西宁地区不同方法推测大鼠死亡时间的适用性研究

发布时间：2017-08-26 19:45

  本文关键词：西宁地区不同方法推测大鼠死亡时间的适用性研究

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【摘要】：目的分别测量大鼠死后不同死亡时间尸温、后肢拉伸长度与抬高角度及脑、心脏和肝脏细胞核DNA,研究尸温、尸僵、细胞核DNA与死亡时间关系,为西宁地区利用此三种方法推测死亡时间提供理论依据。方法将大鼠随机分为不同死亡时间点组,以死后即刻0h为对照组。大鼠断颈处死后,1、用数字式体温仪测量大鼠肛温;2、用直尺和量角器分别测量后肢拉伸长度和抬高角度;3、取脑、心脏、肝脏,固定于福尔马林,采用改良Feulgen染色法染色,利用图像分析软件(IAT)测量染色区域的AOD、IOD、A、MD、PI及周长。结果1.尸温:温度(9~21)℃,湿度(20~31)%的室内环境中,大鼠尸温呈先快后慢的下降趋势,经历10.5h降与环境温度一致;与前一时间组比较,各组均有差异性,且差异具有统计学意义(P0.01)。肛温与死亡时间的回归方程:(0~2.5)h:Y=7.438-0.206X(r=-0.979);(2.5~5)h:Y=19.663-0.687X(r=-0.971);(5~10.5)h:Y=47.799-1.978X(r=-0.993)。2.尸僵:大鼠后肢拉伸长度及抬高角度随死亡时间推移其变化趋势为:形成期呈下降趋势,维持期在低谷维持,缓解期呈上升趋势。形成期、缓解期的拉伸程度及抬高角度与前一时间组比较均有差异,且差异有统计学意义(P0.05);与死亡时间均呈高度相关(r拉=-0.989,r抬=-0.972;r拉=0.968,r抬=0.958)。形成期中后肢拉伸长度与死亡时间的回归方程:Y=4.632-0.185X,抬高角度与死亡时间的回归方程:Y=4.53-0.106X。缓解期中后肢拉伸长度与PMI的回归方程为:Y=2.307X+9.237;抬高角度与PMI的回归方程为:Y=1.304X+9.726。3.DNA:随死亡时间的延长,脑、心脏、肝脏组织中AOD、IOD、A、MD及周长均呈现下降趋势,PI呈上升趋势。脑和肝脏细胞核DNA死后降解较心脏快。三个组织细胞核DNA各参数与死亡时间均有相关性,灰度参数中的IOD与死亡时间的相关性较AOD高,形态参数中的异形指数(PI)与死亡时间相关性较其余三个参数好。大鼠脑、心脏、肝脏细胞核DNA死后4320min仍未降解完全。结论1、西宁温度(19~21)℃,湿度(20~31)%的室内环境,利用大鼠尸温、尸僵及细胞核DNA推测死亡时间的适用范围不同;大鼠尸僵经历5h达到完全,维持7h后开始缓解,72h完全缓解;尸温2.5h内下降最快,经历10.5h与环温相同;死后72h细胞核DNA仍未完全降解。2、后肢拉伸长度及抬高角度与死亡时间相关性高,可作为早期死亡时间推断的新指标;3、反映DNA含量的指标——异形指数、积分光密度,与死亡时间的相关性较平均光密度、周长等指标好,可用于推断早期死亡时间。
【关键词】：PMI DNA 尸温 拉伸长度 抬高角度
【学位授予单位】：青海大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：D919
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-13
• 第1章 引言13-17
• 第2章 材料和方法17-21
• 2.1 实验材料17-18
• 2.1.1 实验动物17
• 2.1.2 实验仪器17
• 2.1.3 实验试剂17-18
• 2.2 实验方法18-20
• 2.2.1 实验分组18
• 2.2.2 动物处死18
• 2.2.3 测量方法18-20
• 2.2.3.1 测量尸温18-19
• 2.2.3.2 测量尸僵19
• 2.2.3.3 HE染色19
• 2.2.3.4 DNA－Feulgen染色19-20
• 2.3 统计学方法20-21
• 第3章 结果21-33
• 3.1 尸温21-23
• 3.2 尸僵23-26
• 3.3 HE染色26-27
• 3.4 Feulgen染色27-28
• 3.5 计算机图像分析28-33
• 第4章 讨论33-38
• 4.1 尸温与死亡时间关系33-34
• 4.1.1 测量方法的选择33
• 4.1.2 尸温变化趋势33
• 4.1.3 尸温与死亡时间的相关与回归33-34
• 4.1.4 影响因素的作用34
• 4.2 尸僵与死亡时间关系34-36
• 4.2.1 测量方法的选择34-35
• 4.2.2 尸僵变化趋势35-36
• 4.2.3 影响因素的作用36
• 4.3 细胞核DNA与死亡时间关系36-38
• 4.3.1 自溶现象——镜下观察36
• 4.3.2 实验原理36-37
• 4.3.3 变化趋势及影响因素37-38
• 小结38-39
• 第5章 结论39-40
• 参考文献40-44
• 致谢44-45
• 作者简介45-46
• 综述 死亡时间推断中尸冷、尸僵、DNA 的应用研究进展46-55
• 参考文献52-55

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本文编号：742621