三维回转骨细胞条件培养基对成骨细胞功能的调节作用
本文关键词:三维回转骨细胞条件培养基对成骨细胞功能的调节作用
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【摘要】:骨细胞是骨组织中主要的力学感受器.研究失重条件下骨细胞对效应细胞的调控作用对于揭示失重引起的骨丢失机制具有重要意义.本研究拟采用三维回转器模拟失重,探讨模拟失重骨细胞条件培养基(RCM)对成骨功能的调节作用.小鼠骨细胞系MLO-Y4三维回转培养72h后,收集回转条件培养基(RCM)和未回转对照组的条件培养基(CCM),用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法、对硝基苯磷酸(pNPP)法和流式细胞术(FCM)分别检测RCM对小鼠成骨样细胞系MC3T3-E1增殖、周期及细胞分泌碱性磷酸酶(ALP)活性的影响.采用RT-PCR方法检测RCM对MC3T3-E1成骨相关基因表达的影响.结果显示,三维随机回转72h后的MLO-Y4RCM可促进MC3T3-E1增殖:条件培养基培养MC3T3-E124h和48h后,50%RCM组比CCM组分别增加了1.62和1.60倍,差异显著(*P0.05),培养72h后,100%RCM组比CCM组增加了1.69倍,差异显著(*P0.05);细胞周期检测结果表明,条件培养基培养24、48和72h后,RCM组部分恢复CCM引起的MC3T3-E1细胞周期阻滞;MC3T3-E1的ALP活性在RCM组和CCM组之间无差异;RT-PCR检测结果表明,100%MLO-Y4条件培养基培养MC3T3-E148h后,降低了成骨相关基因ALP、Runx2、OPN、OC的表达.差异显著(*P0.05,**P0.01,***P0.001).实验结果表明,三维随机回转模拟失重培养骨细胞72h后的条件培养基促进了成骨细胞增殖,抑制了成骨相关基因表达.
【作者单位】: 空间生物实验模拟技术重点实验室西北工业大学特殊环境生物物理学研究所 西北工业大学生命科学院;
【关键词】: 骨细胞条件培养基 成骨细胞 三维回转 成骨功能
【基金】:国家自然科学基金面上项目(No.30970689)~~
【分类号】:R85
【正文快照】: 空间失重引起的骨丢失是航天员长期空间飞行面临的最主要的健康威胁之一.已有研究[1,2]表明,空间失重性骨丢失主要是由于成骨细胞功能下降引起骨形成减少所致.骨重建是一个多细胞之间相互协调以维持骨的正常形态和功能的动态过程,其中骨细胞在调节骨重建中起了关键作用[3].骨
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,本文编号:1066094
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