不同训练状态大鼠心肌GRP78、CHOP、Caspase-12的表达

发布时间：2017-09-26 22:09

  本文关键词：不同训练状态大鼠心肌GRP78、CHOP、Caspase-12的表达

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【摘要】：实验目的:适当的运动训练可以提高心肌组织的功能,而长期过度训练则会导致心肌组织的损伤,甚至出现心源性猝死等一系列的病症。运动引起的心肌肥大伴随心肌结构的变化,是否会引起心肌内质网应激以及细胞凋亡报道尚少。因此本研究通过建立不同训练强度、不同训练周期的大鼠运动模型,测定大鼠左心室心肌内质网应激相关蛋白GRP78、CHOP、Caspase-12蛋白的表达情况,探讨运动训练与心肌内质网应激发生中的作用和机制。实验方法:8周龄SPF级雄性SD大鼠52只,分为5周和10周两个运动训练模型。(1)5周运动组模型:安静对照组(n=6)、恒时定速组(n=8)、速度递增组(n=8)、时间递增组(n=8);安静对照组不运动只进行正常笼内饲养。跑台运动,每周训练5天。运动组大鼠初始速度10m/min,恒时定速组第1周速度逐渐增加到24 m/min,持续60 min,后4周速度和时间保持不变;速度递增组每周速度递增约3m/min,第5周达到24m/min,持续60 min;时间递增组的训练持续时间第1周速度逐渐增加到24 m/min,持续运动时间每周增加30min,第5周运动持续时间增加到150 min;(2)10周运动组模型:安静对照组(n=6)、恒时定速组(n=8)、速度递增组(n=8);10周模型运动组,前五周训练方案同5周运动组模型,恒时定速组24m/min,持续60min,直到10周训练结束;速度递增组第10周速度达到36m/min,持续时间60min。每周定期对大鼠进行称重并记录,每个模型在规定的训练时间结束后24小时解剖大鼠取材,称量全心重、左心重;取左心室组织,用western blot检测GRP78、CHOP、Caspase-12蛋白表达量,最后计算大鼠的心脏系数、左心室系数。实验结果:5周运动模型:(1)速度递增组、时间递增组大鼠与安静组相比较体重、心系数、左心室系数有显著性变化,而恒时定速组较安静组差异无显著性;(2)时间递增组大鼠心肌GRP78蛋白较安静组显著升高,CHOP、Caspase-12蛋白差异无显著性;(3)恒时定速组、速度递增组大鼠心肌GRP78、CHOP、Caspase-12蛋白表达较安静组差异无显著性。10周运动模型:(1)速度递增组大鼠与安静对照组相比体重、心系数、左心室系数差异有显著性,而恒时定速组与安静对照组相比仅体重出现显著性差异;(2)恒时定速组、速度递增组大鼠心肌GRP78、CHOP、Caspase-12蛋白表达较安静组差异无显著性。实验结论:(1)5周的运动训练中,以延长运动持续时间为特征的耐力训练可能会诱发心肌内质网应激,而与速度递增为特征的运动关系不明显。(2)尽管延长训练时间有GRP78蛋白升高,而CHOP、Caspase-12未出现明显变化,说明内质网应激的程度未达到诱发细胞凋亡。(3)10周训练以速度恒定或速度递增的耐力运动GRP78蛋白无显著变化说明即使延长运动训练周期也不会出现心肌内质网应激,并且CHOP、caspase-12也没有明显变化。
【关键词】：大鼠 心肌肥大 运动 内质网应激 细胞凋亡
【学位授予单位】：首都体育学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R87
【目录】：

• 中文摘要5-6
• Abstract6-8
• 缩略词中英文对照表8-9
• 1 前言9-16
• 1.1 选题依据9-10
• 1.2 选题意义10-11
• 1.2.1 现实意义10
• 1.2.2 理论意义10-11
• 1.3 文献综述11-16
• 1.3.1 内质网与内质网应激11-12
• 1.3.2 内质网应激反应与细胞组织凋亡12-13
• 1.3.3 内质网应激与心脏类疾病的发生13-14
• 1.3.4 内质网应激与运动的关系14-15
• 1.3.5 GRP78、CHOP、caspase-12蛋白在内质网应激中的作用机制15-16
• 2 研究对象和方法16-23
• 2.1 研究对象16-17
• 2.2 技术路线图17
• 2.3 实验仪器与试剂17-19
• 2.3.1 实验仪器17-18
• 2.3.2 实验试剂18
• 2.3.3 蛋白质电泳及转膜缓冲液配方18-19
• 2.4 研究方法19-20
• 2.4.1 大鼠模型的训练与分组19-20
• 2.4.2 样品制备20
• 2.5 组织样本检测20-23
• 2.5.1 体重、全心重、左心室重的称量20
• 2.5.2 心肌细胞蛋白的提取20-21
• 2.5.3 免疫印迹（western blot）检测分析21-23
• 2.6 数据分析23
• 3 研究结果23-32
• 3.1 常规指标监测23-27
• 3.1.1 5周、10周运动模型大鼠体重变化23-25
• 3.1.2 各组大鼠全心重、左心重、心系数、左心系数比较25-27
• 3.2 心肌组织蛋白表达27-32
• 3.2.1 5周模型大鼠左室心肌GRP78蛋白的表达27-28
• 3.2.2 5周模型大鼠左室心肌CHOP蛋白的表达28-29
• 3.2.3 5周模型大鼠左室心肌Caspase12蛋白的表达29-30
• 3.2.4 10周模型大鼠左室心肌中GRP78蛋白的表达30
• 3.2.5 10周模型大鼠左室心肌CHOP蛋白的表达30-31
• 3.2.6 10周模型大鼠左室心肌中Caspase12蛋白的表达31-32
• 4 分析与讨论32-35
• 4.1 运动训练对大鼠心指数的影响32-33
• 4.2 不同运动方式对大鼠心肌GRP78蛋白表达的影响33-34
• 4.3 不同运动方式对大鼠心肌CHOP蛋白表达的影响34
• 4.4 不同运动方式对大鼠心肌Caspase-12蛋白表达的影响34-35
• 5 结论35-36
• 6 参考文献36-40
• 致谢40

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

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本文编号：925984