模拟微重力对猕猴肺组织结构及基质金属蛋白酶表达的影响

发布时间：2017-08-29 04:17

  本文关键词：模拟微重力对猕猴肺组织结构及基质金属蛋白酶表达的影响

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【摘要】：目的:探讨模拟微重力效应对猕猴肺组织结构的影响及对猕猴肺组织基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-1,2,3,7,8,9,11,12和13 mRNA及蛋白表达水平的影响。方法:采用国际通用地面模拟微重力方法,在特殊装置上以猕猴头低位-10°模型模拟航天失重,将15只健康青壮年雄性猕猴,按体重配对,随机分为3组,每组5只,即对照组:在笼内自由活动6周;模拟微重力组:在特制的头低位-10°模拟微重力效应装具上生活6周;恢复组:在同样的装具上生活6周,随后在笼内自由活动4周。用HE染色、透射电镜(transmission electron microscope,TEM)分别观察各组猕猴肺组织大体结构及超微结构的改变;实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantification PCR,FQ-PCR)检测各组猕猴肺组织MMP-1,2,3,7,8,9,11,12和13 mRNA表达情况,根据mRNA表达改变,免疫印迹法(Western blotting,WB)检测MMP2、MMP7、MMP9在肺组织中的表达情况,免疫组织化学染色法观察MMP2、MMP7、MMP9在肺组织中的定位表达情况。结果:HE染色提示对照组猕猴肺组织结构形态完整,无病理改变;模拟微重力组和恢复组猕猴肺组织可见肺泡间隔增厚,部分肺泡融合,肺泡腔及间质内可见淋巴细胞浸润,恢复组上述改变较模拟微重力组轻。超微结构改变主要表现为模拟微重力组及恢复组可见肺泡上皮细胞核体积变小,形态不规则,胞质内板层小体(Lamellar body,Lb)数量增多、体积增大、排空加强,部分发生空泡样变;胞质内线粒体肿胀。FQ-PCR结果显示各组猕猴肺组织均不表达MMP-1,3,8,11,12,13,但可表达MMP-2,7,9;另外,检测结果还显示模拟微重力效应可引起猕猴肺组织MMP2 mRNA表达增强,但各组间比较差异无统计学意义(F=2.56,P0.05);模拟微重力效应可引起MMP7 mRNA表达减弱,模拟微重力组与对照组相比,差异有统计学意义(F=4.33,P0.05),其余各组间比较,差异无显著性(F=4.33,P0.05);模拟微重力效应可引起MMP9 mRNA表达减弱,各组间比较,差异无统计学意义(F=0.85,P0.05)。免疫组织化学染色结果显示各组猕猴肺组织均可表达MMP-2、7、9,阳性细胞主要见于支气管上皮细胞、血管内皮细胞、肺泡上皮细胞,胞浆、胞核均有表达,以胞浆表达为主。WB结果显示各组猕猴肺组织均可表达或弱表达MMP2、MMP7、MMP9蛋白,进行半定量检测发现,模拟微重力效应可引起猕猴肺组织MMP2、MMP7蛋白表达升高,使MMP9蛋白表达减弱。结论:模拟微重力可引起猕猴肺组织产生病理损伤和超微结构改变;模拟微重力可引起猕猴肺组织MMP2、MMP7蛋白表达增强,MMP9表达减弱,这些变化可能参与失重状态下肺组织的病理损伤和超微结构的损伤过程。
【关键词】：模拟微重力 猕猴 基质金属蛋白酶 肺组织
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R85
【目录】：

• 中英文缩略词对照表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 引言11-12
• 第一部分 模拟微重力对猕猴肺组织结构的影响12-18
• 材料与方法12-15
• 结果15-17
• 讨论17-18
• 第二部分 模拟微重力对猕猴肺组织基质金属蛋白酶的影响18-35
• 材料与方法18-27
• 结果27-32
• 讨论32-35
• 结论35-36
• 参考文献36-38
• 附录38-40
• 致谢40-42
• 综述42-50
• 参考文献46-50

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本文编号：751260