧腓肠肌,腓肠肌一分为二,一份立即进行细胞培养实验,另一份腓肠肌和心肌放在液氮保存待检测肌肉生长抑制素(MSTN)的变化。钝挫伤组：选取3只wistar雄性大鼠,分别钝挫伤即刻组(Contusion,D0)、24h组(D24)、48h组(D48),进行钝挫伤的操作后,将三组分别在即刻、24h、48h进行麻醉,摘取左侧腓肠肌,即刻进行肌卫星细胞培养；另取新生鼠1只,宰杀后取下左侧腓肠肌,同样进行肌卫星细胞培养。 结果：(1)肌卫星细胞培养的结果：通过分离消化大鼠肌组织,‘可在体外获得高纯度的具有成肌能力的肌卫星细胞。 在培养初始阶段除了新生组各组的肌卫星细胞增殖速度较慢,第五天时开始大量增殖,到第七天时增殖达到高峰,基本布满大部分培养皿,之后增殖速度下降。从各组之间比较看出,新生鼠组肌卫星细胞含量最高,增殖速度最快,在培养第二天便可见少量纺锤形的单核细胞出现；在第四天就大量增殖,当培养5天后,卫星细胞相互融合形成多核的肌管；安静对照组肌卫星细胞含量最少，，且增殖速度最慢；而钝挫伤组和力竭运动组介于新生鼠组和对照组之间,且钝挫伤组肌卫星细胞数量相对较多。 (2)ELISA结果显示：一次力竭训练后与安静对照组相比,力竭组E0、E24、E48骨骼肌和心肌中MSTN的含量均下降,均具有显著性差异(P0.01)。而力竭组E0、E24、E48之间没有显著性差异。 结论：(1)钝挫伤组和力竭运动组骨骼肌卫星细胞增殖比安静对照组快,数量繁殖更多。并且钝挫伤组比力竭运动组肌卫星细胞数量更多。钝挫伤和力竭运动导致的肌卫星细胞激活和损伤修复途径基本一致,但程度有所不同；新生鼠在没有外力条件下,其肌卫星细胞数量较多、增殖能力较强。说明新生鼠体内的肌卫星细胞并未处于静息状态。 (2)力竭运动和恢复期间的大鼠骨骼肌和心肌内的MSTN含量明显低于安静对照组,而力竭各组(E0、E24、E48)之间无显著性差异。提示力竭运动可以下调MSTN含量,MSTN可能在肌卫星细胞激活及骨骼肌和心肌修复中起着负调节作用。
【关键词】：力竭运动 钝挫伤 肌卫星细胞 肌肉生长抑制素
【学位授予单位】：扬州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：G804.2;R87
【目录】：

• 中文摘要2-4
• ABSTRACT4-6
• 缩略词表6-10
• 前言10-12
• 第一部分 文献综述12-28
• 1 骨骼肌概述12-16
• 1.1 骨骼肌的解剖生理12
• 1.2 骨骼肌运动性微损伤的研究进展12-15
• 1.2.1 机械损伤假说13
• 1.2.2 自由基损伤假说13-14
• 1.2.3 细胞内钙稳态失调学说14
• 1.2.4 急性炎症反应学说14
• 1.2.5 能量代谢紊乱学说14-15
• 1.3 骨骼肌损伤后修复再生的生物学基础15-16
• 2 运动训练对骨骼肌卫星细胞的影响16-22
• 2.1 骨骼肌卫星细胞概述16
• 2.2 骨骼肌卫星细胞的分离纯化16-18
• 2.2.1 组织块培养法16-17
• 2.2.2 混合分离法17
• 2.2.3 联合酶消化法17
• 2.2.4 纯化17-18
• 2.3 骨路肌卫星细胞培养18-19
• 2.3.1 细胞贴壁培养18
• 2.3.2 肌卫星细胞培养条件18-19
• 2.4 肌卫星细胞的鉴定19
• 2.5 肌卫星细胞在肌肉修复中的作用19-20
• 2.6 肌卫星细胞激活与成肌分化的调控20-21
• 2.6.1 成肌调节因子对SC增殖与成肌分化的调节20
• 2.6.2 生长因子对SC增殖与成肌分化的调节20-21
• 2.7 运动训练对骨骼肌卫星细胞的影响21-22
• 2.7.1 长期运动训练对骨骼肌卫星细胞的影响21-22
• 2.7.2 短期运动训练对骨骼肌卫星细胞的影响22
• 2.7.3 一次急性运动对骨骼肌卫星细胞的影响22
• 3 钝挫伤对骨骼肌卫星细胞及其损伤修复的影响22-23
• 4 运动训练对MSTN的影响23-28
• 4.1 MSTN概述23-24
• 4.2 MSTN的生物功能24-25
• 4.2.1 对肌肉的影响24
• 4.2.2 参与脂肪累积24
• 4.2.3 影响细胞类型和器官系统的分化24-25
• 4.3 MSTN的作用机制25-26
• 4.3.1 MSTN加工的蛋白水解过程25
• 4.3.2 MSTN调控成肌细胞细胞周期抑制肌肉生长25-26
• 4.3.3 MSTN调节骨骼肌卫星细胞的机制26
• 4.4 运动训练对MSTN的影响26-28
• 第二部分 实验部分28-53
• 1 实验对象与方法28-30
• 1.1 实验对象28
• 1.2 动物分组28
• 1.3 动物模型28-29
• 1.3.1 钝挫伤模型28-29
• 1.3.2 力竭运动模型29
• 1.4 实验取材29-30
• 1.4.1 安静对照组取材29
• 1.4.2 钝挫伤组取材29-30
• 1.4.3 力竭运动组取材30
• 1.4.4 新生鼠组取材30
• 2 实验仪器、试剂及方法30-35
• 2.1 实验仪器30-31
• 2.2 实验试剂31
• 2.3 培养基的新配制31-32
• 2.4 大鼠骨骼肌卫星细胞的培养方法32-34
• 2.4.1 大鼠骨骼肌卫星细胞培养的条件要求32-33
• 2.4.2 大鼠骨骼肌卫星细胞的分离及培养方法33-34
• 2.5 酶联免疫实验的方法(ELISA)34-35
• 2.6 测定蛋白含量的方法35
• 2.6.1 蛋白测定条件要求35
• 2.6.2 蛋白含量的测定35
• 3 数据处理35-36
• 4 实验结果与分析36-49
• 4.1 大鼠一般情况观察36
• 4.2 对力竭运动及钝挫伤不同期间大鼠和新生鼠SC体外培养的结果36-47
• 4.2.1 各组培养1天后的卫星细胞状况36-38
• 4.2.2 各组培养3天后的卫星细胞状况38-41
• 4.2.3 各组培养5天后的卫星细胞状况41-44
• 4.2.4 各组培养第7天后的卫星细胞状况44-47
• 4.3 力竭运动及恢复期间大鼠骨骼肌MSTN的变化情况47-48
• 4.4 力竭运动及恢复期间大鼠心肌中MSTN的变化情况48-49
• 5 讨论与分析49-53
• 5.1 骨骼肌卫星细胞的培养49-50
• 5.2 力竭运动、钝挫伤和新生鼠SC体外培养增殖和分化的情况对比50-51
• 5.3 力竭运动对大鼠骨骼肌MSTN的影响51-52
• 5.4 力竭运动对大鼠心肌MSTN的影响52-53
• 6 结论53
• 参考文献53-62
• 致谢62-63

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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本文编号：736114